Owing to its high sensitivity and t

Owing to its high sensitivity and throughput, the MBAS assay is a convenient approach to quantify residual SDS. However, this method is prone to interferences, most notably from anionic com- pounds which can ion pair with the cationic methylene blue dye. As an example, employing the FASP II protocol, the MBAS assay revealed an apparent level of SDS depletion between 45 and 60%. Such values are suspiciously poor, given that over 99% SDS must be depleted for samples to be compatible with LC–MS. The FASP II pro- tocol was repeated, omitting the addition of TFA (used to quench trypsin). From the test solutions, MBAS reported an average 99.6% of the SDS to be depleted. This value would appear more reasonable, though it may still be possible that other interfering compounds skew the analysis. Given the non-selective nature of a colorimetric assay, we sought to develop a more reliable assay to quantify trace levels of SDS from protein-containing solutions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เนื่องจากความไวแสงสูงและอัตราความเร็ว ทดสอบ MBAS เป็นวิธีการสะดวกในการกำหนดปริมาณสารเคมีตกค้าง อย่างไรก็ตาม วิธีนี้จะง่าย interferences โดยส่วนใหญ่จากไอออนซึ่งสามารถจับคู่กับสีน้ำเงินลี cationic ปอนด์ com anionic ตัวอย่างเช่น ใช้โพรโทคอล FASP II ทดสอบ MBAS เผยระดับชัดเจนของ SDS เชิงระหว่าง 45 และ 60% ค่าดังกล่าวมีพิรุธจน ระบุว่ากว่า 99% SDS ต้องหมดตัวอย่างเข้ากันได้กับ LC – MS FASP II โป-tocol ละเว้นการเพิ่มของ TFA (ใช้ดับทริปซิน) ซ้ำอีกครั้ง จากการแก้ปัญหาการทดสอบ MBAS รายงานการเฉลี่ย 99.6% ของ SDS ที่จะหมด ค่านี้จะปรากฏเหมาะสมมาก แม้ว่ามันอาจเป็นไปได้ว่า สารประกอบอื่น ๆ รบกวนเอียงการวิเคราะห์ ให้เลือกลักษณะของการทดสอบสี เราหาการพัฒนาทดสอบเชื่อถือได้เพื่อกำหนดระดับของ SDS ปริมาณจากโปรตีนที่ประกอบด้วยโซลูชั่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เนื่องจากความไวสูงและการส่งผ่านของการทดสอบ MBAs เป็นวิธีการที่สะดวกในการหาจำนวนที่เหลือ SDS แต่วิธีนี้มีแนวโน้มที่จะรบกวนโดดเด่นที่สุดจากปอนด์สั่งประจุลบไอออนที่สามารถจับคู่กับเมทิลีนประจุบวกย้อมสีฟ้า ตัวอย่างเช่นการจ้าง FASP สองโปรโตคอลการทดสอบ MBAs เปิดเผยในระดับที่เห็นได้ชัดของการสูญเสีย SDS ระหว่าง 45 และ 60% ค่าดังกล่าวเป็นที่น่าสงสารมีพิรุธที่ระบุว่ากว่า 99% SDS จะต้องหมดสำหรับตัวอย่างที่จะเข้ากันได้กับ LC-MS โปรโตคอล FASP ซ้ำครั้งที่สองถนัดนอกเหนือจาก TFA (ใช้เพื่อดับ trypsin) จากการแก้ปัญหาการทดสอบ MBAs รายงานค่าเฉลี่ย 99.6% ของ SDS ที่จะหมดลง ค่านี้จะปรากฏที่เหมาะสมมากขึ้น แต่ก็ยังอาจเป็นไปได้ว่าสารรบกวนอื่น ๆ ลาดวิเคราะห์ กำหนดลักษณะไม่ได้รับเลือกจากการทดสอบสีเราพยายามที่จะพัฒนาทดสอบความน่าเชื่อถืออยู่ในระดับที่จะหาจำนวนร่องรอยของ SDS จากการแก้ปัญหาที่มีโปรตีน