Lentivirus-mediated shRNA (small ha

Lentivirus-mediated shRNA (small hairpin RNA) knockdown of
gene expression
We knocked down the expression of the human ERLIN2 gene in
human breast cancer cell lines SUM225 and SUM44 or human
hepatoma cell line Huh-7 by using the Expression Arrest GIPZ
lentiviral shRNAmir system (OpenBiosystems). Lentivirus was
produced by transfecting HEK (human embryonic kidney)-293FT
cells with a combination of the lentiviral expression plasmid
DNA and the Trans-Lentiviral packaging mix (OpenBiosystems).
For cell infection, viral supernatants were supplemented with
6 μg/ml polybrene and incubated with the cells for 24 h. The cells
expressing shRNA were selected with puromycin for 2–3 weeks
for functional studies (cell proliferation assays) and for 4–10 days
after infection for RNA extraction.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ถอดสื่อ lentivirus shRNA (เล็กกิ๊บ RNA) ของแสดงออกของยีนเราล้มลงการแสดงออกของยีน ERLIN2 มนุษย์ในเต้านมของมนุษย์มะเร็งเซลล์เส้น SUM225 และ SUM44 หรือมนุษย์สายเซลล์ hepatoma Huh-7 โดย GIPZ จับกุมการนิพจน์lentiviral shRNAmir ระบบ (OpenBiosystems) มี lentivirusผลิต โดย HEK transfecting (คนไตตัวอ่อน) -293 ฟุตเซลล์ที่ มีการรวมกันของ plasmid นิพจน์ lentiviralดีเอ็นเอและบรรจุภัณฑ์ทรานส์ Lentiviral ผสม (OpenBiosystems)สำหรับเซลล์ที่ติดเชื้อ ไวรัส supernatants ได้เสริมด้วยPolybrene μ/มล. 6 และรับการกกกับเซลล์ใน 24 ชม เซลล์แสดง shRNA เลือกกับ puromycin 2 – 3 สัปดาห์สำหรับการศึกษาทำงาน (assays แพร่กระจายเซลล์) และ 4 – 10 วันหลังจากการติดเชื้อสำหรับสกัด RNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

lentivirus พึ่ง shRNA (กิ๊บ RNA เล็ก) ล้มลงของ
การแสดงออกของยีน
เราล้มลงแสดงออกของยีน ERLIN2 มนุษยชนใน
เต้านมของมนุษย์เซลล์มะเร็งเส้น SUM225 และ SUM44 หรือมนุษย์
เซลล์ตับเส้น Huh-7 โดยใช้การแสดงออกจับกุม GIPZ
ระบบ lentiviral shRNAmir ( OpenBiosystems) lentivirus ถูก
ผลิตโดย transfecting HEK (ไตของตัวอ่อนมนุษย์) -293FT
เซลล์ที่มีการรวมกันของการแสดงออกของพลาสมิด lentiviral
DNA และบรรจุภัณฑ์ผสม Trans-lentiviral (OpenBiosystems).
สำหรับการติดเชื้อของเซลล์ supernatants ไวรัสถูกเสริมด้วย
6 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร polybrene และบ่ม กับเซลล์เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์
แสดง shRNA ได้รับการคัดเลือกด้วย puromycin 2-3 สัปดาห์
สำหรับการศึกษาการทำงาน (วิเคราะห์เซลล์งอก) และสำหรับการ 4-10 วัน
หลังจากการติดเชื้อในการสกัดอาร์เอ็นเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เลนติไวรัส ( RNA ) shrna กิ๊บเล็ก ) น็อคดาวน์ของการแสดงออกของยีนเราล้มลง การแสดงออกของยีน erlin2 มนุษย์ในมะเร็งเต้านมและเซลล์ของมนุษย์ sum225 sum44 หรือมนุษย์เซลล์ตับ huh-7 โดยใช้สำนวนการจับกุม gipzระบบ shrnamir lentiviral ( openbiosystems ) เลนติไวรัสคือผลิตโดย transfecting hek ( ไตของตัวอ่อนมนุษย์ ) - 293ftเซลล์ที่มีการรวมกันของการแสดงออก lentiviral พลาสมิดดีเอ็นเอและทรานส์ lentiviral บรรจุภัณฑ์ผสม ( openbiosystems )การติดเชื้อไวรัสที่ถูกเสริมด้วย supernatants เซลล์6 μ g / ml polybrene บ่มกับเซลล์ เซลล์เป็นเวลา 24 ชั่วโมงแสดง shrna ได้รับเลือกด้วย puromycin 2 - 3 สัปดาห์การศึกษาการทำงาน ( เซลล์ proliferation ) ) และ 4 - 10 วันหลังจากการติดเชื้อสำหรับการสกัด RNA