The optimal concentration of antibo

The optimal concentration of antibody was determined by titrating aliquots of diluted IgG with colloidal gold.
The purified IgG was diluted to a concentration of 0.1 mg/ml in sodium phosphate buffer (1 mM, pH 7.0).
Ten aliquots of variable concentrations 0.01-0.1 mg/ml of the diluted IgG were prepared in 0.2 ml sodium phosphate buffer.
After incubating the mixture for 10 min, 0.1 ml of 10% NaCl was added to the tubes and the absorbance was measured at 520 nm.
The least amount of protein required to stabilize the colloidal gold was identified from the abscissa in the curve drawn from the concentration and the absorbance.
Aliquot of purified IgG (0.1 mg/ml) was added drop-wise to l00 ml of colloidal-gold solution (pH 8.0) followed by the addition of 10 ml of filtered 10% bovine serum albumin (BSA), pH 8.0 with gentle stirring for 20-25 min.The solution was incubated for 10 min at 25°C and centrifuged at 15,000 g for 30 min at 4°C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความเข้มข้นสูงสุดของแอนติบอดีที่ถูกกำหนด โดย aliquots titrating ของ IgG แตกออกกับ colloidal goldIgG บริสุทธิ์ถูกผสมให้เข้มข้น 0.1 mg/ml ในโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (1 มม. pH 7.0) Aliquots สิบของตัวแปรความเข้มข้น 0.01-0.1 mg/ml ของ IgG แตกออกได้เตรียมไว้ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟตโซเดียม 0.2 ml หลังจาก incubating ส่วนผสมสำหรับ 10 นาที 0.1 ml 10% NaCl ถูกเพิ่มลงในท่อ และถูกวัด absorbance ที่ 520 nm ระบุโปรตีนที่จำเป็นเพื่อรักษาเสถียรภาพ colloidal ทองน้อยจาก abscissa ในเส้นโค้งที่ลากจากความเข้มข้นและ absorbance ที่ มีเพิ่มส่วนลงตัวของ IgG บริสุทธิ์ (0.1 mg/ml) drop-wise เพื่อ l00 ml ของโซลูชัน colloidal gold (pH 8.0) ตาม ด้วยการเพิ่ม 10 ml ของกรอง 10% วัว serum albumin (บีเอสเอ), pH 8.0 กับกวนเบา ๆ สำหรับ 20-25 นาที โซลูชั่น incubated สำหรับ 10 นาทีที่ 25° C และ centrifuged ที่ 15000 g ใน 30 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความเข้มข้นที่เหมาะสมของแอนติบอดีที่ถูกกำหนดโดยวิเคราะห์การ aliquots ของ IgG เจือจางด้วยทองคอลลอยด์.
IgG บริสุทธิ์จะถูกเจือจางความเข้มข้น 0.1 mg / ml ในบัฟเฟอร์โซเดียมฟอสเฟต (1 มิลลิค่า pH 7.0).
สิบ aliquots ความเข้มข้นของตัวแปร 0.01-0.1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร IgG ปรับลดได้จัดทำขึ้น 0.2 มล. โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์.
หลังจากฟักผสมเป็นเวลา 10 นาที, 0.1 มล. 10% โซเดียมคลอไรด์ถูกบันทึกอยู่ในท่อและการดูดกลืนแสงที่ถูกวัดที่ 520 นาโนเมตร.
จำนวนเงินที่น้อยที่สุดของโปรตีนที่จำเป็น เพื่อรักษาเสถียรภาพทองคอลลอยด์ถูกระบุจากพิกัดในโค้งมาจากความเข้มข้นและการดูดกลืนแสงที่.
aliquot ของ IgG บริสุทธิ์ (0.1 mg / ml) ถูกบันทึกหล่นฉลาดที่จะ l00 มล. ของการแก้ปัญหาคอลลอยด์ทอง (pH 8.0) ตามด้วย นอกเหนือจาก 10 มิลลิลิตรกรอง 10% ซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) ค่า pH 8.0 กับกวนอ่อนโยน 20-25 แก้ปัญหา min.The ถูกบ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่ 25 ° C และหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความเข้มข้นที่เหมาะสมของแอนติบอดีที่กำหนดโดย titrating เฉยๆเมื่อ IgG ที่มี Colloidal Gold .
และ IgG เจือจางในความเข้มข้น 0.1 มก. / มล. ( 1 มิลลิเมตรในฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 7.0 ) .
10 เฉยๆแปรความเข้มข้น 0.01-0.1 mg / ml ของ IgG ใน 0.2 มล. เจือจางเตรียมสารละลายโซเดียมฟอสเฟต บัฟเฟอร์
หลังจากไข่ผสมเป็นเวลา 10 นาที 01 มิลลิลิตร เติมเกลือร้อยละ 10 หลอด และทำการวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 520 nm .
จำนวนน้อยที่สุดของโปรตีนต้องทรงตัวทองคอลลอยด์ถูกระบุจาก อักษรในโค้งที่วาดจากความเข้มข้นและค่า .
ส่วนลงตัวของ IgG บริสุทธิ์ ( 0.1 มก. / มล. ) เพิ่ม 100 มิลลิลิตรของสารละลายลดลง ปัญญาทองคอลลอยด์ ( pH 80 ) ตามด้วยนอกเหนือจาก 10 มิลลิลิตร กรอง 10% เซรั่มอัลบูมิวัว ( BSA ) pH 8.0 กับอ่อนโยนกวน 20-25 นาที สารละลายที่บ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่ 25 ° C และที่ระดับ 11 , 000 G สำหรับ 30 นาทีที่ 4 ° C .