Frozen lettuce stem discs (about 0.

Frozen lettuce stem discs (about 0.2 g) were pulverized in liquid nitrogen. Total RNA was extracted and purified with plant RNA Extraction Kit (Invitrogen, CA, USA) according to the manufacturer's instructions. Total RNA (300 ng) was reverse-transcribed to cDNA using iScript Reverse Transcription Supermix (Bio-Rad, CA, USA). Gene-specific primers were designed according to two Romaine lettuce PAL genes in Genbank (PAL-1, AF299330; and PAL-2, AF411134). Ubiquitin was used as an internal control. The forward and reverse primer sequences were as follows: PAL1, TTAGTCGCTCTATGCCAATCCA/AGCGAAGACGTATTCACGATCA; PAL2, CCCACCGGAGAAGTTCTAAATG/ACTTCCGACAACAATGCAAGAA, and Ubiquitin (Ubi), AAGACCTACACCAAGCCCAA-3/AAGTGAGCCCCA-
CACTTACCA-30 . qPCR was performed with a GoTaq qPCR master Mix
(Promega, WI, USA). PCR conditions were set as follows: 95 C for
4 s, 60 C for 25 s and 72 C for 5 s by 45 cycles.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผักกาดแช่ก้านดิสก์ (ประมาณ 0.2 g) ถูกคลุกในไนโตรเจนเหลว อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัด และ purified กับพืชชุดสกัดอาร์เอ็นเอ (Invitrogen, CA, USA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต รวมอาร์เอ็นเอ (300 ng) ถูกทับศัพท์กลับกับ cDNA ใช้ iScript ย้อน Supermix Transcription (Bio Rad, CA, USA) ไพรเมอร์ของยีน specific ถูกออกแบบมาตามสองยีน PAL ผักกาดหอมสดกรอบใน Genbank (PAL-1, AF299330 และ PAL-2, AF411134) Ubiquitin ถูกใช้เป็นตัวควบคุมภายใน ลำดับรองพื้นไปข้างหน้า และย้อนกลับมีดังนี้: PAL1, TTAGTCGCTCTATGCCAATCCA/AGCGAAGACGTATTCACGATCA PAL2, CCCACCGGAGAAGTTCTAAATG/ACTTCCGACAACAATGCAAGAA และ Ubiquitin (Ubi), AAGACCTACACCAAGCCCAA-3/AAGTGAGCCCCA-CACTTACCA-30 qPCR ทำกับต้น qPCR แบบ GoTaq ผสม(Promega, WI สหรัฐอเมริกา) PCR เงื่อนไขถูกกำหนดเป็นดังนี้: C 95 ใน4 s, 60 C 25 s และ C 72 สำหรับ 5 s โดยรอบ 45

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แผ่นก้านผักกาดหอมแช่แข็ง (ประมาณ 0.2 กรัม) ถูกแหลกลาญในไนโตรเจนเหลว รวม RNA ถูกสกัดและ Puri เอ็ดไฟกับโรงงานสกัด RNA Kit (Invitrogen, CA, USA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต รวมอาร์เอ็นเอ (300 นาโนกรัม) ย้อนกลับได้รับการถ่ายทอดยีนที่จะใช้ iScript ย้อนกลับถอดความ SUPERMIX (Bio-Rad, CA, USA) ไฟยีน speci ไพรเมอร์คได้รับการออกแบบตามสอง Romaine ยีนผักกาดหอมใน Genbank PAL (PAL-1 AF299330 และ PAL-2, AF411134) ubiquitin ถูกนำมาใช้เป็นระบบการควบคุมภายใน ไปข้างหน้าและย้อนกลับลำดับไพรเมอร์มีดังนี้ PAL1, TTAGTCGCTCTATGCCAATCCA / AGCGAAGACGTATTCACGATCA; PAL2, CCCACCGGAGAAGTTCTAAATG / ACTTCCGACAACAATGCAAGAA และ Ubiquitin (Ubi) AAGACCTACACCAAGCCCAA-3 / AAGTGAGCCCCA-
CACTTACCA-30 qPCR ได้รับการดำเนินการกับ GoTaq qPCR ต้นแบบผสม
(Promega, WI, สหรัฐอเมริกา) เงื่อนไข PCR ถูกกำหนดดังต่อไปนี้ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
4 วินาที, 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 25 และ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วินาที 45 รอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ก้านแผ่นแช่แข็งผักกาดหอม ( ประมาณ 0.2 กรัม ) ถูกบดในไนโตรเจนเหลว อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดและปุริจึงเอ็ดกับชุดการสกัด DNA พืช ( Invitrogen , CA , USA ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต อาร์เอ็นเอทั้งหมด ( 300 กรัม ) คือ ย้อนกลับ และใช้วิธี reverse transcription iscript supermix ( ไบโอ ราด , CA , USA )ยีน speci จึง C โดยออกแบบตามสองผักกาดหอม ผักกาดหอม ( pal-1 ยีน PAL ขนาด af299330 และ af411134 pal-2 , ; , ) ข้างนอกก็ใช้เป็นระบบควบคุมภายใน ไปข้างหน้าและย้อนกลับลำดับดังนี้ pal1 รองพื้น , pal2 cccaccggagaagttctaaatg ttagtcgctctatgccaatcca / agcgaagacgtattcacgatca ; , / acttccgacaacaatgcaagaa และข้างนอก ( UBI ) aagacctacaccaagcccaa-3 / aagtgagcccca -
cacttacca-30 . qpcr แสดงกับ gotaq qpcr Master Mix
( promega , WI , USA ) เงื่อนไขทั้งหมดจะถูกตั้งค่าเป็นดังนี้ : 95 C
4 s 60 C 25 และ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วินาที โดย













45 รอบ