The acquired tandem mass spectra were searched against the human proteins database using Sequest search engine (Proteome Discoverer 1.1, Thermo Fischer). The setting allowed up to two missed cleavage sites and a mass tolerance of 10 ppm for precursor and 0.8 u for product ion scans. Each sample was analyzed using a set of variable modifications including propionamide on Cys, oxidation of Met, Cys, His, Trp and four Michael adducts: HNE (delta mass 156,115), HHE (delta mass 114,068), ONE (delta mass 154,099), and OHE (delta mass 112,052) on Cys, His and Lys. In this study only peptides with high and medium confidence, Xcorr valueZ1.5, ranked in position 1 in the database search were considered, if the corresponding protein was identified in three technical replicates within each experimental group. Functional protein interaction analysis was performed with Search Tool for the Retrieval of Interacting Genes (STRING), i.e. a database of known and predicted protein interactions [20]. Resulted networks were clustered based on the Markov cluster algorithm (MCL), disconnected nodes were removed and resulted clusters were manually annotated. It is important to note that STRING protein– protein interaction analysis, performed in the current study, relay on the knowledge databases which are summing up reported physical interactions (proteins binding) as well as neighborhood in
แรมสเป็คตรามวลตัวตามกันไปซื้อมาถูกค้นกับฐานข้อมูลของโปรตีนที่มนุษย์ใช้เครื่องมือค้นหา Sequest (Proteome Discoverer 1.1 เทอร์โมตื่น) การตั้งค่าได้ถึงสองพลาดไซต์ปริและยอมรับโดยรวมของ 10 ppm สำหรับสารตั้งต้นและ 0.8 u สำหรับผลิตภัณฑ์ไอออนสแกน แต่ละตัวอย่างได้วิเคราะห์โดยใช้ชุดของตัวแปรปรับเปลี่ยนรวมถึง propionamide ใน Cys ออกซิเดชันของเม็ท Cys เขา Trp และ Michael สี่ adducts: HNE (เดลต้ามวล 156,115) HHE (เดลต้ามวล 114,068), หนึ่ง (เดลต้ามวล 154,099), และ OHE (เดลต้ามวล 112,052) บน Cys เขาและ Lys ในการศึกษานี้ เปปไทด์เดียวกับขนาดกลางสูง และความมั่นใจ Xcorr valueZ1.5 ตำแหน่งที่ 1 ในการค้นหาฐานข้อมูลการจัดอันดับได้ว่า ระบุโปรตีนที่เกี่ยวข้องใน 3 เทคนิคเหมือนกับภายในแต่ละกลุ่มทดลอง วิเคราะห์โปรตีนทำงานโต้ตอบที่ดำเนินการ ด้วยเครื่องมือค้นหาสำหรับการเรียกของโต้ตอบยีน (สตริง), เช่นฐานข้อมูลของโปรตีนที่รู้จัก และคาดการณ์โต้ตอบ [20] ส่งผลให้เครือข่ายได้จับกลุ่มตามในแบบ Markov คลัสเตอร์อัลกอริทึม (MCL), เชื่อมต่อโหนถูกเอาออก และมีการใส่คำอธิบายประกอบผลคลัสเตอร์ด้วยตนเอง สิ่งสำคัญคือต้องทราบว่า สตริโปรตีน – โปรตีนโต้ตอบการวิเคราะห์ ดำเนินการในการศึกษาปัจจุบัน relay บนฐานข้อมูลความรู้ซึ่งรวมค่ารายงานโต้ตอบทางกายภาพ (โปรตีนผูก) ตลอดจนพื้นที่ใกล้เคียงใน
การแปล กรุณารอสักครู่..
