2.6. Determination of total proanth

2.6. Determination of total proanthocyanidin content
Total proanthocyanidin content was determined with the
vanillin/hydrochloric acid method. Rice bran (100 mg) was
mixed with acetone/water/acetic acid (70:29.5:0.5, v/v/v)
solution (2 mL) and sonicated at 37
C for 30 minutes. After
centrifugation (10,000 g, 10 minutes, 20
C), the supernatant
was decanted. The solid was extracted again with the above
procedures. The supernatant was combined and evaporated
to dryness by a rotary evaporator at 40
C, and the residue
was redissolved with 2 mL of 30% methanol. The appropriate
diluted sample (10 mL) was mixed with 4% vanillin
methanol solution (0.6 mL) and concentrated HCl (0.3 mL),
and stood for 15 minutes at room temperature in the dark.
After mixing, the absorbance was measured at 500 nm. To
eliminate the interference from ACNs, the blank assay was
made with a mixture of 10 mL of diluted extract, 0.6 mL of
methanol, and 0.3 mL of concentrated HCl. Proanthocyanidins
concentration of the extract was determined against
external standard of cetachin. Total proanthocyanidin
content of rice bran was expressed as catechin equivalent
(mg CE/g DM).
2.7. Determination of total ACN content
Total ACN content of the extract was quantified with the pHdifferential
method. Rice bran (0.5 g) was mixed with 16 mL of
acidified methanol (1% HCl in methanol) and extracted at
room temperature with stirring overnight (circa 10 hours). The
mixture was centrifuged (10,000 g, 15 minutes, 4
C) and then
the supernatant was collected and diluted with acidified methanol to the volume of 20 mL. Two portions of the ACN
extract were respectively diluted with potassium chloride
buffer solution (0.025M, pH 1.0) and sodium acetate buffer
solution (0.4M, pH 4.5) to 2 mL in two microcentrifuge tubes.
The tubes were shaken by hand and thereafter equilibrated in
dark for 15 minutes. After centrifugation (8736 g, 5 minutes),
the absorbance between 260 nm and 750 nm was measured.
The total ACN content was calculated as the following equation
and expressed as cyanidin-3-glucoside equivalent (mg Cy
3-glc E/g DM).
Anthocyanin content (mg Cy-3-glc g1) ¼ (A  449.2  DF  V)/
26900  l  W (1)
Where A ¼ (A510 e A700) pH 1.0 e (A510 e A700) pH 4.5; 449.2 L/
cm/mol and 26900 L/cm/mol are the molecular weight and
extinction coefficient of Cy 3-glc, respectively; DF is the
abbreviation of dilution factor; V is the total volume (20 mL); l
is the path length (1 cm); W is the sample weight (g, DM).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6. ความมุ่งมั่นของ proanthocyanidin รวมเนื้อหากำหนดเนื้อหา proanthocyanidin รวมกับการวานิลลิน/ไฮโดรคลอริกกรดวิธี เป็นรำข้าว (100 มิลลิกรัม)ผสมกับกรดอะซิโตน/น้ำ/อะซิติก (70:29.5:0.5, v/v/v)โซลูชัน (2 mL) และ sonicated 37 c เป็นเวลา 30 นาที หลังจากหมุนเหวี่ยง (10,000 กรัม 10 นาที 20 C), supernatantถูกดีแคนติ้ง ของแข็งถูกสกัดอีกครั้ง ด้วยข้างต้นขั้นตอน รวมของ supernatant และระเหยให้แห้งโดยการระเหยแบบโรตารี่ที่ 40 C และสารตกค้างถูก redissolved กับ 2 mL ของเมทานอล 30% เหมาะสมตัวอย่างที่เจือจาง (10 mL) ถูกผสม ด้วยวานิลลิน 4%HCl เข้มข้น (0.3 มิลลิลิตร), และการแก้ไขปัญหาเมทานอล (0.6 มิลลิลิตร)และ 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องในมืดหลังผสม ค่าที่วัดได้ที่ 500 nm ถึงขจัดสัญญาณรบกวนจาก ACNs ทดสอบว่างเปล่าด้วยส่วนผสมของ 10 mL เจือจางสารสกัด 0.6 มล.เมทานอล และ 0.3 mL ความเข้มข้น HCl. Proanthocyanidinsกำหนดความเข้มข้นของสารสกัดจากมาตรฐานภายนอกของ cetachin รวม proanthocyanidinเนื้อหาของรำข้าวถูกแสดงเป็นคาเตคินที่เทียบเท่า(mg CE/g DM)2.7. กำหนดเนื้อหารวม ACNรวม ACN เนื้อหาของสารสกัดถูกวัด ด้วย pHdifferentialวิธีการ รำข้าว (0.5 กรัม) ถูกผสมกับ 16 มล.กรดเมทานอล (1% HCl ในเมทานอล) และแยกที่อุณหภูมิห้องกับกวนข้ามคืน (ประมาณ 10 ชั่วโมง) การส่วนผสมถูก centrifuged (10,000 กรัม 15 นาที 4 C) แล้วsupernatant รวบรวม และเจือจาง ด้วยกรดเมทานอลให้ปริมาณ 20 mL ส่วนที่สองของการ ACNลำดับถูกเจือจางสารสกัด ด้วยโพแทสเซียมคลอไรด์บัฟเฟอร์การแก้ปัญหา (0.025M, pH 1.0) และโซเดียมอะซิเตทอย่าง (0.4 m, pH 4.5) 2 มล.ในหลอดไมโครสองงานหลอดถูกเขย่าด้วยมือ และหลังจากนั้น equilibrated ในสีเข้ม 15 นาที หลังจากหมุนเหวี่ยง (8736 g, 5 นาที),ค่าระหว่าง 260 นาโนเมตรและ 750 นาโนเมตรโดยวัดเนื้อหา ACN รวมคำนวณตามสมการต่อไปนี้และแสดงเป็นเทียบเท่า cyanidin-3 glucoside (mg Cy3 glc E/g DM)เนื้อหาโฟเลทสูง (mg Cy-3-glc g 1) ¼ (A 449.2 DF V) /26900 l W (1)¼ (A510 e A700) pH 1.0 e (A510 e A700) ค่า pH 4.5 449.2 L /ซม./โมลและซ.ม.ลิตร 26900 โมลมี น้ำหนักโมเลกุล และค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียของ Cy 3-glc ตาม ลำดับ กล้อง DF เป็นการตัวย่อของปัจจัยเจือจาง V คือ ปริมาตรรวม (20 mL); lคือความยาวเส้นทาง (1 cm); W เป็นน้ำหนักของตัวอย่าง (g, DM)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 การหาปริมาณรวม proanthocyanidin
เนื้อหา proanthocyanidin ทั้งหมดถูกกำหนดด้วย
วานิลวิธีกรด / ไฮโดรคลอริก น้ำมันรำข้าว (100 มิลลิกรัม) คือการ
ผสมด้วยอะซิโตน / น้ำ / กรดอะซิติก (70: 29.5: 0.5, v / V / V)
? การแก้ปัญหา (2 มิลลิลิตร) และ sonicated ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที หลังจาก
การหมุนเหวี่ยง (10,000 กรัม, 10 นาที, 20? C), ใส
ถูก decanted ของแข็งถูกสกัดอีกครั้งกับข้างต้น
ขั้นตอน ใสถูกรวมกันและระเหย
แห้งด้วยเครื่องระเหยแบบหมุนที่ 40 องศาเซลเซียสและสารตกค้าง
ถูก redissolved มี 2 มลเมทานอล 30% ที่เหมาะสม
เจือจางตัวอย่าง (10 มิลลิลิตร) ผสมกับ 4% vanillin
แก้ปัญหาเมทานอล (0.6 มิลลิลิตร) และเข้มข้น HCl (0.3 มิลลิลิตร)
และยืนเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องในที่มืด.
หลังจากการผสมการดูดกลืนแสงที่ถูกวัดที่ 500 นาโนเมตร . เพื่อ
กำจัดสัญญาณรบกวนจาก ACNs ที่ทดสอบก็ว่างเปล่า
ที่ทำด้วยส่วนผสมของ 10 มิลลิลิตรของสารสกัดเจือจาง 0.6 มิลลิลิตร
เมทานอลและ 0.3 มิลลิลิตรเข้มข้น HCl proanthocyanidins
ความเข้มข้นของสารสกัดถูกกำหนดกับ
มาตรฐานภายนอกของ cetachin proanthocyanidin รวม
เนื้อหาของรำข้าวแสดงเป็นเทียบเท่า catechin
(MG CE / g DM).
2.7 การหาปริมาณรวม ACN
เนื้อหารวม ACN ของสารสกัดที่ถูกวัดด้วย pHdifferential
วิธี น้ำมันรำข้าว (0.5 กรัม) ผสมกับ 16 มล
เมทานอลกรด (1% HCl ในเมทานอล) และการสกัดที่
อุณหภูมิห้องกับกวนในชั่วข้ามคืน (ประมาณ 10 ชั่วโมง)
ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยง (10,000 กรัม, 15 นาที 4? C) และจากนั้น
ใสที่ถูกเก็บรวบรวมและเจือจางด้วยเมทานอลกรดปริมาณ 20 มิลลิลิตร สองส่วนของ ACN
สารสกัดถูกปรับลดตามลำดับด้วยโพแทสเซียมคลอไรด์
สารละลายบัฟเฟอร์ (0.025M ค่า pH 1.0) และบัฟเฟอร์โซเดียมอะซิเตท
วิธีการแก้ปัญหา (0.4M ค่า pH 4.5) 2 มิลลิลิตรในสองหลอดไมโคร.
หลอดถูกเขย่าด้วยมือและ equilibrated หลังจากนั้น ใน
ความมืดเป็นเวลา 15 นาที หลังจากการหมุนเหวี่ยง (8736 G, 5 นาที),
การดูดกลืนแสงระหว่าง 260 นาโนเมตรและ 750 นาโนเมตรวัด.
เนื้อหา ACN รวมที่คำนวณได้เป็นสมการต่อไป
และแสดงเป็นเทียบเท่า cyanidin-3-glucoside (MG ภาวะ
3 GLC E / G DM ).
เนื้อหา Anthocyanin (mG ภาวะ-3-GLC G? 1) ¼ (A? 449.2? DF? V) /
26900? L? W (1)
โดย: a ¼ (A510 A700 E) ค่า pH 1.0 E (E A510 A700) ค่า pH 4.5; 449.2 L /
ซม. / mol และ 26900 L / ซม. / mol มีน้ำหนักโมเลกุลและ
ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของภาวะ 3 GLC ตามลำดับ; DF เป็น
ตัวย่อของปัจจัยที่ทำให้เจือจาง; V คือปริมาตรรวม (20 มล); L
คือความยาวเส้นทาง (1 ซม.); W มีน้ำหนักตัวอย่าง (G, DM)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การวิเคราะห์ปริมาณโปรแ โธไซยานิดินรวมเนื้อหาทั้งหมดถูกกำหนดด้วยโปรแ โธไซยานิดินวานิล / คแบบกรด น้ำมันรำข้าว ( 100 มก. ) คือผสมกับน้ำ / อะซิโตน / กรดน้ำส้ม ( 70:29.5:0.5 , V / V / V )สารละลาย ( 2 มล. ) และ sonicated ที่ 37c เป็นเวลา 30 นาที หลังจากปั่น ( 10 , 000 G , 10 นาที , 20 ) , น่านคือริน . ของแข็งสกัดอีกครั้งกับข้างบนขั้นตอนที่ และน่านถูกรวมและหายไปแห้งโดยเครื่องโรตารี่ที่ 40C และสารตกค้างคือ redissolved 2 ml 30 % เมทานอล เหมาะสมตัวอย่างที่เจือจาง ( 10 ml ) ผสมกับ 4% วานิลลินเมทานอล โซลูชั่น ( 0.6 มิลลิลิตร ) และกรดไฮโดรคลอริกเข้มข้น ( 0.3 ml )และยืนสำหรับ 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ในที่มืดหลังจากผสมนวัด 500 นาโนเมตร เพื่อขจัดสัญญาณรบกวนจาก acns แบคทีเรียว่างคือด้วยส่วนผสมของ 10 ml สารสกัดเจือจาง , 0.6 มิลลิลิตรเมทานอลและ 0.3 มล. HCl เข้มข้น โพรแอนโธไซยานินความเข้มข้นของสารสกัด ตั้งใจกับมาตรฐานภายนอกของ cetachin . รวมโปรแ โธไซยานิดินเนื้อหาของน้ำมันรำข้าวจะแสดงเป็นคาเทชิน เทียบเท่า( มิลลิกรัม / กรัมและ CE )2.7 . การรวมเนื้อหาที่ต.รวมสารสกัดได้ปริมาณเนื้อหา ACN กับ phdifferentialวิธี น้ำมันรำข้าว ( 0.5 กรัม ) ผสมกับ 16 มิลลิลิตรปรับเมทานอล ( HCl 1 % เมทานอล ) และสารสกัดที่อุณหภูมิห้อง ( ประมาณ 10 ชั่วโมงกับกวนทั้งคืน ) ที่ส่วนผสมคือระดับ ( 10 , 000 G , 15 นาที , 4C ) แล้วและน่านเพื่อเจือจางด้วยเมทานอลและปรับปริมาณ 20 มิลลิลิตร สองส่วนของต.สกัดตามลำดับเจือจางด้วยโพแทสเซียมคลอไรด์สารละลายบัฟเฟอร์ ( 0.025m พีเอช 1.0 ) และโซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์โซลูชั่น ( 0.4m pH 4.5 ) 2 ml 2 หลอดไมโครเซนตริฟิวจ์ .หลอดถูกเขย่าด้วยมือ และหลังจากนั้น equilibrated ในมืดเป็นเวลา 15 นาที หลังการปั่นเหวี่ยง ( 8736 G , 5 นาที )มีการดูดกลืนแสงระหว่าง 260 nm 750 นาโนเมตรคือวัดรวมเนื้อหา ACN คิดเป็นสมการต่อไปนี้และแสดงเป็น cyanidin-3-glucoside เทียบเท่า ( มก. ไซ3-glc E / g DM )ปริมาณแอนโธไซยานิน ( มก. cy-3-glc G1 ) ¼ ( 449.2 df V )26900 l W ( 1 )ที่¼ ( a510 E M E ( มาก ) สำหรับ a510 E มาก ) pH 4.5 449.2 l / ;ซม. / โดย 26900 ลิตร / ซม. / mol มีน้ำหนักโมเลกุลและค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของไซ 3-glc ตามลำดับ ; DF คือคำย่อของปัจจัยเจือจาง ; V คือปริมาตร 20 มิลลิลิตร ) ; lเป็นเส้นทางยาว 1 ซม. ) ; W คือตัวอย่างน้ำหนัก ( กรัม , DM )