. Recovery of coating forming mater

. Recovery of coating forming material

The protein-lipid concentrate was prepared from frozen shrimp (Litopenaeus vannamei), kindly provided by Angulas Aguinaga Burgos (Burgos, Spain), as described in a previous work ( Arancibia et al., 2014). Briefly, shrimp waste (cephalothorax and exoskeleton) was suspended in water (1:1 ratio w/v) and subjected to autolysis by incubation at 40 °C for 4 h with constant stirring. After thermal inactivation at 80 °C for 20 min, the suspension with the autolyzed residues was kept at 2 °C overnight. An organic extraction was carried out using an acetone:ethanol mixture (1:1 v/v) at 40 °C for 2 h with constant stirring, with a waste suspension:solvent ratio of 1:3 (w/v). After 3 h decanting, three well-defined phases were formed. The intermediate phase, with an intense orange color, opaque and viscous appearance, was filtered through cheesecloth to separate the solid residue, consisting of chitinous material. The liquid phase was further subjected to organic extraction under the same conditions as described above. The resulting aqueous phase was centrifuged (10000×g – 30 min – 5 °C), the supernatant was discarded and the pellet was lyophilized (VirTis BenchTop Pro Freeze Dryer, mod. GKBTEL, Gardiner, U.S.A.) at −85 °C and constituted the protein-lipid concentrate, PCc.

Mild-processed chitosan was obtained from chitinous material, following a demineralization using lactic acid (75.6 g/L), ratio 1:3 (w/v) at 21 °C for 36 h. The residue was then collected and the protein was removed through an enzymatic hydrolysis with Viscozyme® L (Sigma–Aldrich Quimica, S.L. Spain) (pH 4.5, 50 °C) followed by hydrolysis with Alcalase® (Sigma–Aldrich Quimica, S.L. Spain) 2.4 L (pH 8.5, 50 °C), using the pH-stat (TIM 856, Radiometer Analytical, Villeurbanne Cedex). The enzyme inactivation was carried out at 90 °C for 10 min. Removal of acetyl groups from the chitin was achieved by using 10% NaOH solution, ratio 1:7 (w/v) at 100 °C for 72 h with constant stirring. The resulting chitosan was washed to neutrality with distilled water.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. การฟื้นตัวของเคลือบขึ้นรูปวัสดุข้นโปรตีนไขมันที่เตรียมจากกุ้งแช่แข็ง (Litopenaeus vannamei), กรุณาให้เบอร์กอส Aguinaga Angulas (เบอร์กอส สเปน), ในงานก่อนหน้า (Arancibia et al., 2014) สั้น ๆ กุ้งเสีย (cephalothorax และโครงกระดูกภายนอก) ถูกหยุดชั่วคราวในน้ำ (อัตราส่วน 1:1 w/v) และอยู่ภายใต้การ autolysis โดยบ่มที่ 40 ° C สำหรับ h 4 กับกวนคงที่ หลังจากร้อนยกเลิกการเรียกที่ 80 ° C สำหรับ 20 นาที ระงับ ด้วยตก autolyzed ถูกเก็บไว้ที่ 2 ° C ค้างคืน การสกัดอินทรีย์ถูกดำเนินการด้วยส่วนผสมอะซีโตน: เอทานอล (1:1 v/v) ที่ 40 ° C สำหรับ 2 h กวน ระงับเสีย: ตัวทำละลายอัตราส่วน 1:3 (w/v) มีค่าคง โดยระยะสามได้เกิดขึ้นหลังจาก 3 h decanting ระยะกลาง มีสีส้มเข้ม ลักษณะทึบแสง และข้น ถูกกรองผ่าน cheesecloth เพื่อแยกสารตกค้างแข็ง ประกอบด้วยวัสดุ chitinous เฟสของเหลวเพิ่มเติมถูกยัดเยียดให้สกัดอินทรีย์ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ระยะอควีผลลัพธ์ถูก centrifuged (10000 × g – 30 นาที-5 ° C), supernatant ถูกละทิ้ง และเม็ดเป็น lyophilized (VirTis BenchTop Pro หยุดเป่า mod GKBTEL สหรัฐอเมริกา Gardiner) ที่ −85 ° C และทะลักข้นโปรตีนไขมัน PCcประมวลผลไมลด์ไคโตซานได้รับจากวัสดุ chitinous ต่อ demineralization ที่ใช้กรดแลกติก (75.6 g/L), อัตราส่วน 1:3 (w/v) ที่ 21 ° C 36 h สารตกค้างถูกรวบรวมแล้ว และโปรตีนจะถูกเอาออกผ่านไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบด้วย Viscozyme ® L (ซิก-Aldrich Quimica สเปนเย็น) (pH 4.5, 50 ° C) ตาม ด้วยไฮโตรไลซ์กับ Alcalase ® (ซิก-Aldrich Quimica สเปนเย็น) 2.4 L (pH 8.5, 50 ° C), ใช้ pH-สถิติ (ทิม 856 วิเคราะห์ Radiometer, Villeurbanne Cedex) ยกเลิกการเรียกเอนไซม์ถูกดำเนินการที่ 90 ° C สำหรับ 10 นาทีเอา acetyl กลุ่มจากไคทินที่สำเร็จ โดยใช้โซลูชัน NaOH 10% อัตราส่วน 1:7 (w/v) ที่ 100 ° C สำหรับ h 72 กับกวนคงที่ ไคโตซานได้ถูกล้างเพื่อความเป็นกลางด้วยน้ำกลั่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

. การฟื้นตัวของการเคลือบขึ้นรูปวัสดุสมาธิโปรตีนไขมันที่เตรียมจากกุ้งแช่แข็ง (แวนนาไม) ให้ความกรุณาโดย Angulas Aguinaga กอส (กอสสเปน) ตามที่อธิบายไว้ในการทำงานก่อนหน้า (Arancibia et al., 2014) สั้น ๆ เสียกุ้ง (cephalothorax และรพ) ถูกระงับในน้ำ (อัตราส่วน 1: 1 w / v) และอยู่ภายใต้การย่อยตัวเองโดยการบ่มที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมงกับกวนอย่างต่อเนื่อง หลังจากที่พลังความร้อนที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาทีระงับตกค้าง autolyzed ที่ถูกเก็บไว้ที่ 2 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืน สกัดอินทรีย์ได้ดำเนินการโดยใช้อะซิโตน: ผสมเอทานอล (1: 1 v / v) ที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 ชั่วโมงกับกวนอย่างต่อเนื่องกับการระงับเสีย: ตัวทำละลายอัตราส่วน 1: 3 (w / v) หลังจาก 3 decanting ชั่วโมงสามขั้นตอนที่ดีที่กำหนดกำลังก่อตัวขึ้น ในช่วงกลางมีสีส้มที่รุนแรงลักษณะขาวขุ่นและหนืดถูกกรองผ่านผ้าที่จะแยกสารตกค้างที่เป็นของแข็งที่ประกอบด้วยวัสดุ chitinous ของเหลวถูกยัดเยียดเพิ่มเติมเพื่อสกัดอินทรีย์ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันที่อธิบายข้างต้น ในช่วงที่เกิดน้ำถูกหมุนเหวี่ยง (10,000 ×กรัม - 30 นาที - 5 ° C) ใสที่ถูกทิ้งและเม็ดที่ถูกแห้ง (. VirTis benchtop Pro ตรึงเครื่องเป่า, พอควร GKBTEL, การ์ดิเนอสหรัฐอเมริกา) ที่ -85 องศาเซลเซียสและประกอบด้วย สมาธิโปรตีนไขมัน PCC. อ่อนการประมวลผลของไคโตซานที่ได้รับจากวัสดุ chitinous ตาม demineralization ใช้กรดแลคติก (75.6 กรัม / ลิตร) อัตราส่วน 1: 3 (w / v) ที่ 21 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 36 ชั่วโมง ที่เหลือเก็บแล้วและโปรตีนจะถูกลบออกผ่านการย่อยของเอนไซม์ที่มีViscozyme® L (Sigma-Aldrich Quimica, SL สเปน) (pH 4.5, 50 ° C) ตามด้วยการย่อยสลายด้วยAlcalase® (Sigma-Aldrich Quimica, SL สเปน) 2.4 L (พีเอช 8.5, 50 ° C) โดยใช้สถิติค่า pH (TIM 856 Radiometer วิเคราะห์ Villeurbanne Cedex) ยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ที่ได้รับการดำเนินการที่ 90 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที การกำจัดกลุ่ม acetyl จากไคตินก็ประสบความสำเร็จโดยใช้วิธีการแก้ปัญหา NaOH 10% อัตราส่วน 1: 7 (w / v) ที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมงกับกวนอย่างต่อเนื่อง ไคโตซานที่เกิดขึ้นจะถูกล้างความเป็นกลางด้วยน้ำกลั่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. การกู้คืนของการขึ้นรูปวัสดุ

โปรตีนไขมันข้นที่เตรียมจากกุ้งแช่แข็งเคลือบง vannamei ) ที่กรุณาให้ angulas aguinaga บูร์โกส ( Burgos , สเปน ) , ตามที่อธิบายไว้ในผลงานที่ผ่านมา ( arancibia et al . , 2010 ) สั้น ๆ , เศษกุ้ง ( ซีฟาโลโทแรกซ์ และโครงสร้าง ) ที่แขวนลอยในน้ำ ( 11 อัตราส่วนน้ำหนัก / ปริมาตร ) และภายใต้การส่งผ่านโดยการบ่มที่ 40 ° C เป็นเวลา 4 ชั่วโมง คงตื่นเต้น หลังจากเมื่อความร้อนที่ 80 °องศาเซลเซียสนาน 20 นาที ช่วงล่างกับ autolyzed ตกค้างไว้ที่ 2 ° C ในชั่วข้ามคืน สกัดอินทรีย์คือการใช้อะซิโตนผสมเอทานอล ( 1 : 1 v / v ) ที่ 40 ° C 2 H ด้วยคงตื่นเต้นกับเสียช่วงล่างต่อตัวทำละลาย 1 : 3 ( w / v )หลังจาก 3 H รินสามเฟสซึ่งจะถูกสร้างขึ้น ระยะกลาง กับ สีส้มเข้ม ลักษณะขุ่นและเหนียว , ถูกกรองผ่านผ้าแยกกากของแข็งประกอบด้วย chitinous วัสดุ เฟสของเหลวยังถูกสกัดอินทรีย์ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้นซึ่งเป็นเฟสน้ำไฟฟ้า ( 10 ×จี– 30 นาที– 5 ° C ) , น่านถูกทิ้งและเม็ดมีโปรตีน ( เวอร์ติส แบบตั้งโต๊ะ โปรแช่แข็งแห้ง , mod gkbtel การ์ดิเนอร์ , สหรัฐอเมริกา , − 85 ° C ) และโปรตีนไขมันคือสมาธิ หรือ ไคโตซาน
.
แปรรูปอ่อน ได้จาก chitinous วัสดุดังต่อไปนี้ของการใช้กรดแลคติก ( 75.6 กรัม / ลิตร ) อัตราส่วน 1 :3 ( w / v ) ที่ 21 องศา C เป็นเวลา 36 ชั่วโมง ซึ่งกลุ่มตัวอย่าง และโปรตีนจะถูกลบออกผ่านการย่อยด้วยเอนไซม์ viscozyme ® L ( Sigma ) เริ่ม quimica ดิช , สเปน ) ( pH 4.5 , 50 ° C ) ตามด้วยการย่อยสลายด้วยประสบการณ์® ( Sigma ) เริ่ม quimica ดิช , สเปน ) สำหรับ L ( pH 8.5 , 50 ° C ) โดยใช้ pH stat ( ทิมแล้วฐานข้อมูล , วิเคราะห์ villeurbanne เซแด๊กซ์ )โดยการยับยั้งเอนไซม์การ 90 ° C 10 นาทีเอาอะกลุ่มจากไคตินคือได้โดยใช้สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ 10% อัตราส่วน 1 : 7 ( w / v ) ที่ 100 องศา C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง คงตื่นเต้น ผลของไคโตซาน ล้างเพื่อความเป็นกลางกับน้ำกลั่น