2. Material and methods2.1. Procure

2. Material and methods
2.1. Procurement of raw material
Fresh milk samples were collected fortnightly from April 2008 to March 2009 from three different areas of Punjab, as zones A, B and C selected on the basis of ratio of buffalo and cow, fodder type, concentrate feeding and climatic condition. The ratio of cow and buffalo is 20:80, 30:70 and 40:60 for zones A, B and C, respectively. The fodder used is almost similar for all three zones but there is more trend of feeding concentrates in zone C. The samples were collected in sterilized glass bottles and kept at 4 °C in ice boxes during transportation. Date, time, area and temperature at the time of collection was labeled on each sample.

2.2. Chemical and reagents
All chemicals and reagents were purchased form Merck (Germany) while standards of vitamin A, E and C were purchased from Sigma Aldrich (Japan). Analyses were carried out at the National Institute of Food Science and Technology, University of Agriculture, Faisalabad, Pakistan.

2.3. Milk analysis
2.3.1. Fat, protein and lactose contents
Fat content of the milk was determinated through the Gerber method following the procedure of Marshall (1993) by using 92% H2SO4 (specific gravity 1.825) and Isoamyl alcohol. Moreover, the protein content was estimated by following the Kjeldahl method. The percent of nitrogen estimated was multiplied by factor (6.38) to get protein percentage AOAC, 2000. Lactose content was measured by enzymatic hydrolysis of lactose to glucose and β-galactose in the presence of galactosidase and water. Galactose oxidized by NAD and resultant NADH formed is measured spectrophotometerically at 340 nm by following the instructions of AOAC, 2000.

2.4. Vitamins
2.4.1. Vitamin C content
Vitamin C in fresh milk was determined by titrimetric method (Bosset and Eberhard, 1991). Ten grams of fresh milk sample was mixed with 20 mL of 10% Meta phosphoric acid and 40 mL of distilled water at 50 °C was added into a 100 mL long neck amber glass flask and was set on an agitator for 5 min. After that, the volume of the resultant adduct was made up to the mark with distilled water and collected filtrate in a conical flask. Ten milliliters of filtrate was mixed with 5 mL of 10% acetic acid and 10 mL of 2% Meta phosphoric acid in a beaker. It was titrated against 2,6-dichlorophenolindophenol indophenol sodium salt dihydrate and the volume used was noted to determine vitamin C contents by the following formula.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การจัดหาวัตถุดิบตัวอย่างถูกเก็บ fortnightly จาก 2551 เมษายนถึง 2552 มีนาคมจากพื้นที่ต่าง ๆ สามของปัญจาบ โซน A, B และ C ที่เลือกโดยใช้อัตราส่วนของควาย และวัว ประเภทอาหาร นมสดพาสเจอร์ไรส์สภาพอาหาร และสภาพอากาศ อัตราส่วนของวัวและควายเป็น 20:80, 30:70 และ 40:60 สำหรับโซน A, B และ C ตามลำดับ อาหารสัตว์ที่ใช้เป็นเกือบคล้ายกันสำหรับทั้งหมดสามโซน แต่มีแนวโน้มเพิ่มมากขึ้นของอาหารสารสกัดในโซนซี ตัวอย่างถูกรวบรวมไว้ในขวดแก้ว sterilized และเก็บที่ 4 ° C ในถังน้ำแข็งในระหว่างการขนส่ง วัน เวลา พื้นที่ และอุณหภูมิในขณะคอลเลกชันถูกป้ายในแต่ละตัวอย่าง2.2. เคมีและ reagentsทั้งหมดเคมีภัณฑ์และ reagents ซื้อฟอร์มเมอร์ค (เยอรมนี) ในขณะที่มาตรฐานของวิตามิน A, E และ C ซื้อจาก Aldrich ซิกมา (ญี่ปุ่น) วิเคราะห์ได้ดำเนินที่สถาบันแห่งชาติของอาหารวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี มหาวิทยาลัยเกษตร ไฟซาลาบาด ปากีสถาน2.3 นมวิเคราะห์2.3.1 ไขมัน โปรตีนและแล็กโทสเนื้อหาไขมันของนมถูก determinated ผ่านขั้นตอนของมาร์แชล (1993) โดย 92% กำมะถันวิธี Gerber (ถ่วง 1.825) และ Isoamyl แอลกอฮอล์ นอกจากนี้ ได้ประมาณโปรตีนด้วยวิธี Kjeldahl เปอร์เซ็นต์ของไนโตรเจนประมาณถูกคูณ ด้วยตัวคูณ (6.38) จะได้รับเปอร์เซ็นต์โปรตีน AOAC, 2000 มีวัดเนื้อหาย่อยแลคโตส โดยเอนไซม์ในระบบไฮโตรไลซ์ของแล็กโทสน้ำตาลกลูโคสและกาแล็กโทสβในต่อหน้าของ galactosidase และน้ำ กาแล็กโทสออกซิไดซ์ โดยและและ resultant NADH ที่เกิดขึ้นคือวัด spectrophotometerically ที่ 340 nm ตามคำแนะนำของ AOAC, 20002.4. วิตามิน2.4.1. เนื้อหาวิตามินซีวิตามินซีในนมสดที่ถูกกำหนด โดยวิธี titrimetric (Bosset และ Eberhard, 1991) 10 กรัมของตัวอย่างน้ำนมสดที่ผสมกับ 20 mL ของ 10% เมตาฟอสฟอริกกรด และถูกเพิ่มเข้าไปในตัว 100 มลคอยาวสีเหลืองอำพันแก้วหนาว 40 mL ของน้ำกลั่นที่ 50 ° C และถูกตั้งค่าบนการ agitator ใน 5 นาที หลังจากนั้น ปริมาตรของ adduct ผลแก่ที่จะขึ้นเครื่องหมายด้วยน้ำกลั่น และรวบรวมสารกรองในหนาวทรงกรวย Milliliters สิบของสารกรองที่ผสมกับกรดอะซิติก 10% และ 10 mL ของ 2% เมตาฟอสฟอริกกรดในบีกเกอร์ 5 mL มันถูก titrated กับ 2,6 dichlorophenolindophenol indophenol dihydrate โซเดียมเกลือ และปริมาณที่ใช้ถูกตั้งข้อสังเกตเพื่อกำหนดเนื้อหาวิตามินซี โดยใช้สูตรต่อไปนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การจัดหาวัตถุดิบ
ตัวอย่างนมสดที่ถูกเก็บรวบรวมรายปักษ์ตั้งแต่เดือนเมษายน 2008 ถึงมีนาคม 2009 จากสามพื้นที่ที่แตกต่างกันของรัฐปัญจาบเป็นโซน A, B และ C เลือกบนพื้นฐานของอัตราส่วนของควายและวัวประเภทอาหารสัตว์, สมาธิให้อาหารและสภาพภูมิอากาศ อัตราส่วนของวัวและควายเป็น 20:80, 30:70 และ 40:60 สำหรับโซน A, B และ C ตามลำดับ อาหารสัตว์ที่ใช้เป็นเกือบคล้ายกันสำหรับทั้งสามโซน แต่มีแนวโน้มมากขึ้นของการให้อาหารจะมุ่งเน้นในเขต C. ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในขวดแก้วผ่านการฆ่าเชื้อและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสในกล่องน้ำแข็งในระหว่างการขนส่ง วันที่, เวลาพื้นที่และอุณหภูมิในช่วงเวลาของการเก็บรวบรวมการถูกตราหน้าว่าในแต่ละตัวอย่าง. 2.2 สารเคมีและสารเคมีสารเคมีและสารเคมีทั้งหมดที่ซื้อมาในรูปแบบของเมอร์ (เยอรมนี) ในขณะที่มาตรฐานของวิตามิน A, E และ C ที่ซื้อมาจาก Sigma ดิช (ญี่ปุ่น) การวิเคราะห์ได้ดำเนินการที่สถาบันแห่งชาติของวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีมหาวิทยาลัยเกษตร Faisalabad ปากีสถาน. 2.3 การวิเคราะห์นม2.3.1 ไขมันโปรตีนและแลคโตสเนื้อหาปริมาณไขมันของนมที่ถูก determinated ผ่านวิธี Gerber ตามขั้นตอนของมาร์แชลล์ (1993) โดยใช้ H2SO4 92% (ความถ่วงจำเพาะ 1.825) และเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ Isoamyl นอกจากนี้ปริมาณโปรตีนเป็นที่คาดกันโดยทำตามวิธี Kjeldahl ร้อยละของไนโตรเจนประมาณถูกคูณด้วยปัจจัย (6.38) เพื่อให้ได้ AOAC โปรตีนร้อยละ 2000 เนื้อหาแลคโตสได้รับการวัดโดยการย่อยสลายของเอนไซม์แลคโตสเป็นน้ำตาลกลูโคสและβ-กาแลคในการปรากฏตัวของ galactosidase และน้ำ กาแลคออกซิไดซ์โดย NAD NADH และผลที่เกิดขึ้นเป็นวัด spectrophotometerically ที่ 340 นาโนเมตรโดยทำตามคำแนะนำของ AOAC, 2000. 2.4 วิตามิน2.4.1 ปริมาณวิตามิน C วิตามินซีในนมสดถูกกำหนดโดยวิธีการไตเตรท (Bosset และ Eberhard, 1991) สิบกรัมของตัวอย่างนมสดผสมกับ 20 มิลลิลิตรของกรดฟอสฟ Meta 10% และ 40 มลของน้ำกลั่นที่ 50 ° C ถูกเพิ่มเข้าไปในลำคอสีเหลืองอำพัน 100 มลยาวขวดแก้วและตั้งอยู่บนปลุกปั่นเป็นเวลา 5 นาที หลังจากนั้นปริมาณการดึงเข้าหาผลลัพธ์ที่ถูกสร้างขึ้นเพื่อทำเครื่องหมายด้วยน้ำกลั่นและกรองเก็บในขวดรูปกรวย สิบมิลลิลิตรกรองผสมกับ 5 มิลลิลิตร 10% กรดอะซิติกและ 10 มล 2% กรดฟอสฟ Meta ในบีกเกอร์ มันได้รับการปรับขนาดกับ 2,6-dichlorophenolindophenol indophenol dihydrate เกลือโซเดียมและปริมาณการใช้งานที่ถูกตั้งข้อสังเกตในการกำหนดเนื้อหาวิตามินซีจากสูตรดังต่อไปนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . จัดซื้อวัตถุดิบนมสด
ตัวอย่างรายปักษ์จากเดือนเมษายน 2551 ถึงมีนาคม 2009 จากสามพื้นที่ที่แตกต่างกันของรัฐปัญจาบเป็นโซน A , B และ C เลือกบนพื้นฐานของอัตราส่วนของควายและวัว ประเภท อาหารสัตว์ , อาหารข้นและสภาพภูมิอากาศ . อัตราส่วนของวัวและควายเป็น 30 : 70 และ 40 : 60 : สำหรับโซน A , B และ C ตามลำดับคนไร้ค่าที่ใช้เกือบจะเหมือนกันทั้งหมด 3 โซน แต่ยังมีแนวโน้มของการให้อาหารข้นในโซน C จำนวนในการฆ่าเชื้อขวดแก้วและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส ใน °กล่องน้ำแข็งในระหว่างการขนส่ง วันที่ , เวลา , พื้นที่และอุณหภูมิที่เวลาของการเก็บได้มีข้อความในแต่ละตัวอย่าง

2.2 . เคมีและสารเคมี
สารเคมีและสารเคมีที่ถูกซื้อจากเมอร์ค ( เยอรมนี ) ในขณะที่มาตรฐานของวิตามิน A , E และ C ที่ถูกซื้อจากซิกม่า Aldrich ( ญี่ปุ่น ) วิเคราะห์ทดลองที่สถาบันแห่งชาติของวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหาร มหาวิทยาลัยเกษตร , Faisalabad , ปากีสถาน .

2.3 การวิเคราะห์น้ำนม
2.3.1 . โปรตีนไขมันและแลคโตส เนื้อหา
ปริมาณไขมันในนมเป็น determinated ผ่าน Gerber วิธีดังต่อไปนี้ขั้นตอนของมาร์แชล ( 1993 ) โดยใช้ 92 % กรดซัลฟิวริก ( ความถ่วงจำเพาะ 1.825 ) และแอลกอฮอล์ในปริมาณ . นอกจากนี้ ปริมาณโปรตีนประมาณตาม 0 วิธีการ เปอร์เซ็นต์ของไนโตรเจนประมาณถูกคูณด้วยตัวประกอบ ( 6.38 ) เพื่อให้ได้เปอร์เซ็นต์โปรตีนโปรตีน , 2000ขอบคุณเนื้อหาวัดจากการย่อยเอนไซม์แลคโตสและกลูโคสของบีตา - กาแล็กโทสในการแสดงตนของ galactosidase และน้ำ กาแลกโตสและออกซิไดซ์ NADH ที่เกิดขึ้นโดย NAD ซึ่งเป็นวัด spectrophotometerically ที่ 340 รึเปล่า nm ตามคําแนะนําของโปรตีน , 2000

2.4 . วิตามิน
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . วิตามินซี
วิตามินในน้ำนมสดถูกกำหนดโดยวิธีไททริเมทริก ( bosset และเอเบอร์ฮาร์ด , 1991 ) 10 กรัม ใช้นมสดผสมกับ 20 ทำไมมล 10% เมตา กรดฟอสฟอริค และ 40 ไหมมล. น้ำกลั่นที่ 50  ° C เพิ่มให้เป็น 100 ml ขวดแก้วสีเหลืองคอไหมยาวและตั้งอยู่บนกวน 5 ไหมนาทีหลังจากนั้นระดับเสียงของปุ่มตัวเลือกดังกล่าวถูกสร้างขึ้นเพื่อทำเครื่องหมายด้วยน้ำกลั่นและเก็บสารในขวดรูปกรวย . 10 มิลลิลิตร กรอง ผสมกับ 5 มิลลิลิตรของกรด  10  และ 10% มล. 2 % เมตา กรดฟอสฟอริค ในบีกเกอร์ . มันเป็นตลอดเวลากับ 26-dichlorophenolindophenol indophenol dihydrate ปริมาณเกลือโซเดียม และใช้เป็นข้อสังเกตเพื่อตรวจสอบปริมาณวิตามิน C ด้วยสูตรต่อไปนี้