Measurement of Anthocyanins, Phenol

Measurement of Anthocyanins, Phenolics, Ascorbate, and Antioxidant Capacity. Total anthocyanin content of the appropriately diluted extracts was determined by the spec- trophotometric method of Wrolstad (1976), and data were calculated using the extinction coefficient for malvidin 3-glu- coside (28 000). Total phenolic content was measured by the Folin-Ciocalteu method at 700 nm, using gallic acid as a standard (Singleton and Rossi, 1965).
Ascorbate homogenates were centrifuged at 12 000 rpm at 4 °C for 5 min. Ascorbate was analyzed by paired-ion RP- HPLC, with electrochemical detection (Martin and Frei, 1997). An aliquot of the acidic supernatant was chromatographed on an LC8 column (150 mm × 4.6 mm i.d., 3 μm particle size; Supelco, Bellefonte, PA) using deionized water containing 1% methanol in 40 mM sodium acetate and 1.5 mM dodecyltri- ammonium phosphate as the mobile phase (Q12 ion pair cocktails; Regis, Morton Grove, IL). Ascorbate was detected at an applied potential of +0.6 V by an LC 4B amperometric electrochemical detector (Bioanalytical Sytems, West Lafay- ette, IN).
Antioxidant capacity was measured as oxygen radical absorbing capacity (ORAC) according to the method of Cao et al. (1995) using a COBAS-FARA II centrifugal analyzer (Roche Diagnostic, Nutley, NJ). The ORAC assay (400 μL) contained 16.7 nM R-phycoerythrin (R-PE; Sigma, St. Louis MO), 4 mM AAPH, and 20 μL of sample. After initiation of the assay with AAPH, a peroxyl radical generator) fluorescence of R-PE was read on duplicate samples, blanks, and standards of Trolox, a water-soluble vitamin E analogue. Readings were taken at 2 min intervals over a 70 min period. The area under the curve was calculated and expressed as micromole equiva- lents of Trolox per gram of fresh weight.
Statistical Analysis. The analysis of variance procedure of Genstat 5 (Genstat 5 Committee, 1993) was used to analyze results. Unless otherwise indicated, only differences of P < 0.05 are discussed. Bivariate regression analysis was used to correlate anthocyanin, phenolic, ascorbate, and ORAC results.
RESULTS
Phenolics, Anthocyanins, Ascorbate, and Anti- oxidant Capacity. Strawberry, raspberry, highbush blueberry, and lowbush blueberry were different (P e 0.001) from each other in their contents of phenolics, anthocyanins, and ascorbate and their antioxidant capacity (Table 1). The total phenolic content of high- bush and lowbush blueberries was about 4-fold higher than in strawberries and raspberries. The anthocyanin content of the four species varied more than 25-fold

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัด Anthocyanins, Phenolics, Ascorbate และกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระ เนื้อหามีโฟเลทสูงรวมสารสกัดจากแตกออกอย่างเหมาะสมถูกกำหนด โดยวิธีการ trophotometric ข้อมูลจำเพาะของ Wrolstad (1976), และข้อมูลถูกคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ใน malvidin 3-glu-coside (28 000) เนื้อหารวมฟีนอถูกวัด โดยวิธี Folin Ciocalteu ที่ 700 nm ใช้กรด gallic เป็นมาตรฐาน (เดี่ยวและ Rossi, 1965)Ascorbate homogenates มี centrifuged ที่ 12 000 รอบต่อนาทีที่ 4 ° C สำหรับ 5 นาที Ascorbate ถูกวิเคราะห์ โดยไอออนคู่ RP - HPLC กับตรวจไฟฟ้า (มาร์ตินและ Frei, 1997) เป็นส่วนลงตัวของ supernatant เปรี้ยวถูก chromatographed เป็นคอลัมน์ LC8 (ประชาชน 150 มม. × 4.6 มม. 3 μm ขนาดอนุภาค Supelco, Bellefonte, PA) โดยใช้น้ำ deionized ประกอบด้วยเมทานอล 1% acetate โซเดียม 40 มม.และ 1.5 มม. dodecyltri แอมโมเนียฟอสเฟตเป็นเฟสเคลื่อนที่ (Q12 ไอออนคู่ค็อกเทล รีจิส มอร์ตันโกรฟ IL) Ascorbate พบที่ศักยภาพการใช้ของ +0.6 V โดยมี LC 4B amperometric ไฟฟ้าจับ (Bioanalytical Sytems, Lafay ette, IN ตะวันตก)ถูกวัดกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระเป็นออกซิเจนรุนแรงดูดซับกำลัง (ORAC) ตามวิธีของ Cao et al. (1995) ใช้กับ COBAS FARA II แรงเหวี่ยงวิเคราะห์ (วิเคราะห์โรช Nutley, NJ) ORAC assay (400 μL) อยู่ 16.7 nM R-phycoerythrin (R -PE ซิก St. Louis MO), 4 mM AAPH และ μL 20 ของตัวอย่าง หลังจากเริ่มต้นของการทดสอบกับ AAPH เครื่องกำเนิดไฟฟ้ารุนแรง peroxyl) fluorescence ของ R -PE ถูกอ่านซ้ำตัวอย่าง ช่อง และมาตรฐานของ Trolox อนาล็อกวิตามินที่ละลายในการ อ่านที่ถ่ายในช่วงเวลา 2 นาทีระยะเวลานาทีที่ 70 พื้นที่ภายใต้โค้งถูกคำนวณ และแสดงเป็น micromole equiva-lents ของ Trolox ต่อกรัมของน้ำหนักสดการวิเคราะห์ทางสถิติ วิเคราะห์ผลต่างของขั้นตอนที่ 5 Genstat (Genstat 5 กรรมการ 1993) ถูกใช้ในการวิเคราะห์ผล เว้นแต่จะระบุเป็นอย่างอื่น เฉพาะส่วนต่างของ P < 0.05 จะกล่าวถึง วิเคราะห์การถดถอย bivariate ถูกใช้เพื่อเชื่อมโยงมีโฟเลทสูง ฟีนอ ascorbate และ ORAC ผลผลลัพธ์Phenolics, Anthocyanins, Ascorbate และกำลังต่อต้านอนุมูลอิสระ สตรอเบอร์รี่ ราสเบอร์รี่ บลูเบอร์รี่ highbush และ lowbush บลูเบอรี่แตกต่างกัน (P e 0.001) จากแต่ละอื่น ๆ ในเนื้อหา phenolics, anthocyanins และ ascorbate และกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระ (ตาราง 1) ฟีนอเนื้อหารวมของบลูเบอร์รี่สูงบุชและ lowbush มีประมาณ 4-fold สูงกว่าสตรอเบอร์รี่และราสเบอร์รี่ เนื้อหามีโฟเลทสูงพันธุ์สี่แตกต่างกันมากกว่า 25-fold

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัด Anthocyanins, Phenolics, วิตามินซีและสารต้านอนุมูลอิสระจุ เนื้อหา anthocyanin รวมของสารสกัดเจือจางเหมาะสมถูกกำหนดโดยวิธีการ trophotometric ระบุดของ Wrolstad (1976) และข้อมูลนี้จะถูกคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียสำหรับ malvidin 3 glu- coside (28 000) เนื้อหาฟีนอลทั้งหมดถูกวัดโดยวิธี Folin-Ciocalteu ที่ 700 นาโนเมตรโดยใช้กรดแกลลิเป็นมาตรฐาน (ซิงเกิลและรอสซี 1965).
แอสคอร์ homogenates ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 12 000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที แอสคอร์ได้รับการวิเคราะห์โดยการจับคู่ไอออน RP-HPLC โดยมีการตรวจสอบไฟฟ้าเคมี (มาร์ตินและ Frei, 1997) aliquot ของสารละลายที่เป็นกรดถูก chromatographed ที่คอลัมน์ LC8 (150 มิลลิเมตร× 4.6 มม id ขนาดอนุภาค 3 ไมครอน; Supelco, เบลลาฟอน, PA) การใช้น้ำกลั่นปราศจากไอออนที่มีเมทานอล 1% โซเดียมอะซิเตท 40 มิลลิเมตรและ 1.5 มิลลิแอมโมเนียมฟอสเฟต dodecyltri- เป็นเฟสเคลื่อนที่ (Q12 เครื่องดื่มค็อกเทลคู่ไอออน; Regis, มอร์ตันโกรฟ, IL) ascorbate ถูกตรวจพบที่มีศักยภาพใช้ของ 0.6 V โดยเครื่องตรวจจับ LC 4B วัดดังไฟฟ้าเคมี (Bioanalytical Sytems ตะวันตก Lafay- ette, IN).
กำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระได้รับการวัดความสามารถดูดซับออกซิเจนรุนแรง (ORAC) ตามวิธีการของเฉาและคณะ . (1995) โดยใช้ COBAS FARA-II วิเคราะห์แรงเหวี่ยง (Roche วินิจฉัย Nutley, NJ) การทดสอบค่า ORAC (400 ไมโครลิตร) ที่มีอยู่ 16.7 nM R-phycoerythrin (R-PE; Sigma, เซนต์หลุยส์ MO) 4 มม AAPH และ 20 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่าง หลังจากที่เริ่มต้นของการทดสอบด้วย AAPH, เครื่องกำเนิดไฟฟ้ารุนแรง peroxyl) การเรืองแสงของ R-PE ได้อ่านตัวอย่างที่ซ้ำกัน, ช่องว่างและมาตรฐานของ Trolox, วิตามินที่ละลายน้ำ E อนาล็อก การอ่านที่ถูกนำที่ 2 ช่วงเวลานาทีเป็นระยะเวลากว่า 70 นาที พื้นที่ใต้เส้นโค้งที่คำนวณและแสดงเป็นไมโครโมเทียบเท่า Lents ของ Trolox ต่อกรัมของน้ำหนักสด.
การวิเคราะห์ทางสถิติ การวิเคราะห์ของขั้นตอนการแปรปรวนของ Genstat 5 (Genstat 5 คณะกรรมการ 1993) ถูกใช้ในการวิเคราะห์ผล นอกจากที่ระบุความแตกต่างเพียงอย่างเดียวของ p <0.05 จะกล่าวถึง การวิเคราะห์การถดถอย bivariate ถูกใช้ในการมีความสัมพันธ์ anthocyanin, ฟีนอล ascorbate และผล ORAC.
ผล
Phenolics, Anthocyanins, วิตามินซีและสารต้านอนุมูลอิสระป้องกันความจุ สตรอเบอร์รี่, ราสเบอร์รี่, บลูเบอร์รี่ HIGHBUSH และบลูเบอร์รี่ lowbush ที่แตกต่างกัน (P อี 0.001) จากกันในเนื้อหาของพวกเขาของฟีนอล, anthocyanins และ ascorbate และความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระของพวกเขา (ตารางที่ 1) เนื้อหาฟีนอลทั้งหมดมาจากพุ่มไม้สูงและบลูเบอร์รี่ lowbush เป็นประมาณ 4 เท่าสูงกว่าในสตรอเบอร์รี่และราสเบอร์รี่ เนื้อหา anthocyanin ในสี่สายพันธุ์ที่แตกต่างกันมากกว่า 25 เท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวัดผลของ anthocyanins ascorbate และความจุของสารต้านอนุมูลอิสระ ปริมาณแอนโธไซยานินของอย่างเหมาะสมเจือจางสารสกัดถูกกำหนดโดยสเป็ค - วิธี trophotometric ของ wrolstad ( 1976 ) และทำการคำนวณโดยใช้สัมประสิทธิ์การ malvidin 3-glu - coside ( 28 , 000 ) ปริมาณฟีนอลทั้งหมดวัดจาก folin ciocalteu วิธีที่ 700 นาโนเมตรการใช้เพิ่มขึ้นเป็นมาตรฐานโรงพยาบาล รอสซี่ , 1965 ) .
จาก homogenates เป็นระดับที่ 12 000 รอบต่อนาทีที่ 4 ° C เป็นเวลา 5 นาทีโดยใช้คู่ไอออน ascorbate RP - HPLC ที่มีการตรวจจับทางเคมีไฟฟ้า ( มาร์ติน ฟราย , 1997 ) เป็นส่วนลงตัวของนำกรดคือ chromatographed บน lc8 คอลัมน์ ( 150 มิลลิเมตร× 4.6 มม. บัตร 3 μ M ขนาดอนุภาค supelco bellefonte ; , ,PA ) ใช้คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำที่มี 1% โซเดียมอะซิเตต และเมทานอลใน 40 มม. 1.5 มม. dodecyltri - แอมโมเนียมฟอสเฟตเป็นเฟสเคลื่อนที่ ( Q12 คู่ไอออนค็อกเทล ; รีจิส , มอร์ตันโกรฟ , อิลลินอยส์ ) จากที่ตรวจพบในการประยุกต์ศักยภาพ 0.6 V โดย LC 4B สำคัญไฟฟ้าเคมีตรวจจับ ( bioanalytical ของตะวันตก lafay - ette
, )วัดออกซิเจนอนุมูลอิสระเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่มีความจุ ( ORAC ) ตามวิธีการของโจโฉ et al . ( 1995 ) การใช้ cobas-fara II แรงเหวี่ยงวิเคราะห์ ( โรชวินิจฉัย Nutley นิวเจอร์ซีย์ ) โดยวิธี ORAC ( 400 μ L ) ที่มีอยู่ 16.7 nm r-phycoerythrin ( r-pe ; Sigma , เซนต์ หลุยส์โม ) , aaph 4 มม. และ 20 μ L ของกลุ่มตัวอย่าง หลังจากที่เริ่มต้นของ aaph ตรวจสอบด้วย ,เป็น peroxyl หัวรุนแรง Generator ) เรืองแสงของ r-pe กำลังอ่านตัวอย่างที่ซ้ำกันหรือไม่ และมาตรฐานเป็นสารละลายวิตามินอีอะนาล็อก อ่านถูกถ่ายเมื่อ 2 นาทีช่วงเวลากว่า 70 นาทีระยะเวลา พื้นที่ใต้เส้นโค้งถูกคำนวณและแสดงเป็นไมโครโมล equiva - สาร lents ของ 1 กรัมน้ำหนักสด .
การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์ความแปรปรวนของขั้นตอน genstat 5 ( คณะกรรมการ genstat 5 1993 ) เพื่อวิเคราะห์ผล นอกจากที่ระบุ ความแตกต่างเพียง 0.05 ได้ถูก การวิเคราะห์การถดถอยโดยใช้ใช้ปริมาณแอนโธไซยานินฟีนอลจาก , และค่า ORAC .

ผลผลจาก anthocyanins และความสามารถต้านอนุมูลอิสระ highbush บลูเบอร์รี่ , สตรอเบอร์รี่ , ราสเบอร์รี่ ,lowbush บลูเบอร์รี่และแตกต่าง ( P e 0.001 ) จากแต่ละอื่น ๆในเนื้อหาของผลและแอนโทไซยานิน และสารต้านอนุมูลอิสระจากตน ( ตารางที่ 1 ) เนื้อหาทั้งหมดของบุชและฟีนอลสูง lowbush บลูเบอร์รี่ประมาณ 4 เท่าสูงกว่าในสตรอเบอรี่และราสเบอรี่ มีแอนโธไซยานินปริมาณ 4 ชนิดแตกต่างกันมากกว่า 25 พับ