Induction of Apoptosis by Rhinacant

Induction of Apoptosis by Rhinacanthone in HeLa Cells In order to examine whether the inhibitory effect of rhinacanthone on the growth of HeLa cells is due to apoptosis,we confirmed the apoptotic characterizations in HeLa cells by several approaches, e.g., morphological changes,
DNA fragmentation, cell cycle progression, TUNEL staining assay detection, agarose gel electrophoresis, and FACScan flow cytometry.In the morphological change analysis, the cells treated with 3, 6, and 10 mM rhinacanthone for 4 and 8 h were examined by using a confocal laser scanning microscope after staining the cells with in situ TUNEL assay. As shown in Fig.
3, marked morphological changes were observed such as becoming round in shape, membrane blebbing and apoptotic bodies; these were the characteristics of apoptotic cells.20—25)The levels of apoptosis gradually increased in a dose-dependent manner. Similar results were obtained with b-lapachone under the same treatment conditions (data not shown).Subsequently, we analyzed whether DNA fragmentation was induced by rhinacanthone in HeLa cells using an agarose gel electrophoresis. After the treatment of HeLa cells with 6 mM rhinacanthone for 4 and 8 h, a typical ladder pattern of DNA internucleosomal fragmentation was apparently observed,
that is a hallmark of apoptotic cell death18) (Fig. 4).b-Lapachone and adriamycin (6 mM) treatments also affected

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เหนี่ยวนำโดย Rhinacanthone การตายของเซลล์ในเซลล์ HeLa ในสั่งการตรวจสอบว่า inhibitory ผลของ rhinacanthone การเจริญเติบโตของเซลล์ HeLa เนื่องจากกัน เรายืนยัน characterizations apoptotic ในเซลล์ HeLa โดยวิธีการต่าง ๆ เช่น สัณฐานเปลี่ยนแปลงการกระจายตัวของดีเอ็นเอ ความก้าวหน้ารอบเซลล์ TUNEL สีผมทดสอบตรวจ agarose เจอิ และ FACScan ขั้นตอนการตรวจวิเคราะห์เซลล์ ในการสัณฐานเปลี่ยนวิเคราะห์ เซลล์ด้วย 3, 6 และ 10 มม. rhinacanthone สำหรับ 4 และ 8 ชั่วโมงถูกตรวจสอบ โดยใช้เลเซอร์โฟคอสแกนกล้องจุลทรรศน์จากการย้อมสีเซลล์ ด้วยทดสอบ TUNEL ในแหล่งกำเนิด ดังแสดงในรูป3 การเปลี่ยนแปลงสัณฐานหมายข้อสังเกตเช่นเป็นทรงกลมในรูปร่าง เมมเบรน blebbing และ apoptotic เนื้อ เหล่านี้เป็นลักษณะของ apoptotic cells.20—25)The ระดับการตายเพิ่มขึ้นเรื่อย ๆ โดยขึ้นอยู่กับปริมาณ รับผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกับบี lapachone ภายใต้เงื่อนไขการรักษาเดียวกัน (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ต่อมา เราวิเคราะห์ว่าการกระจายตัวของดีเอ็นเอถูกเหนี่ยวนำ โดย rhinacanthone ในเซลล์ HeLa ที่ใช้เป็นอิเจ agarose หลังการรักษาเซลล์ HeLa กับ rhinacanthone 6 mM สำหรับ h 4 และ 8 บันไดทั่วไปรูปแบบของการกระจายตัวของดีเอ็นเอ internucleosomal ถูกสังเกตเห็นได้ชัดที่เป็นจุดเด่นของ apoptotic เซลล์ death18) (รูป 4) .b Lapachone และ adriamycin (6 มิลลิเมตร) ยัง ได้รับผลการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเหนี่ยวนำของ Apoptosis โดย Rhinacanthone ในเซลล์ HeLa เพื่อตรวจสอบว่าผลยับยั้งของ rhinacanthone ต่อการเจริญเติบโตของเซลล์ HeLa เป็นเพราะการตายของเซลล์เราได้รับการยืนยัน characterizations apoptotic ในเซลล์ HeLa โดยหลายวิธีเช่นการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา
ดีเอ็นเอของเซลล์ ความก้าวหน้ารอบ TUNEL การตรวจสอบการย้อมสีการทดสอบ, ข่าวคราว agarose และไหล FACScan cytometry.In การวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาเซลล์รับการรักษาด้วย 3, 6 และ 10 มิลลิ rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมงมีการตรวจสอบโดยใช้ confocal เลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์หลัง การย้อมสีเซลล์ที่มีอยู่ในแหล่งกำเนิด TUNEL ทดสอบ . ดังแสดงในรูป
ที่ 3, การทำเครื่องหมายการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาถูกตั้งข้อสังเกตเช่นกลายเป็นรอบในรูปร่างเยื่อ blebbing และร่างกาย apoptotic; เหล่านี้เป็นลักษณะของ cells.20-25 apoptotic) ในระดับของการตายของเซลล์เพิ่มขึ้นเรื่อย ๆ ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับปริมาณ ผลที่คล้ายกันที่ได้รับกับ B-lapachone ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันการรักษา (ไม่ได้แสดงข้อมูล) .Subsequently เราวิเคราะห์ว่าการกระจายตัวของดีเอ็นเอที่เกิดจาก rhinacanthone ในเซลล์ HeLa ใช้ electrophoresis agarose เจล หลังจากการรักษาของเซลล์ HeLa 6 มิลลิ rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมงรูปแบบขั้นบันไดตามแบบฉบับของดีเอ็นเอ internucleosomal เป็นที่สังเกตเห็นได้ชัดว่าผู้
ที่เป็นจุดเด่นของ death18 เซลล์ที่เกิด apoptosis) (รูปที่. 4) .b-Lapachone และ Adriamycin (6 มิลลิเมตร) การรักษานอกจากนี้ยังได้รับผลกระทบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การชักนำให้เกิด apoptosis ในเซลล์โดย rhinacanthone ล่าเพื่อตรวจสอบว่าผลยับยั้งของ rhinacanthone ในการเจริญเติบโตของเซลล์ เนื่องจากเซลล์ Hela เรายืนยันในเซลล์ Hela characterizations กลุ่มที่มีแนวทางต่างๆ เช่น การเปลี่ยนแปลงลักษณะทางสัณฐานวิทยาการกระจายตัวของดีเอ็นเอ วัฏจักรเซลล์ความก้าวหน้า การตรวจหาอุโมงค์โดยเจลอิเลคโตรโฟรีซีส และเครื่องนับเซลล์ facscan ในการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงลักษณะทางสัณฐานวิทยา เซลล์ที่ได้รับ 3 , 6 , และ 10 มม. rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมงตรวจโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ด้วยเลเซอร์ หลังการย้อมเซลล์ด้วยวิธี TUNEL ตามลำดับ ดังแสดงในรูปที่3 , การทำเครื่องหมายการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา พบว่ามี เช่น เป็นรอบในรูปทรงและเนื้อ เยื่อ blebbing กลุ่มที่มี เหล่านี้เป็นลักษณะของเนื้อเยื่อ . 20-25 ) ระดับเซลล์ค่อยๆเพิ่มขึ้นในลักษณะปิดกั้น . ผลที่คล้ายกันได้รับกับ b-lapachone ภายใต้เงื่อนไขการรักษาเดียวกัน ( ข้อมูลไม่แสดง ) . ต่อมา เราวิเคราะห์ว่า การกระตุ้นด้วย rhinacanthone ดีเอ็นเอในเซลล์ Hela ใช้กาโรสเจล หลังจากการรักษาเซลล์ด้วยถึง 6 มม. rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมง รูปแบบโดยทั่วไปของการ internucleosomal บันไดดีเอ็นเอ ปรากฏว่าสังเกตที่เป็นจุดเด่นของมือถือในกลุ่มที่มี death18 ) ( รูปที่ 4 ) b-lapachone ขาวโพลน ( 6 มม. ) และการรักษายังได้รับผลกระทบ