To investigate the effect of the in

To investigate the effect of the intra-articularly injected ASCs on the inflammatory status of the synovium, we injected 20.000 ASCs in the knee joint at day 7 after induction of CIOA and subsequently isolated synovium 6 h, 2, 14 and 42 days thereafter. Various macrophage derived cytokines (IL-1b, IL-6, TNFa, IL-10, KC, S100A8, S100A9) were measured using RT-quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Pro-inflammatory mediators S100A8, S100A9, IL- 1b, IL-6 and KC were highest 6 h after control injection and declined later on, which is in line with earlier studies showing highest synovial activation in early stages of CIOA. Interestingly, ASCs significantly downregulated S100A8, S100A9 [Fig. 2(A)], IL-1b and KC mRNA [Fig. 2(B)] already 6 h after ASC injection. Although mRNA levels were still lower at day 14, this did not reach significance. IL-6 mRNA levels were significantly reduced at day 14, and lower at day 2, although not significantly [Fig. 2(B)]. In addition, protein levels of various cytokines (IL-1b, IL-6, IL-10, KC, IFNg) and S100A8/A9 were measured in synovial washouts using Luminex or ELISA (for S100A8/A9). Low levels of IL-1b [Fig. 3(B)] and very high levels of S100A8/A9 [Fig. 3(A)] were detected 6 h and 2 days after ASC or control injection. IL-1b protein levels were found to be lower at day 2, 14 and 42 after ASC treatment (44, 45 and 34% lower, respectively) [Fig. 3(B)]. Moreover, S100A8/A9 was significantly downregulated on protein level 6 and 48 h after ASC injection (48 and 58% lower, respectively) [Fig. 3(A)]. No effect of ASC treatment was found on protein levels of IL-6 and KC [Fig. 3(B)]. These results indicate that the suppressive effect by ASCs is rapidly initiated in the synovium. Apart from lowering catabolic cytokines, ASC treatment may also affect anabolic growth factors like TGFb and BMP-2, crucial during osteophytosis30. However, no effect of ASCs was found on mRNA levels of TGFb and BMP-2 (data not shown). Measuring TGFb activity in synovial washouts using a CAGA-luc assay, no differences were found at 6 h, 2, 14 or 42 days after ASC and control treatment [Fig. 3(C)].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การตรวจสอบผลของ ASCs ฉีด intra-articularly สถานะของ synovium การอักเสบ เราฉีด ASCs 20,000 ข้อเข่าร่วมในวันที่ 7 หลังจากการเหนี่ยวนำของ CIOA synovium แยกมา 6 ชม. 2, 14 และ 42 วันหลังจากนั้น ต่าง ๆ macrophage มา cytokines (IL-1b, IL-6, 10 TNFa, IL, KC, S100A8, S100A9) ถูกวัดโดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสที่ RT เชิงปริมาณ (qPCR) โปอักเสบสารตัวกลาง S100A8, S100A9, IL-1b, IL-6 KC สูงสุด 6 ชม.หลังฉีดควบคุม และถูกปฏิเสธในภายหลัง ซึ่งจะสอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้านี้แสดงการเปิดใช้งานเนื้อสูงสุดในขั้นตอนแรกของ CIOA น่าสนใจ ASCs มาก downregulated S100A8, S100A9 [รูป 2(A)], IL 1b และ KC mRNA [รูป 2(B)] แล้ว 6 ชม.หลังฉีด ASC แม้ว่าระดับ mRNA ถูกยังคงต่ำในวันที่ 14 นี้ยังไม่ถึงความสำคัญ IL-6 ระดับ mRNA ถูกลดวัน 14 และล่างวัน 2 แม้ว่าไม่มาก [รูป 2(B)] นอกจากนี้ ระดับโปรตีน cytokines ต่าง ๆ (IL 1b, IL-6, IL-10, KC, IFNg) และ S100A8/A9 ที่วัดพังชำรุดเนื้อใช้ Luminex หรือ ELISA (สำหรับ S100A8/A9) ต่ำระดับ IL 1b [รูปหมาย] และระดับสูงของ S100A8/A9 [รูปพัฒนาการ] ตรวจพบ 6 ชม.และ 2 วันหลังจากฉีด ASC หรือควบคุม พบว่าระดับโปรตีน IL 1b จะต่ำกว่าที่วันที่ 2, 14 และ 42 หลัง ASC (44, 45 และ 34% ต่ำลง ตามลำดับ) [รูปหมาย] นอกจากนี้ S100A8/A9 อย่างมีนัยสำคัญ downregulated โปรตีนระดับ 6 และ 48 ชั่วโมงหลังจากฉีด ASC (48 และ 58% ต่ำลง ตามลำดับ) [รูปพัฒนาการ] ไม่มีผลของการรักษา ASC พบระดับโปรตีน IL-6 และ KC [รูปหมาย] ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า ผล suppressive โดย ASCs อย่างรวดเร็วเริ่มต้นในการ synovium นอกจากลด catabolic cytokines, ASC รักษาอาจมีผล anabolic เติบโตปัจจัยเช่น BMP-2 สำคัญระหว่าง osteophytosis30 และ TGFb อย่างไรก็ตาม ไม่มีผลของ ASCs พบระดับ mRNA ของ TGFb และ BMP-2 (ไม่แสดงข้อมูล) วัดพังชำรุดเนื้อที่ใช้ทดสอบ CAGA luc TGFb กิจกรรม ความแตกต่างไม่พบใน 6 ชม. 2, 14 หรือ 42 วันหลังการรักษา ASC และควบคุม [รูป 3 ©]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อศึกษาผลของการฉีด ASCs ภายใน articularly เกี่ยวกับสถานะการอักเสบของ synovium ที่เราฉีด 20.000 ASCs ในข้อเข่าในวันที่ 7 หลังจากการชักนำของ CIOA และต่อมาได้แยก synovium 6 ชั่วโมง, 2, 14 และ 42 วันหลังจากนั้น ต่างๆ macrophage มา cytokines (IL-1B, IL-6, TNFa, IL-10, KC, S100A8, S100A9) ได้รับการวัดโดยใช้ RT-เชิงปริมาณวิธี Polymerase chain reaction (qPCR) ไกล่เกลี่ยโปรอักเสบ S100A8, S100A9, IL- 1B, IL-6 และ KC ได้สูงสุด 6 ชั่วโมงหลังฉีดควบคุมและการปฏิเสธในภายหลังซึ่งสอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นถึงการเปิดใช้งานไขข้อสูงที่สุดในช่วงแรกของการ CIOA ที่น่าสนใจอย่างมีนัยสำคัญ ASCs downregulated S100A8, S100A9 [รูป 2 (A)], IL-1B และ KC mRNA [รูป 2 (B)] แล้ว 6 ชั่วโมงหลังฉีด ASC แม้ว่าระดับ mRNA ก็ยังคงลดลงในวันที่ 14 นี้ไม่ได้เข้าถึงอย่างมีนัยสำคัญ ระดับ IL-6 mRNA ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในวันที่ 14 และลดลงในวันที่ 2 แม้จะไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญ [รูป 2 (B)] นอกจากนี้ระดับโปรตีนของ cytokines ต่างๆ (IL-1B, IL-6, IL-10, KC, IFNg) และ S100A8 / A9 อยู่ในวัด washouts ไขข้อใช้ Luminex หรือ ELISA (สำหรับ S100A8 / A9) ระดับต่ำของ IL-1B [รูป 3 (B)] และสูงมากระดับของ S100A8 / A9 [รูป 3 (A)] พบ 6 ชั่วโมงและ 2 วันหลังจาก ASC หรือการควบคุมการฉีด IL-1b ระดับโปรตีนพบว่ามีการลดลงในวันที่ 2, 14 และ 42 หลังการรักษา ASC (ต่ำกว่า 44, 45 และ 34% ตามลำดับ) [รูป 3 (B)] นอกจากนี้ S100A8 / A9 ถูก downregulated อย่างมีนัยสำคัญในระดับโปรตีนที่ 6 และ 48 ชั่วโมงหลังฉีด ASC (48 และ 58% ต่ำตามลำดับ) [รูป 3 (A)] ไม่มีผลของการรักษา ASC มาพบกันในระดับโปรตีนของ IL-6 และ KC [รูป 3 (B)] ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าผลกระทบที่เกิดจากปราบ ASCs จะเริ่มอย่างรวดเร็วใน synovium นอกเหนือจากการลด cytokines catabolic รักษา ASC อาจส่งผลกระทบต่อปัจจัยการเจริญเติบโต anabolic เช่น TGFb และ BMP-2, ที่สำคัญในช่วง osteophytosis30 แต่ไม่มีผลกระทบของ ASCs ถูกพบในระดับ mRNA ของ TGFb และ BMP-2 (ไม่ได้แสดงข้อมูล) วัดกิจกรรม TGFb ใน washouts ไขข้อใช้ทดสอบ CagA-Luc ไม่พบความแตกต่างที่ 6 ชั่วโมง, 2, 14 หรือ 42 วันหลังจาก ASC และการควบคุมการรักษา [รูป 3 (C)]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อศึกษาผลของการฉีดภายใน articularly ascs ในภาวะการอักเสบของ synovium เราฉีด 20.000 ascs ในข้อต่อหัวเข่าในวันที่ 7 หลังการแยก synovium และต่อมา CIOA 6 ชั่วโมง , 2 , 14 และ 42 วัน หลังจากนั้น ต่าง ๆได้มาชนิดแมโครฟาจ ( il-1b สร้าง tnfa เตอร์ , , , , s100a8 เคซี , วัด , s100a9 ) ใช้ RT ปริมาณการใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ( qpcr ) โปรอักเสบ s100a8 s100a9 mediators , อิล - 1B , IL-6 และ KC สูงสุด 6 ชั่วโมงหลังฉีดยาคุม และปฏิเสธในภายหลัง ซึ่งสอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้านี้ที่แสดงในช่วงแรกของการเปิดใช้งานสูงสุด synovial CIOA . น่าสนใจ ascs อย่างมาก downregulated s100a8 s100a9 , [ รูปที่ 2 ( ก ) ] , il-1b และ KC mRNA [ รูปที่ 2 ( ข ) ] แล้ว 6 ชั่วโมง หลังจากฉีด ASC . แม้ว่ายังต่ำกว่าระดับ mRNA ที่ 14 วัน ซึ่งไม่ถึงที่กำหนด ระดับการสร้าง mRNA ลดลงอย่างมากที่ 14 วัน และลดลงในวันที่ 2 ถึงแม้ว่าทาง [ รูปที่ 2 ( ข ) ] นอกจากนี้ ระดับโปรตีนชนิดต่างๆ ( il-1b สร้างเตอร์ , , , KC , ifng ) และ s100a8 / A9 เป็นวัดในน้ำ โดยใช้ luminex เหลวไหลหรือ ELISA ( s100a8 / A9 ) ระดับต่ำของ il-1b [ รูปที่ 3 ( B ) ] และระดับที่สูงมากของ s100a8 / A9 [ รูปที่ 3 ( ก ) ] พบว่ามี 6 ชั่วโมงและ 2 วันหลังจาก ASC หรือการฉีดยาคุม il-1b ระดับโปรตีนที่พบจะลดลงในวันที่ 2 , 14 และ 42 หลังจากผ่านการรักษา ( 44 , 45 และ 34% ลดลงตามลำดับ ) [ รูปที่ 3 ( B ) ] นอกจากนี้ s100a8 / A9 อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ downregulated โปรตีนระดับ 6 และ 48 ชั่วโมงหลังจากฉีด ASC ( 48 58 ลดลงตามลำดับ ) [ รูปที่ 3 ( ก ) ] ไม่มีผลของ ASC รักษาพบในระดับโปรตีนของ IL-6 และ KC [ รูปที่ 3 ( B ) ] ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า ปราบอิทธิพล โดย ascs อย่างรวดเร็วเริ่มต้นใน synovium . นอกเหนือจากการรักษาชนิด ASC catabolic , นอกจากนี้ยังอาจส่งผลกระทบต่อปัจจัยการเจริญเติบโตเช่น tgfb bmp-2 anabolic และที่สำคัญในช่วง osteophytosis30 . แต่ไม่มีผล ascs ถูกพบในระดับ mRNA ของ tgfb และ bmp-2 ( ข้อมูลไม่แสดง ) การวัดกิจกรรมในน้ำ tgfb เหลวไหลใช้ กาก้า ลุค วิเคราะห์ความแตกต่างพบว่า 6 H , 2 , 14 หรือ 42 วัน หลังจากผ่านการรักษาและควบคุม [ รูปที่ 3 ( C ) ]