Determination of thiamine and ribof

Determination of thiamine and riboflavin content
Thiamine and riboflavin were extracted by a single extraction
procedure according to Vidal-Valverde and others (1997). Briefly,
1 g of ground sample was extracted by acid hydrolysis with 30 mL
of 0.3 M HCl in an autoclave for 15 min at 121 ◦C. The pH
of the solution was then adjusted to the range of 5 to 5.4 with
2 M sodium acetate. After cooling, extracts were incubated with
5 mL of a 15% aqueous Taka-Diastase (Fluka) for 3 h at 45 ◦C. Afterward,
samples were filtered through Whatman nr 40 filter paper,
filled to 100 mL, and filtered through a 0.2 μmpore size nylon filter
membrane. Thiamin content was analyzed by high-performance
liquid chromatography (HPLC) provided by a postcolumn derivatization
system according to Prodanov and others (1997). The chromatographic
system was equipped with bothM510 andM45Model
pumps (Waters Associates, Milford, Conn., U.S.A.), a Rheodyne
M-7125 injector (Cocati, Calif., U.S.A.), a μBondapak C18 column
(300 × 3.9 mm i.d.), a Porasil B Bondapak C18 guard column (20 × 3.9 mm i.d.), and a Waters 470 scanning fluorescence detector
set up at λexc = 360 nm and λem = 435 nm. The detector signal
was recorded on a Maxima 820 chromatography workstation
(Waters Associates). The mobile phase methanol/water/acetic
acid (31/68.5/0.5), containing 5 mM sodium hexasulfonate, was
pumped at a flow rate 1.5 mL/min. The column temperature was
35 ◦C and the injection volume was 50 μL. Riboflavin content
was analyzed by HPLC according to Prodanov and others (1997).
For riboflavin analysis, a precolumn (3.2 mm i.d. × 4.0 cm) packed
with C18 Porasil B (Waters Associates), a ODS Spherisorb column
(3.9 mm i.d. × 30 cm), and a 470 scanning fluorescence detector
were used at λexc = 445 nm and λem = 520 nm. The mobile phase
was methanol/water/acetic acid (31/68.5/0.5), containing 5 mM
sodium hexasulfonate with flow rate at 1.2 mL/min. The column
temperature was 25 ◦C and the injection volume was 20 μL. The
level of thiamine and riboflavin was quantified using the respective
standards curves.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดเนื้อหาของไทอามีนและวิตามินไทอามีนและวิตามินได้ถูกแยก โดยแยกเดียวขั้นตอนตามความ Vidal และอื่น ๆ (1997) สั้น ๆ1 กรัมของตัวอย่างดินถูกสกัด ด้วยกรดไฮโตรไลซ์กับ 30 mLของ 0.3 M HCl ในตัวด้วยสำหรับ 15 นาทีที่ 121 ◦C PHโซลูชันที่ปรับช่วงของ 5 การ 5.4 ด้วยAcetate โซเดียม 2 เมตร หลังจากทำความเย็น สารสกัดได้ incubated ด้วย5 mL ของ 15% อควีทากา-Diastase (Fluka) สำหรับ h 3 ที่ 45 ◦C หลังจากนั้นตัวอย่างถูกกรองผ่าน Whatman nr 40 กระดาษกรองเติมไป 100 mL และกรองผ่านตัวกรองไนล่อนขนาด 0.2 μmporeเมมเบรน เนื้อหา thiamin ถูกวิเคราะห์ โดยมีประสิทธิภาพสูงเหลว chromatography (HPLC) โดย postcolumn derivatizationระบบตาม Prodanov และคนอื่น ๆ (1997) ที่ chromatographicระบบเพียบพร้อมไป ด้วย bothM510 andM45Modelปั๊ม (น้ำเชื่อมโยง ลฟอร์ด Conn. สหรัฐอเมริกา), Rheodyneหัวฉีด M-7125 (Cocati รัฐแคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา), คอลัมน์ μBondapak C18(300 × 3.9 มม.ประชาชน), คอลัมน์ Porasil B Bondapak C18 ยาม (20 × 3.9 มม.ประชาชน), และ 470 น้ำที่การสแกนตรวจจับ fluorescenceตั้งค่า λexc = 360 nm และ λem = 435 nm เครื่องตรวจจับสัญญาณบันทึกบนเวิร์กสเตชัน chromatography แมก 820(น้ำสมาคม) เคลื่อนระยะเมทานอล/น้ำ/อะซิติกกรด (31/68.5/0.5), ประกอบด้วย hexasulfonate โซเดียม 5 มม. ถูกสูบที่ขั้นตอนการอัตรา 1.5 mL/min อุณหภูมิคอลัมน์35 ◦C และปริมาณฉีดได้ 50 μL เนื้อหาไรโบเฟลวินมีวิเคราะห์ ด้วย HPLC ตาม Prodanov และคนอื่น ๆ (1997)สำหรับการวิเคราะห์วิตามิน precolumn การ (ซื้อประชาชน 3.2 มม. 4.0 ซม.) รวบรวมด้วย C18 Porasil B (น้ำเชื่อมโยง), คอลัมน์ ODS Spherisorb(3.9 มม.ประชาชน× 30 ซม.), และ 470 fluorescence เครื่องตรวจจับการสแกนใช้ที่ λexc = 445 nm และ λem = 520 nm ระยะเคลื่อนมีเมทานอล/น้ำ/อะซิติกกรด (31/68.5/0.5), 5 mM มีhexasulfonate โซเดียม ด้วยอัตราการไหลที่ 1.2 mL/min คอลัมน์อุณหภูมิ 25 ◦C และปริมาณฉีดได้ 20 μL ที่ระดับของไทอามีนไรโบเฟลวินถูก quantified ใช้ที่เกี่ยวข้องเส้นโค้งมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความมุ่งมั่นของวิตามินบีและ riboflavin เนื้อหา
วิตามินบีและ riboflavin ถูกสกัดโดยการสกัดเดียว
ขั้นตอนตามที่วิดัล-Valverde และอื่น ๆ (1997) สั้น ๆ
1 กรัมของตัวอย่างพื้นดินที่ถูกสกัดโดยการย่อยสลายกรดกับ 30 มิลลิลิตร
0.3 M HCl ในนึ่งนาน 15 นาทีที่ 121 ◦C ค่าพีเอช
ของการแก้ปัญหาการปรับแล้วในช่วงของ 5-5.4 กับ
2 M โซเดียมอะซิเตท หลังจากที่ระบายความร้อน, สารสกัดถูกบ่มกับ
5 มิลลิลิตร 15% น้ำ Taka-Diastase (Fluka) เป็นเวลา 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 45 ◦C หลังจากนั้น
กลุ่มตัวอย่างที่ถูกกรองผ่านเบอร์ 40 ไม่มีกระดาษกรอง
เต็มไปถึง 100 มิลลิลิตรและกรองผ่าน 0.2 μmporeขนาดไนลอนกรอง
เมมเบรน เนื้อหาวิตามินบีได้รับการวิเคราะห์โดยมีประสิทธิภาพสูง
ของเหลว chromatography (HPLC) ให้บริการโดยอนุพันธ์ postcolumn
ระบบตาม Prodanov และอื่น ๆ (1997) โครมา
ระบบการติดตั้ง bothM510 andM45Model
ปั๊ม (วอสโซ, ฟอร์ด, Conn., USA) Rheodyne
หัวฉีด M-7125 (Cocati, Calif. USA) คอลัมน์μBondapak C18
(300 × 3.9 มม id) Porasil B Bondapak C18 คอลัมน์ยาม (20 × 3.9 มม id) และเครื่องตรวจจับการเรืองแสงน้ำ 470 สแกน
การตั้งค่าที่λexc = 360 นาโนเมตรและλem = 435 นาโนเมตร เครื่องตรวจจับสัญญาณที่
ถูกบันทึกลงบนเวิร์กสเตชันโค Maxima 820
(น้ำ Associates) เมทานอลเฟสเคลื่อนที่ / น้ำ / อะซิติก
กรด (31 / 68.5 / 0.5) มี hexasulfonate โซเดียม 5 มิลลิถูก
สูบที่อัตราการไหล 1.5 มิลลิลิตร / นาที อุณหภูมิคอลัมน์เป็น
35 ◦Cและปริมาณการฉีดคือ 50 ไมโครลิตร เนื้อหา Riboflavin
ได้รับการวิเคราะห์โดยวิธี HPLC ตาม Prodanov และอื่น ๆ (1997).
สำหรับการวิเคราะห์ riboflavin, precolumn (3.2 มม id × 4.0 ซม.) เต็มไป
ด้วย C18 Porasil B (วอสโซ) คอลัมน์ Spherisorb ODS
(3.9 มม id × 30 ซม. ) และเครื่องตรวจจับการเรืองแสงสแกน 470
ถูกนำมาใช้ในλexc = 445 นาโนเมตรและλem = 520 นาโนเมตร เฟสเคลื่อนที่
เป็นเมทานอล / น้ำ / กรดอะซิติก (31 / 68.5 / 0.5) ที่มี 5 มิลลิ
hexasulfonate โซเดียมที่มีอัตราการไหล 1.2 มิลลิลิตร / นาที คอลัมน์
อุณหภูมิ 25 ◦Cและปริมาณการฉีดคือ 20 ไมโครลิตร
ระดับของวิตามินบีและ riboflavin ถูกวัดโดยใช้แต่ละ
เส้นโค้งมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การหาปริมาณไทอามีน Thiamine วิตามินบี 2 วิตามินบี 2 และเนื้อหา
และถูกสกัดโดยกระบวนการสกัด
เดียวตาม วิดาล วาลเวอเด และคนอื่น ๆ ( 1997 ) สั้น ๆ ,
1 G ของตัวอย่างดินถูกสกัดด้วยกรด 30 ml
3 M HCl ในหม้อฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส 15 นาที◦ pH ของสารละลาย
แล้วปรับช่วง 5 ถึง 5.4 กับ
2 M โซเดียมอะซิเทต เมื่อเย็นสารสกัดถูกบ่มกับ
5 มล. 15% โดยทากะ diastase ( fluka ) 3 H 45 ◦ C หลังจากนั้น
จำนวน 40 whatman ยางกรองผ่านกระดาษกรอง
เต็ม 100 มิลลิลิตร แล้วกรองผ่านตัวกรองไนล่อน ขนาด 0.2 μ mpore
เมมเบรน วิตามินบี 1 ปริมาณวิเคราะห์โดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC )

โดย postcolumn ซัลตามระบบ prodanov และอื่น ๆ ( 1997 ) ระบบและติดตั้ง bothm510 andm45model

ปั๊ม ( น้ำ Associates , Milford , เครื่องกล , สหรัฐอเมริกา ) , rheodyne
m-7125 หัวฉีด ( cocati , รัฐแคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) , μซึ c18 คอลัมน์
( 300 × 3.9 มม. ไอดี ) , porasil B ซึ c18 ยามคอลัมน์ ( 20 × 3.9 มม. บัตร ) และเครื่องตรวจจับการสแกน
น้ำ 470การตั้งค่าที่λ 3 = 360 nm และλ em = 435 นาโนเมตร เครื่องตรวจจับสัญญาณ
ถูกบันทึกไว้ในเครื่องเวิร์กสเตชัน Maxima 820
( น้ำ Associates ) เฟสเคลื่อนที่ที่ใช้เมทานอล / น้ำ /
acid ( 31 / ดี / 0.5 ) ที่มี hexasulfonate โซเดียม 5 มิลลิเมตร คือ
สูบในอัตราการไหล 1.5 มิลลิลิตร / นาที คอลัมน์ที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส และปริมาณ◦
ฉีด 50 μ Riboflavin เนื้อหา
Lวิเคราะห์โดย HPLC ตาม prodanov และอื่น ๆ ( 2540 ) .
สำหรับการวิเคราะห์ Riboflavin , precolumn ( 3.2 มิลลิเมตร ไอดี× 4.0 ซม. ) บรรจุ
กับ c18 porasil B ( น้ำร่วม ) , ODS spherisorb คอลัมน์
( 3.9 มม. บัตร× 30 ซม. ) และมีการใช้ในการสแกนตรวจจับ
λ 3 = 445 nm และλ em = 520 nm .
เฟสเคลื่อนที่เป็นเมทานอล / น้ำ / กรดน้ำส้ม ( 31 / ดี / 0 ) (
5 มม.โซเดียม hexasulfonate ด้วยอัตราการไหลที่ 1.2 มิลลิลิตร / นาที คอลัมน์
อุณหภูมิ 25 C และปริมาณการฉีด◦ 20 μ L .
ระดับวิตามินบี Riboflavin เป็นวัดและใช้ตามเส้นโค้ง
มาตรฐาน