After a 24-h air drying, the samples were pretreated using
the procedure as follows: wiping the cut edges of stems and
roots with 75% ethanol; washing thoroughly to remove soil and
trashes; and dislodging any soil particles and epiphytes from
the samples using an ultrasonic cleaner for 5 min. After an air
drying in sterile condition, the samples were surface-sterilized
using a four-step procedure as follows: a 60-s wash in 99%
(V/V) ethanol, a 6-min wash in 3.125% (available chlorine)
NaClO, a 30-s wash in 99% (V/V) ethanol, and a final rinse in
sterile distilled water four times. To validate the effectiveness of
the surface-sterilization procedure, 0.5 mL of the last rinsing
water was spread on a blank control plate. The surfacesterilized
materials were aseptically sectioned into small pieces
(0.5 cm × 0.8 cm), distributed on tap water-yeast extract agar
(TWYE) [20] and T-improved agar, and then incubated at 28 ±
2 o
C for 14−28 days to record microbial growth. After
incubation, clones were picked for identification. Nalidixic
acid (25 μg·mL−1
) and cyclohexmide (50 μg·mL−1
) were added
in the medium to suppress the growth of non-actinomycetes
bacteria and fungi. T-improved agar used in the present study
was an improved formula based on TWYE agar by adding
several growth factors, including 0.5 mg lactoflavine, 0.5 mg
thiamine, 0.25 mg bioepiderm, 0.5 mg nicotinamide, 0.5 mg
calcium pantothenate, 0.5 mg cyclohexanhexol, 0.5 mg pridoxine,
and 0.5 mg para-aminobenzoic acid per 1 000 mL medium.
หลังอากาศ 24 ชม.ที่แห้ง กลุ่มตัวอย่างได้ pretreated ใช้ขั้นตอนเป็นดังนี้: เช็ดขอบตัดของลำต้น และราก ด้วยเอทานอล 75% ล้างให้สะอาดเพื่อเอาดิน และtrashes และ dislodging อนุภาคดินและเก่าจากใด ๆตัวอย่างที่ใช้การทำความสะอาดอัลตราโซนิก 5 นาที หลังจากปรับอากาศการอบแห้งในสภาพปลอดเชื้อ ตัวอย่างได้ผ่านการฆ่าเชื้อพื้นผิวใช้กระบวนการสี่ขั้นตอนเป็นดังนี้: การล้าง 60 s 99%เอทานอล (V/V) การล้าง 6 นาที 3,125% (มีคลอรีน)NaClO การล้าง 30 s ในเอทานอล 99% (V/V) และการล้างขั้นสุดท้ายในหมันกลั่นน้ำสี่ครั้ง การตรวจสอบประสิทธิภาพของกระบวนการฆ่าเชื้อพื้นผิว 0.5 mL ของการล้างครั้งสุดท้ายน้ำแพร่กระจายไปบนจานตัวควบคุมว่าง Surfacesterilized การวัสดุถูกแบ่งช่อง aseptically เป็นชิ้นเล็ก ๆ(0.5 ซม. × 0.8 ซม.), กระจายบนวุ้นสารสกัดจากยีสต์น้ำประปา(TWYE) [20] และ วุ้น T-ปรับปรุง และได้รับการกกแล้ว ใน 28 ±2 oC 14−28 วันเพื่อเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่บันทึก หลังจากกกไข่ โคลนถูกเลือกสำหรับการระบุ นาลิดิซิกกรด (25 μg·mL−1) และ cyclohexmide (50 μg·mL−1) ถูกเพิ่มในการระงับการเจริญเติบโตของ actinomycetes ไม่สื่อแบคทีเรียและเชื้อรา T-ปรับปรุงวุ้นที่ใช้ในการศึกษาเป็นสูตรที่ปรับปรุงตามวุ้น TWYE โดยการเพิ่มหลายเติบโตปัจจัย lactoflavine 0.5 mg, 0.5 มิลลิกรัมไทอามีน bioepiderm 0.25 mg, nicotinamide มิลลิกรัม 0.5, 0.5 มิลลิกรัมแคลเซียม pantothenate, cyclohexanhexol 0.5 mg, pridoxine 0.5 mgและกรด aminobenzoic –พารา 0.5 มก.ต่อมล. 1, 000a ปานกลาง
การแปล กรุณารอสักครู่..

หลังจากที่ตลอด 24 ชั่วโมงอากาศแห้งตัวอย่างที่ถูกปรับสภาพโดยใช้
ขั้นตอนดังต่อไปนี้: เช็ดขอบตัดของลำต้นและ
รากที่มีเอทานอล 75%; ล้างให้สะอาดเพื่อเอาดินและ
trashes; และหลุดอนุภาคของดินใด ๆ และ epiphytes จาก
กลุ่มตัวอย่างที่ใช้ทำความสะอาดอัลตราโซนิกเป็นเวลา 5 นาที หลังจากที่เครื่อง
อบแห้งในสภาพปลอดเชื้อตัวอย่างเป็นพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อ
โดยใช้ขั้นตอนที่สี่ขั้นตอนดังต่อไปนี้: 60-S ล้างใน 99%
(v / v) เอทานอลล้าง 6 นาทีใน 3.125% (ใช้ได้คลอรีน)
NaClO 30-s ล้างใน 99% (v / v) เอทานอลและล้างสุดท้ายใน
การฆ่าเชื้อน้ำกลั่นสี่ครั้ง ในการตรวจสอบประสิทธิภาพของ
ขั้นตอนการพื้นผิวฆ่าเชื้อ 0.5 มิลลิลิตรของการล้างที่ผ่านมา
น้ำกระจายบนแผ่นควบคุมว่างเปล่า surfacesterilized
วัสดุที่ถูกตัดปลอดเชื้อเป็นชิ้นเล็ก
(0.5 ซม. × 0.8 ซม.) กระจายในน้ำประปายีสต์สารสกัดจากวุ้น
(TWYE) [20] และ T-ปรับปรุงวุ้นแล้วบ่มที่อุณหภูมิ 28 ±
2 o
C เป็นเวลา 14-28 วันที่จะบันทึกการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ หลังจาก
บ่มโคลนถูกเลือกสำหรับประชาชน nalidixic
กรด (25 ไมโครกรัม· ML-1
) และ cyclohexmide (50 ไมโครกรัม· ML-1
) มีการเพิ่ม
ในระยะกลางถึงยับยั้งการเจริญเติบโตของการไม่ actinomycetes
เชื้อแบคทีเรียและเชื้อรา อาหารเลี้ยงเชื้อ T-ปรับปรุงใช้ในการศึกษาปัจจุบัน
เป็นสูตรปรับปรุงแก้ไขตามข้อ TWYE วุ้นโดยการเพิ่ม
ปัจจัยการเจริญเติบโตหลายแห่งรวมถึง lactoflavine 0.5 มก., 0.5 มก.
วิตามินบี, 0.25 มิลลิกรัม bioepiderm, 0.5 mg Nicotinamide, 0.5 มิลลิกรัม
แคลเซียมแพนโทธี, 0.5 มิลลิกรัม cyclohexanhexol, 0.5 ไพริดอกซีนมิลลิกรัม
และ 0.5 มก. กรด Para-aminobenzoic ต่อ 1 000 มลกลาง
การแปล กรุณารอสักครู่..

หลังจาก 24-h อากาศแห้ง จำนวนที่ได้รับใช้ขั้นตอนดังนี้ เช็ดขอบตัดของลำต้นและรากด้วยเอทานอล 75% ; ล้างสะอาดเพื่อเอาดินขยะ และอนุภาคดินและอาศัยใด ๆหลุดจากตัวอย่างการใช้ ultrasonic cleaner สำหรับ 5 นาทีหลังแอร์การอบแห้งในสภาพปลอดเชื้อ จำนวนฆ่าเชื้อที่ผิวการใช้กระบวนการ 4 ขั้นตอนดังนี้ : 60-s ซัก 99%( v / v ) เอทานอล , 6-min ซัก 3.125 % ( คลอรีนมีอยู่ )naclo , 30-s ซัก 99 % ( v / v ) เอทานอล และสุดท้ายล้างในฆ่าเชื้อน้ำ 4 ครั้ง การตรวจสอบประสิทธิผลของผิวฆ่าเชื้อในขั้นตอนสุดท้าย ล้าง 0.5 มิลลิลิตรน้ำกระจายบนจานควบคุมที่ว่างเปล่า การ surfacesterilizedวัสดุที่ aseptically ตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ( 0.5 cm × 0.8 เซนติเมตร ) กระจายในน้ำยีสต์สกัดวุ้น( twye ) [ 20 ] และ t-improved วุ้น แล้วบ่มที่อุณหภูมิ 28 ±2 oเป็นเวลา 14 − 28 วันบันทึกการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ หลังจากบ่ม , โคลนถูกเลือกเพื่อระบุตัวตน นาลิดิซิกกรด ( 25 μ G ด้วย− 1 มิลลิลิตร) และ cyclohexmide ( 50 μ G ด้วย− 1 มิลลิลิตร) ได้เพิ่มในการปราบปรามการเจริญเติบโตขององค์กรด้วยกันแบคทีเรียและเชื้อรา t-improved วุ้นที่ใช้ในการศึกษาคือการปรับปรุงสูตรตาม twye วุ้นโดยการเพิ่มปัจจัยการเติบโตมากมาย รวมทั้ง lactoflavine 0.5 มก. , 0.5 มิลลิกรัมวิตามินบี , 0.25 มก. นิโคตินาไมด์ bioepiderm 0.5 มิลลิกรัม , 0.5 มิลลิกรัมการทำให้สว่าง , 0.5 มิลลิกรัม pridoxine cyclohexanhexol 0.5 มิลลิกรัมและ 0.5 มิลลิกรัมต่อ 1 , 000 มล. กรดพารา aminobenzoic )
การแปล กรุณารอสักครู่..
