2.5. Analysis of cytokine gene expr

2.5. Analysis of cytokine gene expression in intestinal tissue Separate total RNA from the ileum tissue was extracted using TRIzol reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA) according to the manufacturer’s instructions. The target messenger RNAs of TNF-a, IL-1b, IL-6, and IL-10 were reverse-transcribed separately to complementary DNA and measured using real-time polymerase chain reaction as described in our previous studies [1,9,21]. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase was used as an internal standard to normalize the target messenger RNAs, and relative quantifications and calculations were performed by the 2DDCT method to analyze gene expression [22,23]. The primer sequences are shown in Table.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. การวิเคราะห์ยีน cytokine ในเนื้อเยื่อลำไส้แยก RNA รวมจากเนื้อเยื่อของ ileum ถูกแยกโดยใช้ TRIzol รีเอเจนต์ (Invitrogen คาร์ลบาด CA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต RNAs messenger เป้าหมายของ TNF-a, IL-1b, IL-6, IL-10 นั้นปรากฏกลับต่างหากเพื่อเสริมดีเอ็นเอ และถูกวัดค่าโดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสแบบเรียลไทม์ตามที่อธิบายไว้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ของเรา [1,9,21] พร่อง glyceraldehyde-3-ฟอสเฟตถูกใช้เป็นมาตรฐานภายในที่ปกติ RNAs messenger เป้าหมาย และ quantifications สัมพัทธ์และการคำนวณดำเนินการ โดยวิธี 2DDCT การวิเคราะห์ยีน [22,23] ลำดับรองพื้นที่จะแสดงในตาราง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนไซโตไคน์ในเนื้อเยื่อลำไส้ RNA รวมแยกออกจากเนื้อเยื่อ ileum ถูกสกัดโดยใช้ Trizol น้ำยา (Invitrogen, Carlsbad, CA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต RNAs messenger เป้าหมายของ TNF-A, IL-1B, IL-6 และ IL-10 ถูกย้อนกลับคัดลอกแยกดีเอ็นเอเสริมและวัดโดยใช้เวลาจริงวิธี Polymerase chain reaction ตามที่อธิบายไว้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ [1,9,21 ] glyceraldehyde-3-ฟอสเฟต dehydrogenase ถูกใช้เป็นมาตรฐานภายในปกติ RNAs messenger เป้าหมายและ quantifications ญาติและการคำนวณได้ดำเนินการโดยวิธีการ 2DDCT ในการวิเคราะห์การแสดงออกของยีน [22,23] ลำดับไพรเมอร์จะแสดงในตาราง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนไซโตไคน์ในลำไส้เยื่อแยกอาร์เอ็นเอรวมจากเนื้อเยื่อลำไส้สกัดโดยใช้ trizol Reagent ( Invitrogen Carlsbad , CA ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต เป้าหมายของ tnf-a il-1b RNAs Messenger , , IL-6 และเตอร์ถูกย้อนกลับและแยกประกอบดีเอ็นเอและการวัดโดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ครั้ง - จริงตามที่อธิบายไว้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ 1,9,21 [ ของเรา ] glyceraldehyde-3-phosphate เนสถูกใช้เป็นมาตรฐานภายในเพื่อให้เป้าหมาย Messenger RNAs และ quantifications ญาติและการคำนวณได้โดย 2ddct วิธีวิเคราะห์การแสดงออกของยีน 22,23 [ ] ไพรเมอร์ลำดับแสดงในตาราง