Laccase activity assay. Laccase act

Laccase activity assay. Laccase activity was measured using 2mM 2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS; Sigma-Aldrich, St. Louis,MO, USA) in 50 mM sodium acetate buffer (pH 4.0). The reaction mixture, containing 0.99 mL substrate solution and 0.01 mL enzyme, was incubated for 3 min at 25oC. The reaction was tracked using a UV-Vis spectrophotometer (Model Ultraspec 2100 Pro; Amersham Biosciences, Piscataway,NJ, USA) at 420 nm. The absorbance at 420 nm was converted into the amount of product using the molecular extinction coefficient of the oxidized ABTS (ε420 nm = 36,000/M/cm). One unit of enzyme activity was defined as the amount of laccase required to produce 1 μmole of the product per minute.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Laccase กิจกรรมวิเคราะห์ กิจกรรม Laccase ถูกวัดโดยใช้เกลือ 2 มม. diammonium 2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (รเรียน Sigma-Aldrich, St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) ในบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม 50 มม. (pH 4.0) ส่วนผสมปฏิกิริยา แก้ปัญหาพื้นผิว 0.99 mL และ 0.01 mL เอนไซม์ ถูก incubated ในนาทีที่ 3 ที่ 25oC ปฏิกิริยาที่ถูกติดตามโดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่างเป็น UV-Vis (รุ่น Ultraspec 2100 Pro เวลาออก Amersham ปิสกาตาเวย์ NJ สหรัฐอเมริกา) ที่ 420 nm Absorbance ที่ 420 nm แปลงจำนวนผลิตภัณฑ์ที่ใช้สัมประสิทธิ์สูญพันธุ์โมเลกุลของรเรียนตกแต่ง (ε420 nm = 36,000 M/cm) หน่วยหนึ่งของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นยอดของ laccase ต้องผลิต μmole 1 ผลิตภัณฑ์ต่อนาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบแลคเคสกิจกรรม กิจกรรมแลคเคสถูกวัดโดยใช้ 2mm 2,2-azino ทวิ (กรด 3 ethylbenzothiazoline-6​​-sulfonic) เกลือ diammonium (ABTS; Sigma-Aldrich, เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) ใน 50 มิลลิโซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ (pH 4.0) . ผสมปฏิกิริยาที่มีวิธีการแก้ปัญหาสารตั้งต้น 0.99 มิลลิลิตรและเอนไซม์มิลลิลิตร 0.01, ถูกบ่มเป็นเวลา 3 นาทีที่ 25oC ปฏิกิริยาถูกติดตามโดยใช้ spectrophotometer UV-Vis (รุ่น Pro Ultraspec 2100; Amersham ชีววิทยาศาสตร์ Piscataway, NJ, สหรัฐอเมริกา) ที่ 420 นาโนเมตร การดูดกลืนแสงที่ 420 นาโนเมตรถูกดัดแปลงเป็นปริมาณของผลิตภัณฑ์โดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียโมเลกุลของออกซิเจน ABTS (ε420นาโนเมตร = 36,000 / M / เซนติเมตร) หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นปริมาณของแลคเคสจำเป็นในการผลิต 1 μmoleของผลิตภัณฑ์ต่อนาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

- กิจกรรมการทดสอบ กิจกรรม - การวัด 2mm 2,2-azino-bis ( 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid ) diammonium เกลือ ( Abbr ; ซิกม่า Aldrich St . Louis , MO , USA ) 50 มิลลิโมลาร์โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 4.0 ) ปฏิกิริยาที่ผสมที่มีพื้นผิวและ 0.01 มิลลิลิตร สารละลาย 0.99 มิลลิลิตรเอนไซม์ คือ บ่มนาน 3 นาทีที่ 25oc .ปฏิกิริยาที่ถูกติดตามการใช้ UV VIS Spectrophotometer ( แบบ ultraspec 2100 Pro ; ที่ชีววิทยา ปิสกาตาเวย์ , NJ , USA ) ที่ 420 นาโนเมตร นที่ 420 nm ก็แปลงเป็นปริมาณของผลิตภัณฑ์ที่ใช้โมเลกุลของออกซิไดซ์ Abbr ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ ( ε 420 nm = 36 , 000 / ม. / ซม. )หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นปริมาณแลคเคสต้องผลิต 1 μโมลของผลิตภัณฑ์ต่อนาที