Ovipositional Behavior of Anopheles

Ovipositional Behavior of Anopheles gambiae Mosquitoes
Jeffrey Agyapong, Joseph Chabi, [...], and Takashi Suzuki

Additional article information

Abstract
Mosquito eggs laid within two hours are necessary for transgenic (injection) studies, because mosquito eggs become hard after that period. Thus, in order to have eggs available within this two-hour window, it is important to understand the ovipositional behavior of Anopheles gambiae s.s.. In the present study, the ovipositional behavior of An. gambiae s.s. (Kisumu) was investigated in several different conditions: age of mosquitoes, time post blood meal to access oviposition substrate, and light conditions. Two groups of mosquitoes, 3–5 days old and 9–11 days old were blood-fed. For those mosquito groups, an oviposition dish was set either at 48 hours or 72 hours after the blood meal either in a light condition or in an artificial dark condition. The number of laid eggs was compared among the different conditions. The 3–5 day-old mosquitoes apparently produced a higher number of eggs than 9–11 day-old mosquitoes, while there was no significant difference between the two groups. The number of laid eggs per one surviving blood-fed mosquito in the dark condition was significantly higher than that in the light condition (p = 0.03). Providing an oviposition dish at 72 hours after blood meal resulted in a significantly higher number of laid eggs per one surviving blood-fed mosquito than at 48 hours after blood meal (p = 0.03). In conclusion, the optimal condition to have readily available egg supply for transgenic analysis was as follows: 3–5 day-old mosquitoes with an oviposition dish placed at 72 hours after the blood meal in a dark environment.

Keywords: Anopheles gambiae, ovipositional behavior, transgenic study
Introduction
Malaria is caused by Plasmodium, a protozoan parasite and transmitted by the bite of infected mosquitoes of genus Anopheles. Annually 250 million people are infected and close to one million people, mostly children in sub-Saharan Africa were killed by malaria [1]. Insecticide-based control such as massive use of insecticides and insecticide-impregnated bed nets has been one of the most successful methods to control malaria [2]. However, emergence and spread of insecticide-resistant Anopheles observed throughout the world including Africa pose a threat to the gains made in malaria control [3, 4]. Novel approaches to the control of vectors are therefore urgently needed to combat malaria.

Advances in insect molecular biology, in particular the development of germ-line transformation, have opened a new avenue for the control of malaria [5]. One of the major goals of gene-modification studies is to generate malaria parasite-resistant (refractory) An. gambiae s.s., the most important vector of human malaria in Africa, and to replace the wild-type An. gambiae s.s. population that is susceptible to malaria parasites with the genetically modified mosquito population.

The first key step for germ-line transformation is to obtain a requisite number of mosquito eggs for injection. Since mosquito eggshell becomes hard within two hours after being laid [6], it becomes difficult to inject genes into mosquito eggs using a glass needle after that period. Therefore clarification of the conditions in which mosquito eggs laid within two hours can be efficiently obtained is a crucial prerequisite for gene-modification studies. Compared to Anopheles stephensi, which is the predominant Anopheles vector in the Indian subcontinent, An. gambiae s.s. has been used less frequently in embryo transgenic studies and relatively little information is available regarding its ovipositional behavior [7]. In the present study, we analyzed ovipositional behavior of An. gambiae s.s. with reference to the following conditions: age of mosquitoes, time post blood meal to access ovipostion substrate, and light conditions at oviposition.

Methods
Mosquitoes
An. gambiae s.s. (Kisumu strain) mosquito colony was maintained by the following procedures. The mosquitoes were reared in a climate controlled insectary at a temperature of 28 ± 1°C, 12L:12D photoperiod and relative humidity of 70 ± 10%. The adults were kept in holding cages (30 × 30 × 30 cm) with access to 10% sucrose (WAKO) solution. 4–6 day-old females were blood-fed on rabbits and provided with oviposition dishes, covered with moist filter paper. The eggs laid on the filter paper were transferred to plastic trays. Hatched larvae were fed on fish meal (Tetramin®). Pupae were collected in small cups and transferred to holding cages.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ลักษณะการทำงานของ Anopheles gambiae ovipositional ยุงเจฟฟรีย์ Agyapong โจเซฟ Chabi, [...], และซูซูกิทะกะชิรายละเอียดเพิ่มเติมบทคัดย่อไข่ของยุงที่วางภายในสองชั่วโมงจำเป็นสำหรับศึกษาจำลอง (ฉีด) เพราะไข่ยุงกลายเป็นสิ่งที่ยากหลังจากรอบระยะเวลานั้น ดังนั้น เพื่อให้มีไข่มีภาย 2 ชั่วโมง จึงต้องเข้าใจพฤติกรรมของ Anopheles gambiae ovipositional เอส ในการศึกษาปัจจุบัน พฤติกรรมของชม gambiae ovipositional เอส (Kisumu) ถูกสอบสวนในหลายเงื่อนไข: อายุของยุง เลือดเวลาโพสต์เข้า oviposition พื้นผิว และแสง กลุ่มอายุ 3-5 วันและอายุ 9 – 11 วัน ยุงถูกเลี้ยงด้วยเลือด สำหรับกลุ่มยุง จาน oviposition ที่ถูกกำหนด เวลา 48 ชั่วโมง หรือ 72 ชั่วโมงหลังจากกินเลือด ในสภาพแสง หรือ ในสภาวะมืดเทียม จำนวนของไข่ถูกเปรียบเทียบในเงื่อนไขต่าง ๆ วันที่ 3-5-ยุงเก่าชัดผลิตสูงจำนวนไข่มากกว่าวันที่ 9 – 11-เก่ายุง ในขณะที่มีไม่มีความแตกต่างระหว่างสองกลุ่ม จำนวนไข่ต่อหนึ่งรอดตายเลือดเลี้ยงกันยุงในสภาพมืดเป็นอย่างมีนัยสำคัญสูงกว่าในสภาพแสง (p = 0.03) ให้จาน oviposition เป็นเวลา 72 ชั่วโมงหลังจากกินเลือดส่งผลให้จำนวนสูงวางไข่ต่อหนึ่งรอดตายเลือดเลี้ยงกันยุงมากกว่า 48 ชั่วโมงหลังจากกินเลือด (p = 0.03) ในบทสรุป เงื่อนไขที่เหมาะสมจะมีอุปทานไข่พร้อมใช้งานสำหรับการจำลองวิเคราะห์ได้ดังนี้: 3-5 วัน-ยุงเก่ากับจาน oviposition อยู่ที่ 72 ชั่วโมงหลังจากกินเลือดในสภาพแวดล้อมที่มืดคำสำคัญ: Anopheles gambiae, ovipositional ลักษณะการทำงาน ศึกษาจำลองแนะนำโรคมาลาเรียเป็นสาเหตุจากพลาสโมเดียม ปรสิต protozoan และส่ง โดยการกัดของยุงติดเชื้อสกุล Anopheles ทุกปีมีการติดเชื้อ 250 ล้านคน และอยู่ใกล้กับหนึ่งล้านคน ส่วนใหญ่เป็นเด็กในประเทศไทยถูกฆ่า โดยมาลาเรีย [1] ควบคุมใช้ยาฆ่าแมลงเช่นการใช้ยาฆ่าแมลงและยาฆ่าแมลงชุบมุ้งขนาดใหญ่ได้รับการประสบความสำเร็จในการควบคุมโรคมาลาเรีย [2] อย่างไรก็ตาม เกิดและแพร่กระจายของยุงก้นปล่องแมลงทนสังเกตทั่วโลกรวมทั้งทวีปแอฟริกาเป็นภัยคุกคามกำไรผู้ควบคุมมาลาเรีย [3, 4] วิธีการใหม่ ๆ ในการควบคุมของเวกเตอร์ได้ดังนั้นจึงจำเป็นเร่งด่วนในการต่อสู้กับโรคมาลาเรียความก้าวหน้าทางชีววิทยาโมเลกุลแมลง โดยเฉพาะอย่างยิ่งการพัฒนาของการแปลงบรรทัดจมูก ได้เปิดอเวนิวใหม่สำหรับการควบคุมโรคมาลาเรีย [5] หนึ่งในเป้าหมายสำคัญของการศึกษาการปรับเปลี่ยนยีนคือการสร้างโรคมาลาเรียพยาธิทน (ทนไฟ) ชม gambiae เอส เวกเตอร์สำคัญที่สุดของมนุษย์โรคมาลาเรีย ในแอฟริกา และแทนป่าชนิดชม gambiae เอสประชากรที่อ่อนแอต่อโรคมาลาเรียปรสิตกับประชากรยุงดัดแปลงพันธุกรรมขั้นตอนแรกสำคัญสำหรับการแปลงบรรทัดจมูกจะรับจำนวนไข่ยุงสำหรับฉีดจำเป็น เนื่องจากเปลือกไข่ยุงจำนวนมากภายในสองชั่วโมงหลังจากมีการวาง [6], มันก็ยากในการเพิ่มยีนไข่ยุงใช้เข็มแก้วหลังจากรอบระยะเวลานั้น ดังนั้น การชี้แจงเงื่อนไขที่วางไว้ภายในสองชั่วโมงไข่ยุงได้อย่างมีประสิทธิภาพได้เป็นข้อกำหนดเบื้องต้นที่สำคัญสำหรับการศึกษาการปรับเปลี่ยนยีน เมื่อเทียบกับ Anopheles stephensi ซึ่งเป็นเวกเตอร์ Anopheles เด่นในอนุทวีปอินเดีย ชม gambiae เอสมีการใช้น้อยในตัวอ่อนหนูพันธุ์ค่อนข้างน้อยข้อมูลได้เกี่ยวกับการทำงานของ ovipositional [7] ในการศึกษาปัจจุบัน เราวิเคราะห์ ovipositional ลักษณะการทำงานของชม gambiae เอสโดยอ้างอิงเงื่อนไขต่อไปนี้: อายุของยุง เลือดเวลาโพสต์เข้า ovipostion พื้นผิว และสภาพแสงที่ ovipositionวิธียุงชม gambiae เอส (สายพันธุ์ Kisumu) ยุงอาณานิคมถูกดูแล โดยขั้นตอนต่อไปนี้ ยุงถูกเลี้ยงดูใน insectary การควบคุมอุณหภูมิที่อุณหภูมิ 28 ± 1° C, 12L: 12D ช่วงแสงและความชื้นสัมพัทธ์ 70 ± 10% ผู้ใหญ่ถูกเก็บไว้ในกรง (30 × 30 × 30 เซนติเมตร) ถือเข้าโซลูชันซูโครส (WAKO) 10% วันที่ 4 – 6- เลี้ยงเลือดในกระต่ายตัวเมียเก่า และมีอาหาร oviposition ปกคลุม ด้วยกระดาษกรองเปียก ไข่ที่วางบนกระดาษกรองถูกโอนไปยังถาดพลาสติก ขีดตัวอ่อนถูกเลี้ยงด้วยอาหารปลา (Tetramin®) ดักแด้ถูกรวบรวมไว้ในถ้วยเล็ก ๆ และโอนย้ายไปถือกรง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พฤติกรรม Ovipositional ของยุงก้นปล่อง gambiae ยุง
เจฟฟรีย์ Agyapong โจเซฟ Chabi [ ... ] และทาคาชิซูซูกิ

ข้อมูลเพิ่มเติมบทความ

บทคัดย่อ
ไข่ยุงวางภายในสองชั่วโมงเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการดัดแปรพันธุกรรม (ฉีด) การศึกษาเพราะไข่ยุงกลายเป็นยากหลังจากระยะเวลาที่ ดังนั้นเพื่อให้มีไข่ที่มีอยู่ภายในหน้าต่างนี้สองชั่วโมงก็เป็นสิ่งสำคัญที่จะเข้าใจพฤติกรรม ovipositional ของยุงก้นปล่อง gambiae เอสเอส ในการศึกษาปัจจุบันพฤติกรรมของ ovipositional gambiae SS (Kisumu) ถูกตรวจสอบในสภาพที่แตกต่างกัน: อายุยุงเวลาอาหารเลือดโพสต์ในการเข้าถึงพื้นผิวการวางไข่และสภาพแสง กลุ่มที่สองของยุง 3-5 วันเก่าและ 9-11 วันเก่าถูกกินเลือด สำหรับกลุ่มยุงเหล่านั้นจานวางไข่ถูกกำหนดทั้งใน 48 ชั่วโมงหรือ 72 ชั่วโมงหลังจากที่รับประทานอาหารทั้งเลือดในสภาพแสงหรือในสภาพมืดเทียม จำนวนไข่วางเทียบหมู่เงื่อนไขที่แตกต่างกัน ยุง 3-5 วันเก่า ๆ ที่เห็นได้ชัดผลิตเป็นจำนวนที่สูงขึ้นของไข่กว่ายุง 9-11 วันเก่า ๆ ในขณะที่ไม่มีความแตกต่างกันระหว่างสองกลุ่ม จำนวนไข่วางต่อหนึ่งรอดตายยุงกินเลือดอยู่ในสภาพมืดสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญในสภาพแสง (p = 0.03) ให้จานวางไข่ที่ 72 ชั่วโมงหลังรับประทานอาหารในเลือดส่งผลให้ในจำนวนที่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของไข่วางต่อหนึ่งรอดตายยุงกินเลือดกว่า 48 ชั่วโมงหลังรับประทานอาหารในเลือด (p = 0.03) สรุปได้ว่าสภาวะที่เหมาะสมที่จะมีอุปทานไข่ที่พร้อมสำหรับการวิเคราะห์ยีนดังนี้ยุง 3-5 วันเก่ากับจานวางไข่อยู่ที่ 72 ชั่วโมงหลังอาหารมื้อเลือดในสภาพแวดล้อมที่มืด.

คำสำคัญ: ยุงก้นปล่อง gambiae พฤติกรรม ovipositional การศึกษายีน
บทนำ
มาลาเรียที่เกิดจากเชื้อ, ปรสิตโปรโตซัวและส่งโดยการกัดของยุงที่ติดเชื้อชนิดยุงก้นปล่อง เป็นประจำทุกปี 250 ล้านคนติดเชื้อและอยู่ใกล้กับหนึ่งล้านคนซึ่งส่วนใหญ่เป็นเด็กใน sub-Saharan Africa ถูกฆ่าตายด้วยโรคมาลาเรีย [1] การควบคุมยาฆ่าแมลงที่ใช้เช่นการใช้งานขนาดใหญ่ของยาฆ่าแมลงและยาฆ่าแมลงที่ชุบมุ้งได้รับหนึ่งในวิธีการที่ประสบความสำเร็จที่สุดในการควบคุมโรคมาลาเรีย [2] อย่างไรก็ตามการเกิดขึ้นและการแพร่กระจายของยาฆ่าแมลงที่ทนยุงก้นปล่องสังเกตทั่วโลกรวมทั้งแอฟริกาเป็นภัยคุกคามต่อผลกำไรที่เกิดขึ้นในการควบคุมมาลาเรีย [3, 4] วิธีการใหม่ในการควบคุมของเวกเตอร์จึงมีความจำเป็นเร่งด่วนที่จะต่อสู้กับโรคมาลาเรีย.

ความก้าวหน้าในทางอณูชีววิทยาของแมลงโดยเฉพาะอย่างยิ่งการพัฒนาของการเปลี่ยนแปลงเชื้อโรคสายได้เปิดถนนสายใหม่สำหรับการควบคุมโรคมาลาเรีย [5] หนึ่งในเป้าหมายสำคัญของการศึกษายีนการปรับเปลี่ยนคือการสร้างมาลาเรียปรสิตทน (วัสดุทนไฟ) ความ gambiae SS, เวกเตอร์ที่สำคัญที่สุดของโรคมาลาเรียของมนุษย์ในทวีปแอฟริกาและเพื่อทดแทนป่าพิมพ์ gambiae ประชากรเอสเอสที่มีความอ่อนไหวต่อเชื้อมาลาเรียกับประชากรยุงดัดแปลงพันธุกรรม.

ขั้นตอนแรกที่สำคัญสำหรับการเปลี่ยนแปลงเชื้อโรคสายเพื่อให้ได้จำนวนที่จำเป็นของไข่ยุงฉีด ตั้งแต่เปลือกไข่ยุงกลายเป็นยากภายในสองชั่วโมงหลังจากที่ถูกวาง [6] มันจะกลายเป็นเรื่องยากที่จะฉีดยีนเข้าไปในไข่ยุงโดยใช้เข็มแก้วหลังจากระยะเวลาที่ ดังนั้นการชี้แจงของเงื่อนไขในการที่ไข่ยุงวางภายในสองชั่วโมงสามารถรับได้อย่างมีประสิทธิภาพเป็นสิ่งที่จำเป็นที่สำคัญสำหรับการศึกษายีนการปรับเปลี่ยน เมื่อเทียบกับยุงก้นปล่อง stephensi ซึ่งเป็นเวกเตอร์ยุงก้นปล่องเด่นในชมพูทวีป gambiae เอสเอสได้ถูกนำมาใช้ไม่บ่อยในการศึกษายีนตัวอ่อนและข้อมูลค่อนข้างน้อยสามารถใช้ได้เกี่ยวกับพฤติกรรมของ ovipositional [7] ในการศึกษาปัจจุบันเราวิเคราะห์พฤติกรรม ovipositional ของ เอสเอส gambiae มีการอ้างอิงถึงเงื่อนไขต่อไปนี้. อายุยุงเวลาอาหารเลือดโพสต์ในการเข้าถึงสารตั้งต้น ovipostion และสภาพแสงที่วางไข่

วิธี
ยุง
gambiae SS (Kisumu ความเครียด) อาณานิคมยุงถูกเก็บรักษาไว้โดยขั้นตอนต่อไป ยุงถูกเลี้ยงดูในสภาพภูมิอากาศควบคุม insectary ที่อุณหภูมิ 28 ± 1 ° C, 12L: 12D แสงและความชื้นสัมพัทธ์ 70 ± 10% ผู้ใหญ่ที่ถูกเก็บไว้ในกระชังถือ (30 × 30 × 30 ซม.) ที่มีการเข้าถึง 10% ซูโครส (WAKO) วิธีการแก้ปัญหา หญิง 4-6 วันเก่าเลือดเลี้ยงกระต่ายและให้มีจานวางไข่ปกคลุมด้วยกระดาษกรองชื้น ไข่วางบนกระดาษกรองถูกโอนไปยังถาดพลาสติก ตัวอ่อนที่ฟักออกมาได้รับการเลี้ยงดูในปลาป่น (Tetramin®) pupae ถูกเก็บไว้ในถ้วยขนาดเล็กและโอนไปยังกรงถือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พฤติกรรมของยุง ovipositional นอฟีเล็ส แกมบิเเจฟฟรีย์ agyapong โจเซฟ chabi , [ . . . ] และ ทาคาชิ ซูซูกิรายละเอียดบทความเพิ่มเติมบทคัดย่อยุงไข่ภายในสองชั่วโมงเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับอุตสาหกรรม ( ฉีด ) การศึกษา เพราะยุงไข่กลายเป็นยาก หลังจากระยะเวลาที่ ดังนั้น เพื่อให้มีไข่ที่มีอยู่ในหน้าต่างสองชั่วโมงนี่ มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะเข้าใจพฤติกรรมของ ovipositional นอฟีเล็ส แกมบิเ SS . ในการศึกษาพฤติกรรม ovipositional ของ gambiae SS ( Kisumu ) พบว่าในเงื่อนไขที่แตกต่างกันหลาย : อายุของยุง เวลาโพสต์เลือดอาหารเข้าถึงวางไข่ตั้งต้น และสภาพแสง สองกลุ่มของยุง 3 – 5 วันอายุ 9 – 11 วัน เก่า เก่า คือ เลือดเลือด พวกยุงกลุ่มที่วางไข่จานเป็นชุดให้ใน 48 ชั่วโมง หรือ 72 ชั่วโมงหลังจากเลือดป่นทั้งสภาพแสง หรือ ในเงื่อนไขที่มืดเทียม จำนวนไข่เทียบระหว่างเงื่อนไขที่แตกต่างกัน 3 – 5 วันแก่ยุง apparently ผลิตสูงกว่าจำนวนของไข่มากกว่า 9 – 11 วันเก่า ยุง ในขณะที่มีความแตกต่างระหว่างสองกลุ่ม จำนวนไข่ต่อหนึ่งรอดตายเลือดเลี้ยงยุงในสภาพมืดสูงกว่าในสภาพแสง ( p = 0.03 ) การวางไข่จาน 72 ชั่วโมงหลังเลือดอาหารมีผลในการเพิ่มขึ้นของจำนวนไข่ต่อหนึ่งรอดตายเลือดเลี้ยงยุงกว่า 48 ชั่วโมงหลังจากเลือดอาหาร ( p = 0.03 ) สรุปได้ว่า สภาวะที่เหมาะสมจะจัดหาไข่พร้อมใช้สำหรับการวิเคราะห์พันธุกรรมดังนี้ 3 – 5 วัน ยุงวางไข่เก่ากับจานอยู่ที่ 72 ชั่วโมงหลังจากเลือดอาหารในสภาพแวดล้อมที่มืดคำสำคัญ : นอฟีเล็ส แกมบิเ พฤติกรรม ovipositional การศึกษาอุตสาหกรรมแนะนำมาลาเรียเกิดจากปรสิตโปรโตซัวพลาสโมเดียม , และส่งโดยการกัดของยุงที่ติดเชื้อของ อ.ส.ม.ท. . ปีละ 250 ล้านคน ติดเชื้อและปิดหนึ่งล้านคน ส่วนใหญ่เป็นเด็กในแอฟริกา ถูกฆ่าตายด้วยโรคมาลาเรีย ซับซาฮา [ 1 ] ยาฆ่าแมลงที่ใช้ควบคุม เช่น การใช้ขนาดใหญ่ของแมลงและแมลงเตียงมุ้งชุบมีหนึ่งในวิธีการที่ประสบความสำเร็จมากที่สุดในการควบคุมโรคมาลาเรีย [ 2 ] อย่างไรก็ตาม การเกิดและการแพร่กระจายของยุงก้นปล่องทนต่อยาฆ่าแมลงได้ทั่วโลกรวมทั้งแอฟริกาเป็นภัยคุกคามต่อผลประโยชน์ในการควบคุมโรคมาลาเรีย [ 3 , 4 ] นวนิยายแนวทางการควบคุมเวกเตอร์จึงต้องการด่วนเพื่อต่อสู้กับมาลาเรียความก้าวหน้าในการศึกษาชีววิทยาระดับโมเลกุล แมลง โดยเฉพาะการพัฒนาการเปลี่ยนแปลงสายพันธุ์ได้เปิดถนนสายใหม่สำหรับการควบคุมมาลาเรีย [ 5 ] หนึ่งในเป้าหมายหลักของการศึกษาคือการสร้างการปรับเปลี่ยนยีนต้านปรสิตมาลาเรีย ( ทนไฟ ) . gambiae SS ที่สำคัญที่สุดของมนุษย์เวกเตอร์ของโรคมาลาเรียในแอฟริกาและแทนที่ของ . gambiae SS ประชากรที่เสี่ยงต่อปรสิตมาลาเรียที่มีการดัดแปลงทางพันธุกรรมประชากรยุงแรกที่สำคัญสำหรับการเปลี่ยนแปลงสายพันธุ์เพื่อให้ได้จำนวนที่จำเป็นของยุงไข่สำหรับฉีด เนื่องจากเปลือกไข่กลายเป็นยุงยากภายใน 2 ชั่วโมงหลังถูกปลด [ 6 ] , มันจะกลายเป็นเรื่องยากที่จะฉีดยีนเข้าไปในยุงไข่ใช้เข็มแก้วหลังจากรอบระยะเวลา ดังนั้นผลของเงื่อนไขที่ยุงไข่ภายใน 2 ชั่วโมง สามารถมีประสิทธิภาพได้เป็นสิ่งจำเป็นอย่างยิ่งสำหรับจีน การศึกษา เมื่อเทียบกับ stephensi ยุงก้นปล่อง ซึ่งเป็นเด่นจากเวกเตอร์ในทวีปอินเดีย , . gambiae SS มีการใช้น้อยกว่าในคัพภยีนการศึกษาและข้อมูลค่อนข้างน้อยสามารถใช้ได้เกี่ยวกับพฤติกรรม ovipositional [ 7 ] ในการศึกษาครั้งนี้เราวิเคราะห์พฤติกรรม ovipositional ของ gambiae SS มีการอ้างอิงถึงเงื่อนไขต่อไปนี้ : อายุของยุง เวลาโพสต์เลือดอาหารเข้าถึง ovipostion พื้นผิวและสภาพแสงที่วางไข่ .วิธีการยุง. gambiae SS ( Kisumu เมื่อย ) อาณานิคมยุงไว้ โดยมีขั้นตอนดังนี้ ยุงที่ถูกเลี้ยงใน insectary ควบคุมอากาศที่อุณหภูมิ 28 ± 1 ° C , 12L : 12B แสงและความชื้นสัมพัทธ์ 70 ± 10% ผู้ใหญ่ถูกถือกรง ( 30 × 30 × 30 ซม. ) ที่มีการเข้าถึง 10% sucrose ( Wako ) โซลูชั่น 4 – 6 วัน เพศหญิง อายุเลือดกินกระต่ายให้กับอาหารและวางไข่ที่ปกคลุมด้วยกระดาษกรองที่ชุ่มชื้น ไข่วางอยู่บนกระดาษกรองที่ถูกโอนไปยังถาดพลาสติก ฟักเป็นหนอนเป็นอาหารในปลาป่น ( tetramin ® ) ดักแด้ที่รวบรวมในถ้วยเล็ก ๆและย้ายไปจับกรง