2.7. Antibacterial assay in vitroTh

2.7. Antibacterial assay in vitro
The antibacterial potential of extracts was evaluated using the micro-broth dilution method, which enables determination of min- imalinhibitory concentration(MIC)according to the early-described procedure (Olech et al., 2012). The eight reference strains, including Gram-positive bacteria (Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus subtilis ATCC 6633, Micrococcus luteus ATCC 10240) and Gram-negative bacteria (Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Proteus mirabilis ATCC 12453) were used. Extracts were dissolved in dimethyl sulfide (DMSO) and the series of the two-fold dilutions, ranging from 0.078 to 5 mg/ml, was prepared in Mueller-Hinton broth (Biocorp, Poland) in 96-well microtiter plates. The wells were inoculated with the bacterial sus- pension (the final inoculum size of 106 colony-forming units e CFU/ ml). Following the 24-h incubation at 35 C, MIC was defined as the lowest concentration of the extract at which no visible growth was observed. DMSO was used as a negative control, while as a positive control only the plant material in broth and broth with inocula was included. Gentamicin was used as a reference compound. Minimal bactericidal concentrations (MBCs) were determined by collecting 20 ml from each well with growth inhibition and placing onto duplicate Mueller-Hinton agar plates and incubating at 35 C for 24 h. MBC was defined as the lowest extract concentration at which there was no bacterial growth.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การเครื่องมือทดสอบต้านเชื้อแบคทีเรียเป็นสารต้านเชื้อแบคทีเรียของสารสกัดถูกประเมินโดยใช้วิธีเจือจางไมโครซุป ซึ่งทำให้ความมุ่งมั่นของสมาธิ imalinhibitory ต่ำสุด (MIC) ตามขั้นตอนที่อธิบายต้น (Olech et al., 2012) ใช้ 8 อ้างอิงสายพันธุ์ แบคทีเรีย (Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 หมอเทศข้างลาย Staphylococcus ATCC 25923 คัด subtilis ATCC 6633 รำ luteus ATCC 10240) และแบคทีเรียแบคทีเรียแกรมลบ (Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Proteus mirabilis ATCC 12453) สารสกัดที่ละลายใน dimethyl sulfide (DMSO) และชุดของ dilutions สองพับ ตั้งแต่ 0.078 5 mg/ml ถูกเตรียมในซุป Mueller Hinton (Biocorp โปแลนด์) ใน microtiter ดี 96 แผ่น บ่อมี inoculated กับแบคทีเรีย sus บำนาญ (ขนาด inoculum final 106 เป็นอาณานิคมหน่วยอี CFU / ml) ต่อ 24 h บ่มที่ 35 C, MIC ได้ defined เป็นความเข้มข้นต่ำสุดของสารสกัดที่ไม่สังเกตไม่เห็นการเจริญเติบโต DMSO ถูกใช้เป็นตัวควบคุมค่าลบ ในขณะที่เป็นตัวควบคุมบวก เฉพาะวัสดุพืชในซุปและซุปกับ inocula ถูกรวม Gentamicin ถูกใช้เป็นสารประกอบอ้างอิง ความเข้มข้น bactericidal น้อย (คุณลักษณะเป็น mbcs ได้) ถูกกำหนด โดยการรวบรวม 20 ml จากแต่ละบ่อมียับยั้งการเจริญเติบโต และวางบนซ้ำ Mueller Hinton agar แผ่น และ incubating ที่ 35 C สำหรับ 24 h. ช่อง MBC ได้ defined เป็นสารสกัดเข้มข้นที่มีเจริญเติบโตของแบคทีเรียไม่ต่ำสุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 การตรวจสอบปริมาณแบคทีเรียในหลอดทดลอง
ที่มีศักยภาพต้านเชื้อแบคทีเรียของสารสกัดถูกประเมินโดยใช้วิธีการเจือจางไมโครน้ำซุปซึ่งจะช่วยให้การกำหนดความเข้มข้น imalinhibitory min- (MIC) ตามขั้นตอนต้นอธิบาย (Olech et al., 2012) แปดสายพันธุ์อ้างอิงรวมทั้งแบคทีเรียแกรมบวก (Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus aureus ATCC 25923, เชื้อ Bacillus subtilis ATCC 6633, Micrococcus luteus ATCC 10240) และแบคทีเรียแกรมลบ (Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Proteus mirabilis ATCC 12453) ถูกนำมาใช้ สารสกัดถูกกลืนหายไปใน dimethyl Fi sul เด (DMSO) และชุดของเจือจางสองเท่าตั้งแต่ 0.078-5 mg / ml ได้รับการจัดทำขึ้นในน้ำซุป Mueller-Hinton (Biocorp, โปแลนด์) ใน 96 หลุมแผ่นไมโคร บ่อได้รับเชื้อด้วยเงินบำนาญ sus- แบคทีเรีย (ไฟขนาดหัวเชื้อเอ็นของ 106 หน่วยอาณานิคมขึ้นรูปอี CFU / ml) หลังจากที่บ่ม 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส, MIC เป็นนิยามเป็นความเข้มข้นต่ำสุดของสารสกัดที่ไม่มีการเจริญเติบโตที่มองเห็นได้เป็นที่สังเกต DMSO ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบในขณะที่เป็นตัวควบคุมบวกเพียงวัสดุจากพืชในน้ำซุปและน้ำซุปที่มี inocula ถูกรวม Gentamicin ถูกใช้เป็นสารประกอบอ้างอิง ความเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรียน้อยที่สุด (MBCS) ได้รับการพิจารณาโดยการจัดเก็บ 20 มิลลิลิตรจากกันได้ดีกับการยับยั้งการเจริญเติบโตและการวางลงบนที่ซ้ำกัน Mueller-Hinton แผ่นวุ้นและบ่มที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง MBC ถูกนิยามเป็นความเข้มข้นของสารสกัดจากต่ำสุดที่ไม่มีการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . ยับยั้งแบคทีเรียทดสอบในหลอดทดลอง
ศักยภาพการประเมินการใช้สารไมโครซุปเจือจางวิธีซึ่งจะช่วยให้ปริมาณของ มิน - imalinhibitory Concentration ( MIC ) ตามต้นอธิบายขั้นตอน ( olech et al . , 2012 ) แปดสายพันธุ์อ้างอิง รวมทั้งแบคทีเรียแกรมบวก ( Staphylococcus ) อาหาร 12228 Staphylococcus aureus ATCC 25923 , ,Bacillus subtilis ATCC 6633 , Micrococcus luteus ATCC 10240 ) และแบคทีเรียแกรมลบ ( Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ~ i , 13883 Pseudomonas aeruginosa ATCC , 9027 มก. ที่มีเชื้อ , 12453 ) สถิติที่ใช้ สารสกัดละลายในไดเมทิลซัลจึง de ( DMSO ) และชุดของวิธีการตรวจสอบตั้งแต่ 0.078 5 mg / ml ใน ฮินตัน เตรียมน้ำซุป ( biocorp Mueller ,โปแลนด์ ) ด้วยไมโคร 96 แผ่น บ่อปลูกเชื้อด้วยแบคทีเรีย SUS - เพน ( ถ่ายทอดเชื้อนาลขนาด 106 โคโลนีสร้างหน่วย E CFU / ml ) ตามระยะเวลาที่ 24-h 35  C , ไมค์ คือ เดอ จึงเป็นสมาธิที่เน็ดนสารที่มองเห็นได้ซึ่งไม่เติบโตมากนัก DMSO ใช้เป็นชุดควบคุมลบในขณะที่เป็นตัวควบคุมบวกเพียงวัสดุปลูกในน้ำซุปและซุปกับ inocula ถูกรวม เพื่อใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงประกอบ แบคทีเรียความเข้มข้นน้อยที่สุด ( mbcs ) ถูกกำหนดโดยรวบรวม 20 ml จาก กัน ด้วยการยับยั้งการเจริญเติบโตและการลงซ้ำ มูลเลอร์ ฮินตัน วุ้นแผ่น และไข่ที่ 35  เป็นเวลา 24 ชั่วโมงรูป คือ เดอ จึงเป็นสารสกัดที่ความเข้มข้นต่ำสุดเน็ดซึ่งไม่มีแบคทีเรียเจริญเติบโต