As shown in Table 2, medium supplemented with 2 mg/L NAA + 2 mg/L TDZ + 5% sucrose (w/v), induced somatic embryogenesis on the leaf explants within 4 weeks, and the other explants (stem and corm) had shown a later response, showing the somatic embryogenesis induction after 8 weeks of culture It was observed that callus initiated from a leaf explant in the presence of 2 mg/L NAA+ 2 mg/L TDZ formed somatic embryos earlier than other explants (stem and corm) in the MS medium. Among the four media tested, the MS medium was the best (frequency of embryo formation is 46.6%) for somatic embryo regeneration, followed by the CHE’ medium (with frequency 43.3%). The crocus species had shown positive and early somatic embryogenesis in terms of mean frequencies of leaf explants developing into embryos (46.6%)
followed by the corm explants (36.6%) in the presence of the MS medium. The average number of somatic embryos formed per leaf explant was 2.9 embryos while per corm explant only 1.8 embryos were formed. Somatic embryos were tightly packed and inseparable (Fig. 1b and e). Such somatic embryos were separated from initial explants and sub-cultured into a fresh medium (2 mg/L IAA + 2 mg/LTDZ + 100 mg/L ABA)for proliferation (Fig. 3b-e). In the present study, somatic embryos further developed and enlarged after the addition of an auxin into the medium. Successive cultures increased the number of embryos and the embryos further developed into cotyledonary stages (Fig. 3a-e). Interestingly, globular embryos (Figs.1 b and 3 a) were found to be predominant. Embryos were white or pale yellow in color, small and globular in shape appearing individually or in the form of clusters. The heart and torpedo developmental stages were not observed in the present study. Globular somatic embryos with the soft and shining surface (Fig. 3a) grew further to form somatic embryos with a notch that differentiated to form scutellum, coleoptiles, root and shoot pole (i.e., cotyledonary stage of embryos) (Fig. 3a-e). We observed that the embryos grew up to the cotyledonary stage (maturation) in the same medium. Cotyledons, which initially appeared white in color, turned green and underwent germination (Fig. 3a, f). These regenerated embryos gradually formed shoots and roots, after further four weeks culture in the same media. Later, plantletformation was achieved after culturing in half-strength MS medium containing no plant growth regulators, for six weeks (Fig. 3f)
ดังแสดงในตารางที่ 2 , อาหารสูตร MS ที่เสริมด้วย NAA 2 มิลลิกรัมต่อลิตร + 2 มก. / ล. ร่วมกับ TDZ + 5% ( w / v ) และเซลล์เพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อภายใน 4 สัปดาห์ ในใบและเนื้อเยื่ออื่น ๆ ( ก้านและหัว ) ได้แสดงการตอบสนองในภายหลัง แสดงการเพาะเลี้ยงเซลล์หลังจาก 8 สัปดาห์ วัฒนธรรมพบว่าแคลลัสที่เริ่มจากใบต่อต่อหน้า 2 มิลลิกรัมต่อลิตร NAA 2 มิลลิกรัมต่อลิตร + ยอดเกิดโซมาติกเอ็มบริโอเร็วกว่าอาหารอื่น ๆ ( ก้านและหัว ) ใน MS . ระหว่างสี่สื่อการทดสอบ , MS เป็นดีที่สุด ( ความถี่ของการเกิดตัวอ่อน X% ) สำหรับเซลล์ตัวอ่อนงอก , ตามด้วยชาขนาดกลาง ( มีความถี่ 43.3 % ) ชนิด Crocus เป็นบวกและการเกิดโซมาติกเอ็มบริโอในแง่ของหมายถึงความถี่ของใบ เลี้ยงพัฒนาเป็นเอ็มบริโอ ( 46.6 % )ตามด้วยหัวอาหาร ( 36.6% ) ในการแสดงตนของ MS . อัตราเฉลี่ยของโซมาติกเอ็มบริโอที่เกิดขึ้นต่อชิ้นส่วนพืชใบอ่อนในขณะที่ต่อหัวต่อเหลือเพียง 1.8 ตัวถูกสร้างขึ้น โซมาติกเอ็มบริโอได้แน่นและแยกออกไม่ได้ ( รูปที่ 1A และ E ) โซมาติกเอ็มบริโอนั้นแยกจากเนื้อเยื่อเพาะเลี้ยงเป็นครั้งแรก และ ซับ กลางสด ( 2 มิลลิกรัมต่อลิตร IAA + 2 มก. / ltdz + 100 mg / l ( รูป 2 ) สำหรับการ 3b-e ) ในการศึกษาโซมาติกเอ็มบริโอพัฒนาต่อไปและขยายหลังจากเติมของออกซินในระดับปานกลาง วัฒนธรรมต่อเนื่องเพิ่มจำนวนตัวอ่อนและตัวอ่อนพัฒนาต่อไปเป็นขั้นตอน cotyledonary ( รูปที่ 3a-e ) อย่างน่าสนใจ , ทรงกลมตัว ( มะเดื่อ 1 บี และ 3 ) พบว่ามีเด่น ตัวมีสีขาวหรือเหลืองอ่อน สี ขนาดเล็ก และเป็นรูปทรงกลมในรูปร่างที่ปรากฏเป็นรายบุคคลหรือในรูปแบบของคลัสเตอร์ หัวใจและตอร์ปิโดขั้นตอนการพัฒนาไม่พบในการศึกษาปัจจุบัน เป็นรูปทรงกลมโซมาติกเอ็มบริโอกับผิวนุ่มและส่องแสง ( รูปที่ 3A ) ขยายตัวต่อไปในรูปแบบความสัมพันธ์ที่แตกต่างกับตัวอ่อนเป็นรอยเว้ารูป scutellum coleoptiles , รากและยอดเสา ( เช่น cotyledonary ระยะตัวอ่อน ) ( รูปที่ 3a-e ) เราพบว่าตัวอ่อนเติบโตขึ้นเวที cotyledonary ( Maturation ) อยู่ในระดับเดียวกัน การแสดงออกซึ่งเริ่มปรากฏสีขาวเปลี่ยนเป็นสีเขียวรับงอก ( รูปที่ 3A , F ) เหล่านี้ที่ได้ตัวอ่อนค่อยๆเกิดยอดและราก หลังจากที่อีกสี่สัปดาห์วัฒนธรรมในสื่อเดียวกัน ต่อมา plantletformation สําเร็จ หลังจากเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีความแข็งแรงครึ่ง MS ไม่มีสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืช , สำหรับหกสัปดาห์ ( รูปที่ขา )
การแปล กรุณารอสักครู่..
