2.4. Analysis of flavonoidsTen gram

2.4. Analysis of flavonoids
Ten grams of blended juice sample were mixed with 10 mL of
dimethyl formamide in a 50 mL centrifuge tube and homogenized
for 30 s using a polytron homogenizer (Brinkmann Instruments
Inc., Westbury, NY, USA). The homogenized juice was placed on ashaker for 3 h and later filtered to collect the extract. The procedure
was repeated two more times and all the extracts were pooled
together. The extract was filtered using a 0.45 mm membrane filter
and 10 mL clear filtrate was injected into the HPLC for analysis. The
HPLC system consisted of a Waters 1525 HPLC series (Milford, MA)
connected to a PDA detector. Flavonoids were separated on an
Xbridge C-18 column (3.54 mm, 4.6 mm  150 mm i.d.) from
Waters (Milford, MA) and detected at l280 nm. The solvent system
of acetonitrile/water plus 4% acetic acid, in a gradient starting at
15% and ending at 50% acetonitrile, was used. Flavonoids were
identified by comparing their ultraviolet spectra and retention
times with those of standards. Quantification of flavonoids was
done by using known concentrations of external standards from
the commercial source and all samples were run in triplicate
(Uckoo et al., 2012).
To further validate the identification of flavonoids, each
homogenized lemon juice sample (10 mL) was extracted with
acetonitrile in three successive steps consisting of 10 mL each. All
the solvent extracts were pooled, filtered through a 0.45 mm
membrane filter and analyzed by ultra-high performance liquid
chromatography–time of flight-mass spectrometry (UHPLC–
QTOF-MS) (maxis Impact, Bruker Daltonics, Billerica, MA, USA).
Flavonoids were separated on a Kinetex C18 column (1.7 mm,
100  2.1 mm; Phenomenex, Torrance, CA, USA) using an Agilent
1290 UHPLC instrument (Agilent, Waldbronn, Germany). The
separation was carried out at 50 8C with a flow rate of 0.2 mL/min
using gradient elution of acetonitrile in 0.1% formic acid (solvent A)
and acetonitrile (solvent B). Mass spectral analyses were performed
using an electron spray ionization-quantitative-time of
flight (ESI-Q-TOF) mass spectrometer equipped with an electrospray
ionization source in negative ion mode. Capillary voltage was
maintained at 3 kV, source temperature was set at 200 8C and
nitrogen was used as the desolvation gas (12 L/min).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การวิเคราะห์ของ flavonoids10 กรัมของตัวอย่างน้ำที่ผสมได้ผสมกับ 10 mL ของformamide dimethyl ใน 50 mL หลอดเครื่องหมุนเหวี่ยง และ homogenized เป็นกลุ่มสำหรับ 30 ใช้ homogenizer ฝากระจกโค้ง (Brinkmann เครื่องมืออิงค์ Westbury, NY สหรัฐอเมริกา) น้ำ homogenized เป็นกลุ่มถูกวางบน ashaker สำหรับ 3 h และหลังกรองเพื่อแยกการเก็บรวบรวม ขั้นตอนการทำซ้ำสองครั้งและสารสกัดทั้งหมดถูกทางถูกพูร่วมกัน สารสกัดที่ถูกกรองโดยใช้ตัวกรองเมมเบรน 0.45 มม.และ 10 mL ล้างสารกรองถูกฉีดเข้าไปใน HPLC สำหรับการวิเคราะห์ ที่ระบบ HPLC ประกอบด้วยชุดน้ำกลึง HPLC (ลฟอร์ด MA)เชื่อมต่อกับเครื่องตรวจจับแบบ PDA Flavonoids แยกจากกันในการXbridge C 18 คอลัมน์ (3.54 mm ประชาชน 4.6 มม. 150 มม.)วอเตอร์ส (ลฟอร์ด MA) และพบที่ l280 nm ระบบตัวทำละลายของ acetonitrile/น้ำ บวก 4% กรดอะซิติก ในราคาเริ่มต้นการไล่ระดับสีที่ใช้ 15% และสิ้นสุดที่ 50% acetonitrile มี flavonoidsระบุเปรียบเทียบแรมสเป็คตรารังสีอัลตราไวโอเลตและการเก็บรักษาของพวกเขาเท่ากับมาตรฐาน ไม่นับของ flavonoidsโดยใช้ความเข้มข้นรู้จักมาตรฐานภายนอกจากแหล่งธุรกิจและตัวอย่างทั้งหมดถูกเรียกใช้ใน triplicate(Uckoo et al., 2012)เพื่อตรวจสอบรหัสของ flavonoids เพิ่มเติม แต่ละตัวอย่างน้ำมะนาว homogenized เป็นกลุ่ม (10 mL) ถูกสกัดด้วยacetonitrile ในสามขั้นตอนต่อเนื่องประกอบด้วย 10 mL ทั้งหมดสารสกัดจากตัวทำละลายถูกทางถูกพู กรองผ่านมม. 0.45membrane filter and analyzed by ultra-high performance liquidchromatography–time of flight-mass spectrometry (UHPLC–QTOF-MS) (maxis Impact, Bruker Daltonics, Billerica, MA, USA).Flavonoids were separated on a Kinetex C18 column (1.7 mm,100  2.1 mm; Phenomenex, Torrance, CA, USA) using an Agilent1290 UHPLC instrument (Agilent, Waldbronn, Germany). Theseparation was carried out at 50 8C with a flow rate of 0.2 mL/minusing gradient elution of acetonitrile in 0.1% formic acid (solvent A)and acetonitrile (solvent B). Mass spectral analyses were performedusing an electron spray ionization-quantitative-time offlight (ESI-Q-TOF) mass spectrometer equipped with an electrosprayionization source in negative ion mode. Capillary voltage wasmaintained at 3 kV, source temperature was set at 200 8C andnitrogen was used as the desolvation gas (12 L/min).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การวิเคราะห์ของ flavonoids
สิบกรัมของตัวอย่างน้ำผลไม้ผสมผสม 10 มิลลิลิตร
dimethyl formamide ในหลอด centrifuge 50
มิลลิลิตรและปั่นสำหรับ30 วินาทีใช้ Polytron โฮโมจีไน (Brinkmann
เครื่องมืออิงค์Westbury, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) น้ำผลไม้ปั่นถูกวางลงบน ashaker เวลา 3 ชั่วโมงและกรองต่อมาในการเก็บรวบรวมสารสกัด ขั้นตอนซ้ำอีกสองครั้งและสารสกัดจากทั้งหมดที่ถูกรวบรวมเข้าด้วยกัน สารสกัดถูกกรองโดยใช้ตัวกรองเมมเบรน 0.45 มิลลิเมตรและ10 มิลลิลิตรกรองที่ชัดเจนถูกฉีดเข้าไปใน HPLC เพื่อการวิเคราะห์ ระบบ HPLC ประกอบด้วยน้ำ 1,525 ชุด HPLC (ฟอร์ดบริดจ์) เชื่อมต่อกับเครื่องตรวจจับพีดีเอ flavonoids ถูกแยกบนXbridge C-18 คอลัมน์ (3.54 มมมม 4.6? id ที่ 150 มิลลิเมตร) จากน้ำ(ฟอร์ด, แมสซาชูเซต) และตรวจพบ L280 นาโนเมตร ระบบตัวทำละลายของ acetonitrile น้ำ / บวก 4% กรดอะซิติกในการไล่ระดับสีเริ่มต้นที่ 15% และสิ้นสุดที่ 50% acetonitrile ถูกนำมาใช้ flavonoids ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบสเปกตรัมรังสีอัลตราไวโอเลตของพวกเขาและการเก็บรักษาครั้งกับบรรดามาตรฐาน ปริมาณของ flavonoids ได้กระทำโดยใช้ความเข้มข้นที่รู้จักกันของมาตรฐานภายนอกจากแหล่งการค้าและตัวอย่างทุกคนทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่า(Uckoo et al., 2012). เพื่อเป็นการตรวจสอบบัตรประจำตัวของ flavonoids แต่ละตัวอย่างน้ำมะนาวปั่น(10 มิลลิลิตร) เป็น สกัดด้วยacetonitrile ในสามขั้นตอนต่อเนื่องประกอบด้วย 10 มิลลิลิตรแต่ละ ทั้งหมดสารสกัดด้วยตัวทำละลายที่ได้รวบรวมกรองผ่าน 0.45 มมกรองเมมเบรนและวิเคราะห์โดยของเหลวสมรรถนะสูงพิเศษโคเวลาของเที่ยวบินspectrometry มวล (UHPLC- QTOF-MS) (ผลกระทบ Maxis, Bruker Daltonics, บิลเลริกา, MA, USA) . Flavonoids ถูกแยกออกในคอลัมน์ Kinetex C18 (1.7 มม100 2.1 มม? Phenomenex, Torrance, CA, USA) ใช้ Agilent 1290 เครื่องมือ UHPLC (Agilent, Waldbronn, เยอรมนี) แยกได้ดำเนินการที่ 50 8C ที่มีอัตราการไหล 0.2 มิลลิลิตร / นาทีใช้ชะลาดacetonitrile ใน 0.1% กรด (ตัวทำละลาย A) และ acetonitrile (ตัวทำละลาย B) วิเคราะห์สเปกตรัมมวลได้ดำเนินการโดยใช้สเปรย์อิเล็กตรอนไอออนไนซ์เชิงปริมาณเวลาของเที่ยวบิน(ESI-Q-TOF) สเปกโตรมิเตอร์มวลพร้อมกับ electrospray แหล่งไอออนไนซ์ในโหมดไอออนลบ แรงดันไฟฟ้าฝอยได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ 3 กิโลโวลต์อุณหภูมิแหล่งที่มาตั้งอยู่ที่ 200 8C และไนโตรเจนที่ใช้เป็นก๊าซdesolvation นี้ (12 ลิตร / นาที)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การวิเคราะห์สารฟลาโวนอยด์
10 กรัม ผสมน้ำจำนวน 10 มิลลิลิตรผสมกับ Dimethyl Formamide
ใน 50 มล. centrifuge หลอด และโฮโม
30 s โดยใช้ polytron โฮโมจิไนซ์ ( brinkmann เครื่องมือ
อิงค์ , Westbury , NY , USA ) การบด น้ำผลไม้วางอยู่บน ashaker 3 H และต่อมากรองเก็บสารสกัด . ขั้นตอน
ทำซ้ำอีก 2 ครั้ง และสารสกัดจากทั้งหมดถูกรวม
ด้วยกัน สารสกัดถูกกรองโดยใช้เยื่อกรอง 0.45 มม. และ 10 ml ล้างกรอง
ถูกฉีดเข้าไปใน HPLC ในการวิเคราะห์
ระบบ HPLC ประกอบด้วยน้ำเดือน 2 ชุด ( Milford , MA )
เชื่อมต่อกับ PDA เครื่องตรวจจับ ฟลาโวนอยด์ถูกแยกจากกันบน
- xbridge คอลัมน์ ( 3.54 มม. 4.6 มม.  150 มม. บัตร ) จาก
น้ำ ( Milford ,มา ) และตรวจพบ l280 nm . าระบบ
ของไน / น้ำ พลัส 4 % กรดในการเริ่มต้นที่
15 % และสิ้นสุดที่ 50% ไนใช้ ฟลาโวนอยด์ยังระบุการเปรียบเทียบสเปกตรัมรังสีอัลตราไวโอเลต
กัก
ครั้ง และผู้ที่มีมาตรฐาน ปริมาณของฟลาโวนอยด์ถูก
ทำโดยใช้มาตรฐานที่ทราบค่าความเข้มข้น
ภายนอกจากแหล่งการค้าและตัวอย่างทั้งหมดจะถูกเรียกใช้ทั้งสามใบ
( uckoo et al . , 2012 ) .
เพิ่มเติม ตรวจสอบรหัสของ flavonoids , แต่ละ
บดตัวอย่างมะนาว ( 10 ml ) สาร
ไน 3 ขั้นตอนต่อเนื่องประกอบด้วย 10 ml แต่ละ สารทำละลายหมด
พู กรองผ่านเยื่อกรองและ 0.45 mm

ประสิทธิภาพสูงพิเศษ โดยใช้ของเหลวโครมาโตกราฟี–เวลาของเที่ยวบิน ( มวลสาร uhplc –
qtof-ms ) ( Maxis ผลกระทบ บรูกเกอร์ ดอลโทนิก บิลเลริกา , , MA , USA ) .
flavonoids แยกกันใน kinetex คอลัมน์ C18 1.7 มม.
100  2.1 มม. ; phenomenex Torrance , CA , USA ) ใช้เลนต์
- uhplc เครื่องดนตรี Agilent , waldbronn , เยอรมัน )
แยกได้ดําเนินการ 50 8C ด้วยอัตราการไหล 2 มล. / นาที
การไล่ระดับสีใช้ไนใน 0.1% กรด ( ตัวทำละลาย ) และ ไน ( ตัวทำละลาย
b ) มวลสเปกตรัมการวิเคราะห์การใช้สเปรย์ปริมาณอิเล็กตรอนอิสระ

เวลาของเที่ยวบิน ( esi-q-tof ) แมสสเปกโตรมิเตอร์พร้อมกับวิธีพ่นละอองไฟฟ้า
อิออนแหล่งในโหมดไอออนลบ แรงดันไฟฟ้าเป็นฝอย
รักษาที่ 3 กิโล แหล่งอุณหภูมิไว้ที่ 200 8C และ
ไนโตรเจนเป็นก๊าซที่ใช้เป็นศูนยากาศ ( 12 ลิตร / นาที )