2.9. In vitro enzyme activity tests

2.9. In vitro enzyme activity tests
Fresh shoot tissue (5 g) of 3 to 4 seedlings was used for a test of in-vitro enzyme activity.
Tissue was ground and total pro-teins were extracted.
Crude ACCase was extracted and purified asdescribed.
Enzyme activity was assayed following the incorporation of 14 C from NaH14CO3into acetyl-CoA to produce heat- andacid-stable malonyl-CoA.
Four different concentrations (0.1, 1.0, 10and 100 M) of diclofop (98.5% acid, Fluka Analytical, Germany)and pinoxaden (99.7%, Fluka Analytical, Germany) were used toinhibit ACCase activity, with three replicates for each concentration.
The concentrations of diclofop and pinoxaden (in M) thatinhibit ACCase by 50% (I50) in different accessions/populations were calculated from concentration-response curves.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9 การทดสอบเอนไซม์เพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสดยิง (5 กรัม) ของกล้าไม้ 3 4 ถูกใช้สำหรับการทดสอบของเครื่องเอนไซม์ เนื้อเยื่อพื้น และรวมโปร-teins ที่สกัด ACCase น้ำมันที่ถูกสกัด และบริสุทธิ์ asdescribedเอนไซม์ถูก assayed ต่อประสานของ 14 C จาก acetyl-CoA NaH14CO3into เพื่อผลิตความร้อน-andacid-คอก malonyl-CoA ความเข้มข้นแตกต่างกันสี่ (0.1, 1.0, 10and 100 เมตร) diclofop (98.5% กรด วิเคราะห์ Fluka เยอรมนี) และ pinoxaden (99.7% วิเคราะห์ Fluka เยอรมนี) ได้ใช้ toinhibit ACCase กับกิจกรรมเหมือนกับสามสำหรับแต่ละความเข้มข้น ที่ความเข้มข้นของ diclofop และ pinoxaden (ใน M) thatinhibit ACCase 50% (I50) ใน accessions ประชากรแตกต่างกันคำนวณได้จากเส้นโค้งตอบสนองต่อความเข้มข้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . ในหลอดทดลองเอนไซม์ทดสอบ
สดยิงเนื้อเยื่อ ( 5 กรัม ) 3 ถึง 4 ต้นถูกนำมาใช้สำหรับการทดสอบเอนไซม์ในหลอดทดลอง .
เนื้อเยื่อพื้นดินและรวมโปร teins ถูกสกัด
ดิบ accase สกัดบริสุทธิ์ asdescribed .
เอนไซม์ซีรั่มต่อไปนี้การ 14 C จาก nah14co3into อะ COA เพื่อผลิตความร้อน - andacid มั่นคง malonyl COA .
สี่ระดับความเข้มข้น 0.1 , 1 , 10  100 เมตร ) diclofop ( 98.5 % กรด fluka วิเคราะห์ , เยอรมนี ) และ pinoxaden ( 99.7% fluka วิเคราะห์ , เยอรมนี ) ใช้กิจกรรม accase toinhibit , กับสามแบบสำหรับแต่ละความเข้มข้น
ความเข้มข้นของ diclofop และ pinoxaden ( ใน  M ) thatinhibit accase 50% ( i50 ) ในสายพันธุ์ที่แตกต่างกัน / จำนวนที่คำนวณจากเส้นโค้งตอบสนองความเข้มข้น