Agarose-MAMAs were performed in Bio

Agarose-MAMAs were performed in Biometra–T Personal thermal cycler (Biometra Inc.,
Göttingen, Germany) in 25 μl total volume, containing 1 μl target DNA diluted in 5 μl 5X
Green GoTaq Flexi Buffer (Promega Inc., Madison, WI), 2.5 μl MgCl2 (25mM), 0.5 μl dNTP
(10 mM, Qiagen Inc., Valencia, CA), primers (10 pmol/μl) according to Table 2 and 0.25 μl
GoTaq DNA polymerase (5 U/μl; Promega). Thermocycling parameters were 94°C for 5 min,
followed by 40 cycles at 94°C for 30 sec, 58°C for 30 sec and 72°C for 30 sec. The final elongation step was performed at 72°C for 5 min. Electrophoresis was performed in 3% agarose gel
(MetaPhor Agarose, Lonza Group Ltd., Basel, Switzerland) and a 20-bp DNA ladder (O'RangeRuler 20 bp, Thermo Fisher Scientific Inc.) was used as molecular weight marker.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดำเนินการใน Biometra – T ส่วนบุคคลความร้อน cycler (Biometra Inc. มาม๊า AgaroseGöttingen เยอรมนี) ปริมาณรวม 25 μl ที่ประกอบด้วย DNA เป้าหมาย μl 1 ที่เจือจางใน 5 μl 5 Xสีเขียว GoTaq Flexi บัฟเฟอร์ (Promega Inc. เมดิสัน WI), 2.5 μl MgCl2 (25mM), 0.5 μl dNTP(10 มม Qiagen Inc. วาเลนเซีย CA), ไพรเมอร์ (10 pmol μl) ตามตารางที่ 2 และ 0.25 μlGoTaq ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส (5 U μl Promega) เทอร์โม゚พารามิเตอร์ถูก 94° C 5 นาทีตาม ด้วย 40 รอบที่ 94° C นาน 30 วินาที 58° C นาน 30 วินาที และ 72° C เป็นเวลา 30 วินาที ดำเนินการขั้นตอนสุดท้ายยืด 72° c สำหรับ 5 นาที อิได้ดำเนินการใน 3% agarose เจล(อุปมา Agarose, Lonza กรุ๊ป จำกัด บาเซิล สวิตเซอร์แลนด์) และใช้บันไดดีเอ็นเอ 20-bp (bp O'RangeRuler 20 เทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์ Inc.) เป็นน้ำหนักโมเลกุลเครื่องหมาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Agarose-Mamas ได้ดำเนินการใน Biometra-T Cycler ความร้อนส่วนบุคคล (Biometra อิงค์
Göttingen, เยอรมนี) 25 ไมโครลิตรปริมาณรวมมี 1 ไมโครลิตรดีเอ็นเอเป้าหมายเจือจางใน 5 ไมโครลิตร 5X
สีเขียว GoTaq Flexi บัฟเฟอร์ (Promega อิงค์ Madison, WI) 2.5 ไมโครลิตร MgCl2 (25mm), 0.5 dNTP ไมโครลิตร
(10 มิลลิ, Qiagen อิงค์วาเลนเซีย, CA) ไพรเมอร์ (10 pmol / ไมโครลิตร) ตามตารางที่ 2 และ 0.25 ไมโครลิตร
GoTaq DNA Polymerase (5 U / ไมโครลิตร; Promega) พารามิเตอร์ Thermocycling เป็น 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที
ตามด้วย 40 รอบที่ 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, 58 ° C เป็นเวลา 30 วินาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที ขั้นตอนการยืดตัวสุดท้ายที่ได้ดำเนินการที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที อิเล็กได้รับการดำเนินการใน 3% agarose เจล
(อุปมา Agarose, Lonza กรุ๊ป จำกัด , บาเซิล, สวิส) และดีเอ็นเอ 20 bp บันได (O'RangeRuler 20 BP, Thermo Fisher Scientific Inc) ถูกนำมาใช้เป็นเครื่องหมายน้ำหนักโมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( แม่ได้ใน biometra – T ส่วนตัวความร้อนรอบ ( biometra อิงค์G ö ttingen , เยอรมัน ) ใน 25 μ L ปริมาณรวม ประกอบด้วย 1 μเป้าหมายลิตรดีเอ็นเอเจือจางใน 5 μผมเช่นบัฟเฟอร์ Flexi gotaq สีเขียว ( promega อิงค์ , Madison , WI ) 2.5 μ L ชุด ( 25mm ) , 0.5 μ dntp l( 10 มม. เพิ่มอิงค์ , วาเลนเซีย , แคลิฟอร์เนีย ) , ไพรเมอร์ ( 10 pmol / μ L ) ตามตารางที่ 2 และ 3 μ lgotaq DNA polymerase ( 5 U / μ l ; promega ) ผื่นแดงค่า 94 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีตามด้วย 40 รอบ 94 ° C เป็นเวลา 30 วินาทีที่ 58 องศา C เป็นเวลา 30 วินาทีและ 72 ° C เป็นเวลา 30 วินาที ขั้นตอนสุดท้ายคือการกระทำที่ 72 ° C เป็นเวลา 5 นาทีในการปฏิบัติหน้าที่ 3 % เจล( อุปมา Service , กลุ่ม , จำกัด , Basel , Switzerland ) และ 20 คู่เบสดีเอ็นเอบันได ( o"rangeruler 20 BP , เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์โดยใช้เครื่องหมายโมเลกุล .