3. Result and discussion3.1. Purifi

3. Result and discussion
3.1. Purification of amylase from pitaya peel
A single protein with amylase activity was purified from red
pitaya peel using ammonium sulphate precipitation, gel filtration
chromatography with a Sephadex G-200 and ion exchange chromatography
with a DEAE-Sephadex column. Table 1 summarises the
purification of amylase from pitaya peel. The crude extract was
precipitated with ammonium sulphate (0–20%, 20–40%, 40–60%
and 60–80% saturation). The results indicated that 40–60% saturation
achieved the highest purification fold of 8.4 and a yield of
88.7% among the other concentrations of ammonium sulphate. An
ammonium sulphate fraction of 40–60% was then loaded onto the
affinity chromatography column (Sephadex G-200). The enzyme
was eluted from the column with a salt concentration of 1 M NaCl.
After elution, amylase activity and proteins were found in one
peak (Fig. 1a). Amylase from pitaya peel was purified more than
102.5-fold with 75.3% yield, and its specific activity equalled
1455.5 U/mg proteins (Table 1). The active fractions of obtained
from the above step were subsequently separated using DEAESephadex
ion exchange chromatography (Fig. 1b). After this step,
the amylase was purified 234.2-fold with a recovery of 72.1% and
a specific activity of 3325.6 U/mg of protein (Table 1). The gel filtration
chromatography technique and ion exchange chromatography
used in this study has also been used successfully for amylases purified
from Vigna mungo cotyledons, Arabidopsis thaliana leaves, corms
of Colocasia, millet of malt, and roots and cotyledons of Pisum
sativum. These results are in accordance with similar purification

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผล และการสนทนา3.1 การทำให้บริสุทธิ์ของ amylase จากเปลือก pitayaโปรตีนเดียวกับกิจกรรม amylase ที่บริสุทธิ์จากแดงใช้แอมโมเนียมซัลเฟตฝน เจลอาบน้ำเปลือก pitayachromatography กับ chromatography Sephadex G 200 และแลกเปลี่ยนไอออนมีคอลัมน์ DEAE Sephadex ตารางที่ 1 summarises การทำให้บริสุทธิ์ของ amylase จากเปลือก pitaya มีสารสกัดจากน้ำมันตกตะกอน ด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต (0-20, 20-40%, 40-60%กความเข้ม 60 – 80%) ผลระบุว่า เข้ม 40 – 60%รับพับฟอกสูงสุดของ 8.4 และผลผลิตของ88.7% ในความเข้มข้นอื่น ๆ ของแอมโมเนียมซัลเฟต มีแอมโมเนียมซัลเฟตเศษของ 40-60% แล้วถูกโหลดไปความสัมพันธ์ chromatography คอลัมน์ (Sephadex G-200) เอนไซม์นี้มี eluted จากคอลัมน์ที่มีความเข้มข้นเกลือของ 1 M NaClหลังจาก elution กิจกรรม amylase และโปรตีนพบในพีค (Fig. 1a) Amylase จากเปลือก pitaya ที่บริสุทธิ์มากกว่า102.5-fold 75.3% ผลตอบแทน และกิจกรรมเฉพาะของ equalled1455.5 U/มิลลิกรัม โปรตีน (ตาราง 1) ส่วนงานของได้จากขั้นตอนข้างต้นได้มาแยกโดยใช้ DEAESephadexแลกเปลี่ยนไอออน chromatography (Fig. 1b) หลังจากขั้นตอนนี้amylase ไม่บริสุทธิ์ที่ 234.2-fold กับ 72.1% ฟื้นตัว และกิจกรรมเฉพาะของ U 3325.6 มิลลิกรัมโปรตีน (ตาราง 1) น้ำเจลchromatography chromatography เทคนิคและแลกเปลี่ยนไอออนใช้ในการศึกษายังถูกใช้เสร็จเรียบร้อยสำหรับ amylases บริสุทธิ์จาก Vigna ชาติมังโก้ cotyledons, Arabidopsis thaliana ใบ cormsของ Colocasia ฟ่างข้าว มอลต์ และรากและ cotyledons Pisumsativum ผลลัพธ์เหล่านี้จะตามฟอกเหมือนกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลและการอภิปราย
3.1 การทำให้บริสุทธิ์ของอะไมเลสจากแก้วมังกรเปลือก
โปรตีนเดียวกับกิจกรรมอะไมเลสบริสุทธิ์จากสีแดง
เปลือกแก้วมังกรโดยใช้แอมโมเนียมซัลเฟตตกตะกอนเจลกรอง
โคกับเอนไซม์ G-200 และการแลกเปลี่ยนไอออนโครมา
กับคอลัมน์ DEAE-เอนไซม์ ตารางที่ 1 สรุป
การทำให้บริสุทธิ์ของอะไมเลสจากเปลือกแก้วมังกร สารสกัดหยาบ
ตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต (0-20%, 20-40%, 40-60%
และ 60-80% อิ่มตัว) ผลการศึกษาพบว่า 40-60% อิ่มตัว
ประสบความสำเร็จเท่าบริสุทธิ์สูงสุดของ 8.4 และผลผลิตของ
88.7% ในกลุ่มอื่น ๆ ของความเข้มข้นของแอมโมเนียมซัลเฟต
ส่วนแอมโมเนียมซัลเฟต 40-60% ถูกโหลดแล้วลงใน
คอลัมน์โครมาเป็นพี่น้องกัน (เอนไซม์ G-200) เอนไซม์
ถูกชะจากคอลัมน์ที่มีความเข้มข้นเกลือ 1 M NaCl
หลังจากชะกิจกรรมอะไมเลสและโปรตีนที่พบใน
จุดสูงสุด (รูปที่ 1a.) อะไมเลสจากเปลือกแก้วมังกรบริสุทธิ์มากกว่า
102.5 เท่าและมีอัตรา 75.3% และกิจกรรมเฉพาะของตนเท่ากับ
1,455.5 U โปรตีน / มิลลิกรัม (ตารางที่ 1) ส่วนที่ใช้งานของที่ได้รับ
จากขั้นตอนดังกล่าวข้างต้นก็ถูกแยกออกโดยใช้ DEAESephadex
แลกเปลี่ยนไอออนโครมา (รูปที่ 1 ข.) หลังจากขั้นตอนนี้
อะไมเลสบริสุทธิ์ 234.2 เท่าที่มีการกู้คืนของ 72.1% และ
กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ 3,325.6 U / มิลลิกรัมโปรตีน (ตารางที่ 1) กรองเจล
เทคนิคโครมาและการแลกเปลี่ยนไอออนโครมา
ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ยังได้รับการใช้ประสบความสำเร็จสำหรับอะมัยเลสบริสุทธิ์
จาก Vigna mungo ใบเลี้ยงใบ Arabidopsis thaliana เหง้า
ของ Colocasia, ข้าวฟ่างของมอลต์และรากและใบเลี้ยงของ pisum
sativum ผลลัพธ์เหล่านี้เป็นไปตามการทำให้บริสุทธิ์ที่คล้ายกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 ผลและการอภิปราย
3.1 . บริสุทธิ์ของเอนไซม์อะไมเลสจากเปลือกแก้วมังกร
โปรตีนเดี่ยวกับกิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสคือบริสุทธิ์จากเปลือกแก้วมังกรแดง
ใช้แอมโมเนียมซัลเฟตตกตะกอน gel filtration chromatography ด้วย Sephadex G-200

และการแลกเปลี่ยนไอออน chromatography ด้วย DEAE Sephadex คอลัมน์ ตารางที่ 1 summarises
บริสุทธิ์ของเอนไซม์อะไมเลสจากเปลือกแก้วมังกร . สกัดเป็น
ตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต ( 0 - 20 % 20 – 40 % 40 – 60 %
และ 60 – 80 เปอร์เซ็นต์ความอิ่มตัว ) ผลการวิจัยพบว่า ความเข้ม 40 – 60 %
ความบริสุทธิ์สูงสุดเท่า 8.4 และผลผลิต
88.7 % ของส่วนอื่น ๆของแอมโมเนียมซัลเฟต เป็น
แอมโมเนียมซัลเฟตสัดส่วน 40 – 60 % แล้วโหลดลงบน
affinity คอลัมน์โครมาโตกราฟฟี ( Sephadex G-200 ) เอนไซม์
มีตัวอย่างจากคอลัมน์ที่มีความเข้มข้นของเกลือ NaCl 1 M .
หลังจากใช้กิจกรรมเอนไซม์อะไมเลสและโปรตีนที่พบในช่วงหนึ่ง
( รูปที่ 1A ) อะไมเลสจากเปลือกแก้วมังกรบริสุทธิ์มากกว่า
102.5-fold ที่มีผลผลิต 75.3 เปอร์เซ็นต์และกิจกรรมของโปรตีนที่เฉพาะเจาะจงนี้
1455.5 U / mg ( ตารางที่ 1 ) เศษส่วนของการใช้งานที่ได้จากขั้นตอนข้างต้นแล้ว

deaesephadex แยกโดยใช้การแลกเปลี่ยนไอออน chromatography ( รูปที่ 1A ) หลังจากขั้นตอนนี้
แป้งบริสุทธิ์ 234.2-fold กับการฟื้นตัวของ 72.1 %
เป็นกิจกรรมเฉพาะของ 3325.6 U / mg โปรตีน ( ตารางที่ 1 ) ใช้น้ำสารแลกเปลี่ยนไอออนโครมาโทกราฟีและเทคนิค

ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ ยังถูกใช้เรียบร้อยแล้ว สำหรับกลุ่ม พันธมิตรประชาชนเพื่อประชาธิปไตย
จากถั่วดำการแสดงออกบริสุทธิ์ , Arabidopsis thaliana ใบเหง้า
ของโคโลแคเซีย ที่รอบอยู่ ข้าวฟ่าง มอลต์ และราก และการแสดงออกของ pisum
sativum . ผลลัพธ์เหล่านี้สอดคล้องกับบริสุทธิ์คล้าย