2.2.3. Determination of Antioxidant

2.2.3. Determination of Antioxidant Activity

2.2.3.1 In Vitro

2.2.3.1.1. Free-Radical Scavenging Activity on DPPH•

The DPPH method tested ability to scavenge DPPH• radicals. The experimentation method modified from [24] and [27] mixed 100 μl in a volume of rough extract from rice with 0.1 mM of concentrated DPPH• solution at a volume of 1.9 ml. The obtained mixture will be fermented in a dark space at room temperaturefor 30 min before being measured for light absorption values at a wavelength of 517 nm. The control group consisted of the following: (1) standard BHA antioxidant (butylated hydroxyanisole) and (2) methanol. The measured values were used to calculate DPPH• radical scavenging percentage from the equation [1 - (A517 of sample/ A517 of control)] × 100. IC50 (mg/ml) (concentration value of extracts capable of scavenging DPPH• at 50%) was then calculated from the graph of relationships between percentage scavenging and extract amount.

2.2.3.1.2. Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) Assay

FRAP is the method for testing ability to change Fe3+ to Fe2+ in which the reaction creates a dark blue color.

This analysis can be performed by preparing a FRAP stock solution containing the following: (1) 300 mM concentrated acetate buffer at pH 3.6, (2) 10 mM concentrated TPTZ solution in 40 mM concentrated HCl and (3) 20 mM concentrated FeCl3•6H2O solution. The aforementioned stock solution was then fermented at 37°C before being used for analysis of antioxidant amounts. The experimentation method modified from [24] and [28] mixed 300 μl of rough extracts from rice with FRAP solution at a volume of 1.7 ml. The mixture obtained was then left to react at room temperature for 1 hr. Next, the mixture was measured for light absorption values at a wavelength of 593 nm. The standard antioxidant used to compare with the findings was FeSO4 with a known concentration value. The analysis results were displayed in μmol FeSO4/g fresh weight.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.3 การกำหนดกิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระ2.2.3.1 ในหลอด2.2.3.1.1 กิจกรรม Scavenging ฟรีรัศมี DPPH•วิธี DPPH ทดสอบความสามารถในการ scavenge อนุมูล DPPH• วิธีการทดลองปรับเปลี่ยนจาก [24] และ [27] μl 100 ผสมในปริมาณของหยาบแยกจากข้าว 0.1 มม.ของโซลูชั่น DPPH• เข้มข้นในปริมาณของ 1.9 ml ส่วนผสมที่ได้รับจะหมักในพื้นที่มืดที่ห้อง temperaturefor 30 นาทีก่อนการวัดค่าการดูดซับแสงที่ความยาวคลื่นของ 517 nm กลุ่มควบคุมประกอบด้วยต่อไปนี้: (1) มาตรฐาน BHA สารต้านอนุมูลอิสระ (butylated hydroxyanisole) และ (2) เมทานอล ค่าที่วัดได้ใช้ในการคำนวณ DPPH• รุนแรง scavenging เปอร์เซ็นต์จากสมการที่ [1 - (A517 ตัวอย่าง / A517 ควบคุม)] × 100 IC50 (mg/ml) (ค่าความเข้มข้นของสารสกัดสามารถ scavenging DPPH• 50%) จากนั้นคำนวณจากกราฟของความสัมพันธ์ระหว่างเปอร์เซ็นต์ scavenging และสารสกัดจากยอดเงิน2.2.3.1.2. เฟอร์ลดความสามารถของพลาสมา (FRAP) วิเคราะห์FRAP เป็นวิธีสำหรับการทดสอบความสามารถในการเปลี่ยน Fe3 + Fe2 + ซึ่งปฏิกิริยาสร้างสีน้ำเงินเข้มวิเคราะห์นี้สามารถกระทำได้ โดยการเตรียมปัญหาหุ้น FRAP ประกอบด้วยต่อ: HCl เข้มข้นของบัฟเฟอร์ acetate เข้มข้น (1) 300 mM ที่ค่า pH 3.6, (2) 10 มม.เข้มข้นแก้ปัญหา TPTZ ใน 40 มม. และโซลูชัน FeCl3•6H2O เข้มข้น (3) 20 mM โซลูชันหุ้นดังกล่าวแล้วถูกหมักที่ 37° C ก่อนที่จะถูกใช้สำหรับการวิเคราะห์จำนวนสารต้านอนุมูลอิสระ วิธีการทดลองปรับเปลี่ยนจาก [24] และ [28] ผสม μl 300 ของสารสกัดหยาบจากข้าว โดยวิธี FRAP ที่ปริมาตรของ 1.7 ml ซ้ายแล้วมีส่วนผสมที่ได้รับการตอบสนองที่อุณหภูมิห้อง 1 ชม ถัดไป ส่วนผสมถูกวัดค่าการดูดซับแสงที่ความยาวคลื่นของ 593 nm สารต้านอนุมูลอิสระมาตรฐานที่ใช้เปรียบเทียบกับผลการวิจัยถูก FeSO4 มีค่าความเข้มข้นที่รู้จัก ผลการวิเคราะห์ได้แสดงใน μmol FeSO4/กรัม น้ำหนักสด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.3 . การหาปริมาณสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรม

2.2.3.1 หลอด

2.2.3.1.1 . กำจัดอนุมูลอิสระใน dpph A4

dpph วิธีทดสอบความสามารถเพื่อหา dpph - อนุมูลอิสระ การทดลองวิธีที่ดัดแปลงจาก [ 24 ] และ [ 27 ] ผสม 100 μผมในปริมาณที่หยาบที่สกัดจากข้าวเข้มข้น 0.1 มม. dpph บริการโซลูชั่นที่ปริมาณ 1.9 %นำส่วนผสมจะถูกหมักในพื้นที่ที่มืดที่ temperaturefor ในห้อง 30 นาทีก่อนที่จะถูกวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 517 nm . กลุ่มที่ประกอบด้วยต่อไปนี้ : ( 1 ) มาตรฐาน bha สารต้านอนุมูลอิสระ ( อาการเกร็งหลังแอ่น ) และ ( 2 ) เมทานอลวัดค่าถูกใช้เพื่อคำนวณ dpph - เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาร้อยละจากสมการ [ 1 - ( a517 ตัวอย่าง / a517 ควบคุม ) ] × 100 ic50 ( มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ( ค่าความเข้มข้นของสารสกัดจากความสามารถในการ dpph - 50% ) จากนั้นคำนวณจากกราฟความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณและร้อยละการแยก

2.2.3.1.2 . ลดความสามารถของพลาสมา ( VDO (

) เฟอร์ริคVDO เป็นวิธีการทดสอบความสามารถในการเปลี่ยน fe3 เพื่อ fe2 ซึ่งปฏิกิริยาสร้างสีน้ำเงินเข้มสี

การวิเคราะห์นี้สามารถดำเนินการได้ โดยเตรียม VDO Stock สารละลายที่มีดังต่อไปนี้ : ( 1 ) 300 มม. เข้มข้นอาซีเตตบัฟเฟอร์ pH 3.6 ( 2 ) เข้มข้น 10 มม. tptz สารละลาย HCl เข้มข้น 40 มม. และ ( 3 ) เข้มข้น 20 มม. 6h2o FeCl3 - โซลูชั่นโซลูชั่นหุ้นดังกล่าวแล้ว หมักที่อุณหภูมิ 37 องศา C ก่อนที่จะถูกใช้สำหรับการวิเคราะห์สารปริมาณ . การทดลองวิธีที่ดัดแปลงจาก [ 24 ] และ [ 28 ] ผสม 300 μผมหยาบด้วยสารสกัดจากข้าว VDO ด้วยโซลูชั่นที่ปริมาณ 700 มล. ผสมได้รับซ้ายแล้วโต้กลับที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ต่อไปส่วนผสมจะถูกวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 593 nm . สารต้านอนุมูลอิสระ มาตรฐานที่ใช้เปรียบเทียบกับผลที่ทราบความเข้มข้น feso4 ด้วยค่า การวิเคราะห์ผลการวิจัยแสดงμโมล feso4 / กรัมน้ำหนักสด .