Morphological changes in Phytophthora were observed after treatment with Trichoderma extract using FE-SEM. Specimens were prepared using the same culture method as in the disk diffusion test, with the following modification. A small piece of membrane filter (2 × 2 cm, Sigma) was placed between the Phytophthora inoculum and filter paper disc that contained the EtOAc extract ( Ahameethunisa and Hopper, 2010). The plate was then incubated at 18–30 °C until Phytophthora grew on the membrane filter. Osmium tetroxide (1%) was used to fix the mycelia on the membrane filter for 24 h at 4 °C. The fixed specimens were subsequently dehydrated in serially diluted ethanol (50%, 70%, 80%, 90%, 95% and twice at 100%) for 20 min each, after which they were placed in iso-amyl acetate for 30 min twice and dried in a critical point dryer with CO2. Next, the dried samples were coated with gold/palladium using an ion-sputterer in a high-vacuum chamber. Finally, samples were observed by FE-SEM/energy-dispersive spectroscopy (EDS) (S-4100, Hitachi Ltd., Tokyo, Japan).
การเปลี่ยนแปลงลักษณะทางสัณฐานวิทยาในโรคที่พบหลังการรักษาด้วยสารสกัดจากเชื้อราใช้ fe-sem . ชิ้นงานที่เตรียมโดยใช้วิธีวัฒนธรรมเดียวกันในดิสก์แบบทดสอบ ด้วยการปรับเปลี่ยนดังต่อไปนี้ ชิ้นเล็ก ๆของแผ่นกรอง ( 2 × 2 เซนติเมตร ซิกม่า ) คืออยู่ระหว่างการเกิดเชื้อและกรองแผ่นกระดาษที่บรรจุสารสกัดและ etoac ahameethunisa Hopper , 2010 ) จานแล้วบ่มที่ 18 – 30 ° C จนกระทั่งเกิดเติบโตบนไส้กรองเมมเบรน ออสเมียม tetroxide ( 1% ) คือใช้ในการแก้ไขปัญหาแต่ละเรื่องไส้กรองเมมเบรนสำหรับ 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 4 องศา คงทำการต่อมาขาดน้ำเจือจางเป็นเอทานอล ( 50% , 70% , 80% , 90% , 95% และสองครั้งที่ 100% ) 20 นาที แต่ละคนหลังจากที่พวกเขาถูกวาง ใน ISO เอมิลอะซีเตท 30 นาที สองครั้ง และแห้งในเครื่องอบแห้งวิกฤตกับ CO2 ต่อไป ตัวอย่างแห้งเคลือบด้วยทอง / แพลเลเดียมใช้ไอออน sputterer ในห้องสูญญากาศสูง ในที่สุด ตัวอย่างที่พบโดย fe-sem / พลังงานกระจายตัวสเปกโทรสโกปี ( EDS ) ( s-4100 , Hitachi Ltd . , โตเกียว , ญี่ปุ่น )
การแปล กรุณารอสักครู่..
