The use of pediocins as food additi

The use of pediocins as food additives or drugs requires a simple and rapid method by which large quantities of homogeneous pediocin are produced at industrial level. Two centrifugation steps required during initial stages of purification i.e. separation of cells from fermentation broth and collection of precipitates after ammonium sulphate precipitation are the major bottlenecks for their large scale purification. In the present work, pediocin production by a new a dairy strain, Pediococcus pentosaceous NCDC 273 (identical to pediocin PA-1 at nucleotide sequence level), was found to be optimum at initial pH of 6.0 and 7.0 of basal MRS supplemented with 20 g/l of glucose or lactose at 20 and 24 h, respectively. Immobilization of cells through entrapment in alginate-xanthan gum gel beads with chitosan coating resulted in negligible cell release during fermentation. Thus, the cell free extract was directly collected through decantation, avoiding the need of centrifugation step at this stage. Subsequent ammonium sulphate precipitation at isoelectric point of pediocin PA-1 (8.85), using magnetic stirrer at high speed (approx. 1200 rpm), resulted in forceful deposition of precipitates on the wall of precipitation beaker allowing their collection using a spatula, avoiding centrifugation step at this stage also. Further purification using cation-exchange chromatography resulted in yield of 134.4% with more than 320 fold purification with the specific activity of 19 × 105 AU/mg. The collection of single peak of pediocin at 41.9 min in RP-HPLC, overlapping with standard pediocin PA-1, resulted in yield of 1.15 μg from 20 μl of sample applied. The overlapping of RP-HPLC peak and SDS-PAGE band corresponding to 4.6 kDa, confirmed the purity and identity of pediocin 273 as pediocin PA-1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้ pediocins เป็นวัตถุเจือปนอาหารหรือยาที่ต้องการวิธีง่าย ๆ และรวดเร็วซึ่งจำนวนมากเหมือน pediocin ที่ผลิตในระดับอุตสาหกรรม ขั้นตอนการ centrifugation 2 ที่จำเป็นในขั้นเริ่มต้นของการทำให้บริสุทธิ์เช่นแยกเซลล์จากซุปหมักและคอลเลกชันของ precipitates หลังจากแอมโมเนียมซัลเฟตฝน คอขวดสำคัญสำหรับฟอกขนาดใหญ่ของพวกเขา ในงานนำเสนอ pediocin ผลิต โดยใหม่ต้องใช้นม Pediococcus pentosaceous NCDC 273 (เหมือนกับ pediocin PA-1 ระดับลำดับนิวคลีโอไทด์), พบจะสูงสุดที่ pH 6.0 และ 7.0 ของ MRS โรคเริ่มต้นเสริม ด้วย 20 g/l ของกลูโคสแล็กโทสที่ 20 และ 24 h ตามลำดับ การตรึงโปเซลล์ผ่าน entrapment ในแอลจิเนต xanthan กาวเจลเม็ดเคลือบไคโตซานมีผลในระยะเซลล์รุ่นในระหว่างการหมัก ดังนั้น สารสกัดฟรีเซลล์ตรงรวบรวมผ่าน decantation หลีกเลี่ยงจำเป็นต้อง centrifugation ขั้นตอนในขั้นตอนนี้ ต่อแอมโมเนียมซัลเฟตฝน pediocin PA-1 (8.85), จุด isoelectric ใช้ช้อนคนแม่เหล็กความเร็วสูง (ประมาณ 1200 รอบต่อนาที), ส่งผลให้สะสมพลังของ precipitates บนผนังบีกเกอร์ฝนให้คอลเลกชันของพวกเขาเป็นพาย หลีกเลี่ยง centrifugation ขั้นตอนในขั้นตอนนี้ยังใช้ การฟอกโดยใช้ cation exchange chromatography ผลผลตอบแทน% 134.4 กับฟอกพับมากกว่า 320 กับกิจกรรมเฉพาะของ 19 × AU 105 มิลลิกรัม ชุดของ pediocin ที่ 41.9 นาที RP-HPLC ทับซ้อนกับมาตรฐาน pediocin PA-1 ส่งผลให้ผลตอบแทน 1.15 μg จาก μl 20 ของตัวอย่างที่ใช้ในขณะเดียว การทับซ้อนของ RP HPLC คและวงหน้า SDS ที่สอดคล้องกับ 4.6 kDa ยืนยันความบริสุทธิ์และลักษณะเฉพาะของ pediocin 273 เป็น pediocin PA-1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ใช้ pediocins เป็นวัตถุเจือปนอาหารหรือยาเสพติดต้องใช้วิธีการที่ง่ายและรวดเร็วโดยที่ปริมาณมากของ pediocin เนื้อเดียวกันมีการผลิตในระดับอุตสาหกรรม สองขั้นตอนการหมุนเหวี่ยงที่จำเป็นในระหว่างขั้นตอนเริ่มต้นของการทำให้บริสุทธิ์เช่นการแยกของเซลล์จากน้ำหมักและการสะสมของตะกอนหลังจากฝนแอมโมเนียมซัลเฟตเป็นคอขวดที่สำคัญสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ขนาดใหญ่ของพวกเขา ในการทำงานปัจจุบัน pediocin ผลิตใหม่สายพันธุ์นม Pediococcus pentosaceous NCDC 273 (เหมือนกับ pediocin PA-1 ในระดับลำดับนิวคลีโอ) ถูกพบว่ามีความเหมาะสมที่พีเอชเริ่มต้นของ 6.0 และ 7.0 ของ MRS ฐานเสริมด้วย 20 กรัม / ลิตรของน้ำตาลกลูโคสหรือแลคโตสที่ 20 และ 24 ชั่วโมงตามลำดับ การตรึงเซลล์ผ่านกับดักในเหงือกอัลจิเนต-xanthan เม็ดเจลเคลือบด้วยไคโตซานที่มีผลในการปล่อยเซลล์เล็กน้อยระหว่างการหมัก ดังนั้นสารสกัดจากเซลล์ฟรีถูกเก็บรวบรวมโดยตรงผ่าน decantation หลีกเลี่ยงความต้องการของขั้นตอนการหมุนเหวี่ยงในขั้นตอนนี้ ฝนแอมโมเนียมซัลเฟตต่อมาที่จุด Isoelectric ของ pediocin PA-1 (8.85) โดยใช้เครื่องกวนแม่เหล็กความเร็วสูง (ประมาณ. 1,200 รอบต่อนาที) ผลในการสะสมพลังของตกตะกอนอยู่บนผนังของบีกเกอร์ตกตะกอนช่วยให้คอลเลกชันของตนโดยใช้ไม้พาย, หลีกเลี่ยงการหมุนเหวี่ยง ขั้นตอนในขั้นตอนนี้ยัง การทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติมโดยใช้โครมาแลกเปลี่ยนไอออนส่งผลให้อัตราผลตอบแทนที่ 134.4% ที่มีมากกว่า 320 เท่าทำให้บริสุทธิ์ด้วยกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ 19 × 105 เหรียญออสเตรเลีย / มิลลิกรัม คอลเลกชันของยอดเดียวของ pediocin ที่ 41.9 นาทีใน RP-HPLC ซ้อนกับมาตรฐาน pediocin PA-1 ส่งผลให้อัตราผลตอบแทนที่ 1.15 ไมโครกรัมจาก 20 ไมโครลิตรของตัวอย่างประยุกต์ ที่ทับซ้อนกันของยอด RP-HPLC และวง SDS-PAGE สอดคล้องกับ 4.6 กิโลดาลตันได้รับการยืนยันความบริสุทธิ์และตัวตนของ pediocin 273 เป็น pediocin PA-1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การใช้ pediocins เป็นวัตถุเจือปนอาหารหรือยาต้องใช้ง่ายและวิธีที่รวดเร็วซึ่งปริมาณขนาดใหญ่ของเอกพีดีโอซินจะผลิตในระดับอุตสาหกรรม สองขั้นตอนที่จำเป็นในระหว่างขั้นตอนแรกของการปั่นเหวี่ยงบำบัดน้ำเสีย เช่นการแยกเซลล์จากน้ำหมัก และคอลเลกชันของตะกอนหลังจากแอมโมเนียมซัลเฟตตกตะกอนเป็นคอขวดที่สำคัญสำหรับผลิตขนาดใหญ่ ในงานปัจจุบัน การผลิต เพดดิโอซิน โดยโคนมสายพันธุ์ใหม่ 3 pentosaceous ncdc 273 ( เหมือนกันกับพีดีโอซิน pa-1 ในระดับลำดับนิวคลีโอไทด์ ) พบว่ามี pH เริ่มต้นที่ 6 และ 70 แรกเริ่มนางเติมกลูโคส 20 กรัมต่อลิตรหรือแล็กโตส 20 และ 24 ชั่วโมง ตามลำดับ การตรึงเซลล์ผ่านกับดักในอัลเจลเม็ดเคลือบด้วยไคโตแซนแทนกัม ( ปล่อยเซลล์กระจอก ระหว่างการหมัก ดังนั้น , ฟรีเซลล์โดยตรงผ่านแยกเก็บ decantation หลีกเลี่ยงความต้องการของขั้นตอนที่ 3 ขั้นตอนนี้ต่อมาแอมโมเนียมซัลเฟตตกตะกอนที่จุดไอโซอิเล็กทริกของพีดีโอซิน pa-1 ( 8.85 ) โดยใช้ stirrer แม่เหล็กที่ความเร็วสูง ( ประมาณ 1 , 200 รอบต่อนาที ) พบในการสะสมพลังของตะกอนบนผนังของบีกเกอร์ตกตะกอนช่วยให้คอลเลกชันของพวกเขา ใช้ไม้พายคนหลีกเลี่ยงขั้นตอนที่ 3 ขั้นตอนนี้ยังการใช้เทคนิคในการแลกเปลี่ยนประจุบวก ส่งผลต่อผลผลิตของ 134.4 % มากกว่า 320 พับทำให้กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ 19 × 105 AU / mg คอลเลกชันของยอดเดียวของพีดีโอซินที่ 41.9 นาทีๆ ซ้อนกับ pa-1 เพดดิโอซินมาตรฐาน มีผลทำให้ผลผลิตของ 1.15 μ G จาก 20 μ L ของกลุ่มตัวอย่างที่ใช้ซ้อนกันและสอดคล้องกับการศึกษาสูงสุดๆ วง 4.6 กิโลดาลตัน ยืนยันความบริสุทธิ์ และเอกลักษณ์ของพีดีโอซินในฐานะเพดดิโอซิน pa-1 .