Materials and methodsEscherichia co

Materials and methods
Escherichia coli strains
Escherichia coli strains were isolated from the fresh fecal
samples of poultry (chicken, duck and turkey), wild birds
(Canada goose and gull) and humans. The human fecal
sample swabs were obtained from healthy volunteers. The
cloacal swabs and/or the swabs of fresh droppings of
chicken, duck, turkey, Canada goose and gull were collected
by collaborators from different locations of British Columbia
(BC) and were transported on ice to the Water and
Watershed Research Laboratory, University of Victoria,
Victoria, BC. Upon arrival at the laboratory, the swabs were
incubated in Luria–Bertani (LB) broth at 37 1C for 24 h. The
turbid broths were diluted in 10-fold serial increments and
filtered through 47mm white gridded 0.45 mm membrane
filters (Millipore Inc.). The filters were transferred to a
50mm Petri dish containing an absorbent pad soaked with
m-ColiBlue24TM medium (Millipore Inc.) and incubated at
37 1C for 24 h. Three blue color colonies (presumptive
E. coli) per fecal sample were isolated and transferred thrice
onto LB agar to generate the pure isolate. The pure isolates
were confirmed to be E. coli according to standard biochemical
tests (Holt et al., 1994) and also by PCR amplification of
the uspA gene of E. coli (Chen & Griffiths, 1998). The
environmental E. coli isolates used in this study were
obtained from the water samples of a natural pond in
Victoria, BC, where the primary sources of fecal pollution
are Canada geese and to some extent gulls. Forty water
samples were collected from this pond and were processed
by the membrane filtration method to obtain the pure
culture of E. coli as described above. The pure E. coli isolates
were resuspended in a 40% glycerol solution and stored at
80

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการสายพันธุ์ Escherichia coliEscherichia coli สายพันธุ์ที่แยกได้จากอุจจาระสดตัวอย่างสัตว์ปีก (ไก่ เป็ด และตุรกี), นกป่า(ห่านแคนาดาและนางนวล) และมนุษย์ มนุษย์อุจจาระตัวอย่างสวับได้รับจากอาสาสมัครสุขภาพ การโดยสวับหรือสวับมูลสดของไก่ เป็ด ไก่งวง ห่านแคนาดา และนางนวลถูกเก็บรวบรวมผู้มีส่วนร่วมจากตำแหน่งต่าง ๆ ของบริติชโคลัมเบีย(BC) และถูกขนส่งน้ำแข็งน้ำ และงานวิจัยลุ่มน้ำ มหาวิทยาลัยวิคตอเรียVictoria, BC เมื่อมาถึงห้องปฏิบัติการ สวับได้ได้รับการกกในซุป Luria – Bertani (ปอนด์) ที่ 1C 37 สำหรับ 24broths สีขุ่นถูกเจือจาง 10-fold ประจำเพิ่ม และกรองผ่านเยื่อขาวแทบ 0.45 มม. 47 มิลลิเมตรตัวกรอง (มิลลิพอร์ Inc.) ตัวกรองถูกย้ายไปจานเพาะเชื้อ 50 มม.ประกอบด้วยแผ่นดูดซับการแช่ด้วยm ColiBlue24TM กลาง (มิลลิพอร์ Inc.) และได้รับการกกที่37 1C สำหรับ 24 ชม สามสีฟ้าอาณานิคม (presumptiveE. coli) ต่อตัวอย่างอุจจาระแยก และโอนสามครั้งบน LB อาหารการสร้างบริสุทธิ์แยก แยกบริสุทธิ์ได้รับการยืนยันจะ ไลตามมาตรฐานทางชีวเคมีทดสอบ (โฮลท์ et al. 1994) และยังปลักของยีน uspA ของ E. coli (เฉินและ Griffiths, 1998) การสิ่งแวดล้อม E. coli ที่แยกได้ใช้ในการศึกษานี้ได้จากตัวอย่างน้ำในบ่อตามธรรมชาติVictoria, BC ซึ่งแหล่งมาหลักของมลภาวะอุจจาระมีห่านแคนาดา และนางนวลขอบเขตบาง น้ำสี่สิบตัวอย่างที่เก็บจากบ่อน้ำนี้ และถูกประมวลผลโดยวิธีการกรองเมมเบรนเพื่อขอรับบริสุทธิ์วัฒนธรรมของไลตามที่อธิบายไว้ข้างต้น แยกไลบริสุทธิ์resuspended ในการแก้ไขปัญหาของกลีเซอรอล 40% และเก็บไว้ที่80

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
Escherichia coli สายพันธุ์
Escherichia coli สายพันธุ์ที่แยกได้จากอุจจาระสด
ตัวอย่างของสัตว์ปีก (ไก่เป็ดและไก่งวง) นกป่า
(แคนาดาห่านและนกนางนวล) และมนุษย์ มนุษย์อุจจาระ
swabs ตัวอย่างที่ได้รับจากอาสาสมัครสุขภาพดี
swabs cloacal และ / หรือ swabs ของมูลสดของ
ไก่เป็ดไก่งวงห่านแคนาดาและนกนางนวลที่ถูกเก็บรวบรวม
โดยทำงานร่วมกันจากสถานที่แตกต่างกันของบริติชโคลัมเบีย
(BC) และถูกส่งบนน้ำแข็งกับน้ำและ
ต้นน้ำห้องปฏิบัติการวิจัยมหาวิทยาลัย วิกตอเรีย
Victoria, BC เมื่อมาถึงที่ห้องปฏิบัติการ swabs ถูก
บ่มใน Luria-Bertani (ปอนด์) น้ำซุปที่ 37 1C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง
ซุปมิโสะขุ่นถูกปรับลดในการเพิ่มขึ้นอนุกรม 10 เท่าและ
กรองผ่าน 47mm สีขาว gridded 0.45 มมเมมเบรน
ฟิลเตอร์ (อร์คอิงค์) ฟิลเตอร์ที่ถูกโอนไปยัง
จาน Petri 50mm มีแผ่นดูดซับแช่ด้วย
ขนาดกลาง M-ColiBlue24TM (มิลลิพอร์อิงค์) และบ่มที่
37 1C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง สามอาณานิคมสีสีฟ้า (สันนิษฐาน
E. coli) ต่อตัวอย่างอุจจาระถูกแยกและย้ายที่สาม
บน LB agar เพื่อสร้างแยกบริสุทธิ์ สายพันธุ์บริสุทธิ์
ได้รับการยืนยันที่จะเป็นเชื้อ E. coli ตามทางชีวเคมีมาตรฐาน
การทดสอบ (โฮลท์ et al., 1994) และโดยการขยาย PCR ของ
ยีน USPA ของเชื้อ E. coli (เฉิน & Griffiths, 1998)
เชื้อ E. coli สิ่งแวดล้อมแยกใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้
ที่ได้รับจากตัวอย่างน้ำของบ่อธรรมชาติใน
Victoria, BC, ที่แหล่งที่มาหลักของมลพิษทางอุจจาระ
เป็นห่านแคนาดาและนางนวลบางส่วน สี่สิบน้ำ
เก็บตัวอย่างจากบ่อนี้และถูกประมวลผล
โดยวิธีการกรองเมมเบรนที่จะได้รับบริสุทธิ์
วัฒนธรรมของเชื้อ E. coli ที่อธิบายข้างต้น อีโคไลบริสุทธิ์ที่แยกได้
ถูก resuspended ในสารละลายกลีเซอรีน 40% และเก็บไว้ที่
? 80

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการเชื้อ Escherichia coli สายพันธุ์เชื้อ Escherichia coli สายพันธุ์ที่แยกได้จากอุจจาระสดตัวอย่างของสัตว์ปีก ( ไก่ เป็ด และนกป่าตุรกี )( แคนาดา ) และนกนางนวล ) และมนุษย์ มนุษย์อุจจาระจากตัวอย่างที่ได้จากอาสาสมัครสุขภาพดี ที่cloacal swabs และ / หรือลำตัวของมูลสดของไก่ เป็ด ไก่งวง ห่าน แคนาดา และนกนางนวล ศึกษาโดยผู้ร่วมงานจากสถานที่ที่แตกต่างกันของบริติชโคลัมเบีย( BC ) และมีขนแข็งกับน้ำและปฏิบัติการวิจัยต้นน้ำ มหาวิทยาลัยวิคตอเรียVictoria , BC เมื่อมาถึงที่ห้องปฏิบัติการ จากคือโดยในลุเรีย–แบร์ตานิ ( LB ) น้ำซุปที่ 37 ใน 24 ชั่วโมงาขุ่นลด 10 พับเพิ่มขึ้นต่อเนื่องและการกรองผ่านเยื่อ gridded 0.45 มม. 47mm สีขาวตัวกรอง ( มิลลิ Inc . ) ตัวกรองที่ถูกย้ายไป50mm จานเพาะเชื้อที่มีแผ่นรองดูดซับแช่กับm-coliblue24tm ขนาดกลาง ( มิลลิ Inc . ) และอุณหภูมิ37 ใน 24 ชั่วโมง อาณานิคมสีฟ้าสาม ( ความเป็นไปได้E . coli ) ต่ออุจจาระจำนวนแยกและโอน 3 ครั้งบนอาหารวุ้นปอนด์เพื่อสร้างบริสุทธิ์แยก . เชื้อบริสุทธิ์ได้รับการยืนยันเป็นเชื้อ E . coli ตามมาตรฐานทางชีวเคมีทดสอบ ( Holt et al . , 1994 ) และเพิ่มปริมาณด้วยเทคนิคการ uspa ยีนของเชื้อ E . coli ( Chen & Griffiths , 1998 ) ที่สิ่งแวดล้อมเชื้ออีโคไลสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษา คือที่ได้จากตัวอย่างน้ำจากบ่อธรรมชาติในVictoria , BC ที่ปฐมภูมิแหล่งมลพิษตามลำดับมีห่านแคนาดาและบางนกนางนวลขอบเขต สี่น้ำโดยเก็บตัวอย่างจากบ่อ และประมวลผลโดยการกรองผ่านเยื่อวิธีที่จะได้รับบริสุทธิ์วัฒนธรรมของ E . coli ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น E . coli สายพันธุ์บริสุทธิ์เป็น resuspended ในสารละลายกลีเซอรอล 40% และเก็บรักษาที่80