4. Discussion
Different strategies based on the induction of specific defense
responses were previously described to introduce canker disease
resistance into citrus plants. Thus, constitutive expression of a
PthA truncated protein from X. axonopodis pv. citri in orange plants
resulted in the interference of normal Xanthomonas infection
(Yang et al., 2010). More recently, canker disease attenuation in
sweet orange plants has been reported by transformation with a
spermidine synthase sequence to induce increased accumulation
of intracellular H2O2 (Fu et al., 2011). Although these strategies
confer partial resistance to canker disease, they might also represent
potential limitations. In the first case, resistance depends
mainly on altering a specific host–pathogen interaction that
could be overcome by appearance of resistant bacterial strains.
On the second, it involves a mechanism that triggers multiple
plant responses, with the potential risk of negative effects on
the physiology and agronomic performance. In contrast, a more
promising approach combining broad-spectrum activity and
efficient antibacterial mechanisms makes use of the genetic transformation
with antimicrobial peptide sequences. Such approach
has been successfully implemented in different plant species
(Osusky et al., 2005; Rivero et al., 2012). Previous work in this
direction has been already reported in citrus species by constitutive
expression of an attacin A peptide from T. ni (Boscariol et al., 2006)
in C. sinensis plants. In this work, a symptom reduction of up to 40%
was determined in infection assays performed with X. axonopodis
pv. citri, as deduced from lesion area measurements of infected
leaves.
Based on this background, and on our own results with
dermaseptin-expressing potato plants (Rivero et al., 2012), we
decided to evaluate the effect of dermaseptin against Xanthomonas
spp. As compared with other lytic peptides, dermaseptin exhibits
high antibacterial and antifungal activity at micromolar levels and
is not significantly toxic to humans (Amiche and Galanth, 2011;
Kastin, 2006; Mor et al., 1994). Since its activity to Xanthomonas
had not been previously demonstrated, we carried out a series
of growth inhibition assays with X. axonopodis pv. citri and X.
campestris pv. campestris and showed that these species are susceptible
at relatively low concentrations of the lytic peptide.
On this basis, the pBIN19sgfp-Der construction, allowing constitutive
expression of dermaseptin, was generated. To assess the
functionality of pBIN19sgfp-Der, a series of co-infiltration assays
with X. axonopodis and A. tumefaciens carrying the genetic construction
were performed in N. benthamiana leaves. Results from
these assays showed considerable reduction of chlorotic symptoms
and suggested that dermaseptin was produced at effective
levels.
After sweet orange transformation, transgene integration was
evaluated by Southern blot analyses and mRNA expression was
confirmed by RT-PCR. No reliable protein measurements could
be performed by immunological tests because, despite repeated
attempts to obtain high-affinity antibodies, the lower dermaseptin
level detected by our antisera was around 1 ng.
Transgenic sweet orange plants challenged with X. axonopodis
pv. citri in controlled infection assays showed symptom reductions
of up to 50%, as measured by the frequency of canker-developing
wounds on total inoculated wounds. In addition, the smaller size
of cankers present in transgenic plants and the delay observed in
symptom development suggest a considerable decrease of disease
severity. Due to the lack of effective antibodies, no statistical correlations
could be obtained between dermaseptin accumulation and
resistance levels in the transgenic plants. Because growth inhibition
and leaf infection assays are essentially not comparable, the
minimum dermaseptin accumulation needed to confer in planta
resistance could not be inferred.
Taking into account the wide antimicrobial activity showed by
dermaseptin (Rivero et al., 2012), this peptide could be employed
to introduce resistance to other bacterial and fungal pathogens
affecting citrus. In this regard, it would be of interest to test
the susceptibility of dermaseptin-expressing plants to Candidatus
Liberibacter, the causal agent of Huanglongbing (HLB) disease
(Bové, 2006) and to Xylella fastidiosa, the causal agent of citrus
variegated chlorosis (CVC) disease (Hartung et al., 1994).
Since controlled infection assays cannot be directly extrapolated
to real agricultural conditions, the results obtained in this work
must be confirmed in greenhouse and field trial assays. If the reduction
in canker frequency can be reproduced in these conditions, the
strategy described in this work could advantageously be employed
to restrict Xanthomonas spreading and to improve the efficiency of
disease management.
Acknowledgements
N.F. and C.Z. were supported by Research Fellowships from the
National Research Council (CONICET). A.N.M., M.L.G., J.C. and K.K.
are Research Scientists of CONICET. We thank F. Bravo-Almonacid,
E. Segretin and E. Lentz, B. for their valuable technical assistance
and B.I. Canteros, G. Gudesblast and A.M. Romero for helpful discussion.
This work was partially supported by Grant PICT 32359
and PICT 1094 of the National Agency for Promotion of Science and
Technology (ANPCyT), Argentina.
4. สนทนา
กลยุทธ์แตกต่างกันตามการเหนี่ยวนำของป้องกันเฉพาะ
ตอบได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้จะแนะนำโรค canker
เป็นส้มพืชที่ต้านทาน ดังนั้น ขึ้นค่าของการ
PthA ตัดโปรตีนจากกำแพงแสน x. อัพ pv citri ในพืชส้ม
ให้รบกวนติดเชื้ออ้อยปกติ
(Yang et al., 2010) เมื่อเร็ว ๆ นี้ canker อ่อนโรคใน
พืชส้มหวานได้รายงาน โดยการแปลงกับการ
ลำดับ synthase spermidine ชวนสะสมเพิ่ม
ของ intracellular H2O2 (ฟู et al., 2011) แม้ว่ากลยุทธ์เหล่านี้
ประสาทบางส่วนความต้านทานโรค canker พวกเขายังอาจแสดงถึง
ข้อจำกัดที่อาจเกิดขึ้น ในกรณีแรก ความต้านทานขึ้นอยู่
หลักในการดัดแปลงการโต้ตอบเฉพาะโฮสต์ – ศึกษาที่
สามารถเอาชนะได้ โดยลักษณะของทนแบคทีเรียสายพันธุ์
ที่สอง เกี่ยวข้องกับกลไกที่ก่อให้เกิดหลาย
พืชตอบสนอง มีความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นกระทบบน
สรีรวิทยาและลักษณะทางประสิทธิภาพได้ ในทางตรงข้าม อื่น ๆ
สัญญาเข้ารวมกิจกรรม broad-spectrum และ
กลไกมีประสิทธิภาพต้านเชื้อแบคทีเรียทำให้ใช้การแปลงพันธุกรรม
กับลำดับของเพปไทด์ต้านจุลชีพ วิธีเช่น
เรียบร้อยใช้งานได้ในชนิดพืชที่แตกต่างกัน
(Osusky et al., 2005 Rivero et al., 2012) งานก่อนหน้านี้
ทิศทางได้แล้วรายงานในส้มพันธุ์ โดยขึ้น
ของ attacin เป็นเพปไทด์จากต. ni (Boscariol และ al., 2006)
ใน C. sinensis พืช ในงานนี้ ลดอาการถึง 40%
กำหนดใน assays เชื้อทำ ด้วยกำแพงแสน x. อัพ
pv citri เป็น deduced จากวัดบริเวณรอยโรคของการติดเชื้อ
ใบไม้.
ตามพื้นหลังนี้ และ ตามผลของเราเอง
แสดง dermaseptin มันฝรั่งพืช (Rivero et al., 2012), เรา
ตัดสินใจประเมินผลของ dermaseptin ต่ออ้อย
เบียส เมื่อเทียบกับเปปไทด์ lytic อื่น ๆ dermaseptin จัดแสดง
กิจกรรมการต้านเชื้อแบคทีเรีย และต้านเชื้อราที่สูงระดับ micromolar และ
ไม่เป็นพิษกับมนุษย์อย่างมาก (Amiche และ Galanth, 2011;
Kastin, 2006 สมอ et al., 1994) ตั้งแต่กิจกรรมของอ้อย
ได้ไม่ถูกก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า เราทำชุด
ของ assays ยับยั้งการเจริญเติบโตด้วยกำแพงแสน x. อัพ pv citri และ X
campestris pv campestris และแสดงให้เห็นว่า สปีชีส์เหล่านี้มีความไวต่อ
ที่ความเข้มข้นค่อนข้างต่ำของ lytic เพปไทด์
ตามนี้ ก่อสร้าง pBIN19sgfp Der ให้ขึ้น
สร้างนิพจน์ของ dermaseptin เพื่อประเมินการ
ฟังก์ชัน pBIN19sgfp Der ชุดแทรกซึมร่วม assays
x. อัพกำแพงแสนและ A. tumefaciens ดำเนินการก่อสร้างทางพันธุกรรม
ได้ดำเนินการใน benthamiana ตอนเหนือใบ ผลจาก
assays เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการลดอาการปากมาก
และแนะนำ dermaseptin นั้นถูกผลิตที่มีประสิทธิภาพ
ระดับ
หลังแปลงส้มหวาน รวม transgene ได้
ประเมินนิพจน์ได้คืนในตาภาคใต้วิเคราะห์และ mRNA
ยืนยัน โดย RT-PCR วัดโปรตีนเชื่อถือไม่ได้
สามารถทำ โดยการทดสอบภูมิคุ้มกันเนื่องจาก ซ้ำทั้ง ๆ ที่
พยายามรับแอนตี้ความสัมพันธ์สูง dermaseptin ล่าง
ระดับที่ตรวจพบ โดย antisera เราได้ประมาณ 1 ng.
ถั่วเหลืองหวานส้มพืชท้าทายกับกำแพงแสน x. อัพ
pv citri ใน assays ควบคุมการติดเชื้อพบว่าลดอาการ
ถึง 50% วัดจากความถี่ของการพัฒนา canker
แผลบนแผลรวม inoculated นอกจากนี้ ขนาด
ของ cankers อยู่ในพืชถั่วเหลืองและความล่าช้าที่สังเกตใน
พัฒนาอาการแนะนำการลดลงมากของโรค
ความรุนแรง เนื่องจากมีแอนตี้มีประสิทธิภาพ ไม่มีความสัมพันธ์ทางสถิติ
สามารถดึงระหว่าง dermaseptin สะสม และ
ระดับพืชถั่วเหลืองต้านทานได้ เนื่องจากยับยั้งการเจริญเติบโต
และใบไม้ติดเชื้อ assays เป็นหลักไม่เทียบเท่า
สะสม dermaseptin ขั้นต่ำต้องประสาทในลเวียมานอร์
ไม่สรุปความต้านทานการ
คำนึงถึงกิจกรรมจุลินทรีย์กว้างแสดงให้เห็นโดย
dermaseptin (Rivero et al., 2012), เพปไทด์นี้สามารถทำงาน
แนะนำความต้านทานต่อโรคเชื้อรา และแบคทีเรียอื่น ๆ
ผลส้มได้ ในเรื่องนี้ มันจะน่าสนใจเพื่อทดสอบ
ไก่พืช dermaseptin แสดงการ Candidatus
Liberibacter ตัวแทนสาเหตุของโรค Huanglongbing (HLB)
(Bové, 2006) และ Xylella fastidiosa ตัวแทนสาเหตุของส้ม
variegated โรค chlorosis (CVC) (Hartung et al., 1994)
ตั้งแต่ติดเชื้อควบคุม assays ไม่ต้อง extrapolated โดยตรง
เงื่อนไขจริงเกษตร ผลลัพธ์ที่ได้ในงานนี้
ต้องยืนยันใน assays เรือนกระจกและทดลองใช้ฟิลด์ ถ้าการลด
ใน canker ความถี่สามารถจะทำซ้ำในเงื่อนไขเหล่านี้
เชิญจะจ้างกลยุทธ์ในงานนี้
เพื่อจำกัดการแพร่กระจายของอ้อย และปรับปรุงประสิทธิภาพของ
จัดการโรคได้
ถาม-ตอบ
N. F และ C.Z. ได้สนับสนุนทุนวิจัยจาก
สภาวิจัยแห่งชาติ (CONICET) A.N.M., M.L.G., J.C. และ K.K.
are นักวิทยาศาสตร์วิจัยของ CONICET เราขอขอบคุณบรา-Almonacid F.,
E. Segretin และ E. Lentz, B. สำหรับความช่วยเหลือทางเทคนิคของพวกเขามีคุณค่า
และ B.I. Canteros, Gudesblast กรัม และ Romero น.สำหรับประโยชน์สนทนา
งานนี้บางส่วนได้รับการสนับสนุน โดยเงินช่วยเหลือ PICT 32359
และ PICT 1094 สำนักแห่งชาติการส่งเสริมวิทยาศาสตร์ และ
เทคโนโลยี (ANPCyT) อาร์เจนติน่า
การแปล กรุณารอสักครู่..
4 เรื่อง
ที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับกลยุทธ์การเหนี่ยวนำของการป้องกันโดยเฉพาะ
การตอบสนองได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ที่จะแนะนำโรคแคงเกอร์
ต้านทานเป็นพืชที่มีรสเปรี้ยว ดังนั้นการแสดงออกที่เป็นส่วนประกอบของ
โปรตีนที่ถูกตัดทอนจาก PthA เอ็กซ์ axonopodis pv citri ในพืชสีส้ม
มีผลในการรบกวนของการติดเชื้อ Xanthomonas ปกติ
(ยาง et al., 2010) เมื่อเร็ว ๆ นี้เปื่อยลดทอนการเกิดโรคใน
พืชสีส้มหวานได้รับรายงานจากการเปลี่ยนแปลงที่มี
ลำดับเปอร์มิเทสเพื่อก่อให้เกิดการสะสมเพิ่มขึ้น
ของ H2O2 ในเซลล์ (Fu et al., 2011) แม้ว่ากลยุทธ์เหล่านี้
หารือบางส่วนเพื่อความต้านทานโรคแคงเกอร์พวกเขายังอาจเป็น
ข้อ จำกัด ที่อาจเกิดขึ้น ในกรณีแรกที่ความต้านทานขึ้นอยู่
ส่วนใหญ่เกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงการทำงานร่วมกันเป็นเจ้าภาพการติดเชื้อเฉพาะที่
สามารถเอาชนะด้วยการปรากฏตัวของแบคทีเรียทน
ที่สองก็เกี่ยวข้องกับกลไกที่เรียกหลาย
การตอบสนองของพืชที่มีความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นจากผลกระทบทางลบต่อ
สรีรวิทยาและประสิทธิภาพการทำงานทางการเกษตร ในทางตรงกันข้ามการเพิ่มเติม
วิธีการที่มีแนวโน้มการรวมกิจกรรมในวงกว้างสเปกตรัมและ
กลไกการต้านเชื้อแบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพทำให้การใช้งานของการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม
ที่มีลำดับเปปไทด์ต้านจุลชีพ วิธีการดังกล่าว
ได้รับการดำเนินการประสบความสำเร็จในสายพันธุ์พืชที่แตกต่างกัน
(Osusky et al, 2005.. ริเวโรและคณะ, 2012) การทำงานก่อนหน้านี้ใน
ทิศทางที่ได้รับรายงานแล้วในส้มสายพันธุ์ที่เป็นส่วนประกอบโดย
การแสดงออกของเปปไทด์จาก attacin ตพรรณี (Boscariol et al., 2006)
ในซีพืชเนซิส ในงานนี้ลดอาการของได้ถึง 40%
ได้รับการพิจารณาในการตรวจการติดเชื้อดำเนินการกับเอ็กซ์ axonopodis
pv citri เป็นอนุมานได้จากการวัดพื้นที่ที่ติดเชื้อของแผล
ใบ
ตามพื้นหลังนี้และผลของเราเองด้วย
พืชมันฝรั่ง dermaseptin-แสดง (ริเว et al., 2012) เรา
ตัดสินใจที่จะประเมินผลกระทบของ dermaseptin กับ Xanthomonas
spp เมื่อเทียบกับเปปไทด์ lytic อื่น ๆ dermaseptin การจัดแสดงนิทรรศการ
ต้านเชื้อแบคทีเรียสูงและกิจกรรมต้านเชื้อราในระดับไมโครโมลและ
ไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญเป็นพิษต่อมนุษย์ (Amiche และ Galanth, 2011;
Kastin 2006. มและคณะ, 1994) ตั้งแต่กิจกรรมในการ Xanthomonas
ไม่ได้รับการแสดงให้เห็นถึงก่อนหน้านี้เราดำเนินการชุด
ของการตรวจการยับยั้งการเจริญเติบโตกับเอ็กซ์ axonopodis pv citri และ X.
campestris pv campestris และแสดงให้เห็นว่าสายพันธุ์เหล่านี้มีความอ่อนไหว
ที่ระดับความเข้มข้นที่ค่อนข้างต่ำของเปปไทด์ lytic
บนพื้นฐานนี้การก่อสร้าง pBIN19sgfp-ฟอนเดอร์ที่ช่วยให้การที่เป็นส่วนประกอบ
การแสดงออกของ dermaseptin ถูกสร้างขึ้น ในการประเมิน
การทำงานของ pBIN19sgfp-ฟอนเดอร์ชุดตรวจร่วมแทรกซึม
กับ axonopodis เอ็กซ์และ A. tumefaciens ดำเนินการก่อสร้างทางพันธุกรรม
ได้ดำเนินการในใบ benthamiana N. ผลลัพธ์ที่ได้จาก
การตรวจเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการลดลงมากของอาการซีด
และบอกว่า dermaseptin ได้รับการผลิตที่มีประสิทธิภาพ
ระดับ
หลังจากการเปลี่ยนแปลงสีส้มหวานบูรณาการของยีนได้รับการ
ประเมินโดย blot ใต้การวิเคราะห์และการแสดงออกได้รับการ
ยืนยันจาก RT-PCR ไม่มีการวัดโปรตีนที่เชื่อถือได้จะ
ได้รับการดำเนินการโดยการทดสอบภูมิคุ้มกันเพราะแม้จะซ้ำแล้วซ้ำอีก
ความพยายามที่จะได้รับภูมิต้านทานสูงความสัมพันธ์, dermaseptin ต่ำกว่า
ระดับที่ตรวจพบโดยฉีดของเราคือประมาณ 1 ศึกษา
พันธุ์พืชส้มหวานท้าทายด้วยเอ็กซ์ axonopodis
pv citri ในการควบคุมการตรวจการติดเชื้อว่ามีการลดอาการ
ของขึ้นถึง 50% เมื่อวัดจากความถี่ของการเปื่อยพัฒนา
แผลที่บาดแผลเชื้อทั้งหมด นอกจากนี้ขนาดที่เล็กกว่า
ของเข้าเฝือกอยู่ในพืชดัดแปรพันธุกรรมและความล่าช้าการปฏิบัติใน
การพัฒนาอาการแนะนำให้ลดลงมากของโรค
รุนแรง เนื่องจากขาดภูมิคุ้มกันที่มีประสิทธิภาพไม่มีความสัมพันธ์ที่สถิติที่
อาจจะได้รับระหว่าง dermaseptin สะสมและ
ต้านทานระดับในพืชดัดแปรพันธุกรรม เพราะการยับยั้งการเจริญเติบโต
และการติดเชื้อใบตรวจเป็นหลักไม่ได้เปรียบที่
ต่ำสุด dermaseptin สะสมจำเป็นเพื่อให้คำปรึกษาใน Planta
ต้านทานไม่สามารถสรุป
คำนึงถึงฤทธิ์ต้านจุลชีพกว้างแสดงให้เห็นโดย
dermaseptin (ริเว et al., 2012), เปปไทด์นี้อาจจะ การจ้างงาน
ที่จะแนะนำความต้านทานต่อเชื้อโรคแบคทีเรียและเชื้อราอื่น ๆ ที่
มีผลกระทบต่อส้ม ในเรื่องนี้ก็จะเป็นที่สนใจในการทดสอบ
ความไวของ dermaseptin-แสดงพืช candidatus
Liberibacter สาเหตุของ Huanglongbing (HLB) โรค
(Bové 2006) และ Xylella fastidiosa สาเหตุของส้ม
chlorosis แตกต่างกัน (CVC ) โรค (Hartung et al., 1994)
ตั้งแต่การควบคุมการตรวจการติดเชื้อไม่สามารถประเมินได้โดยตรง
กับสภาพการเกษตรจริงผลที่ได้รับในงานนี้
จะต้องได้รับการยืนยันในเรือนกระจกและข้อมูลการตรวจทดลอง หากการลด
ความถี่ในการเปื่อยสามารถทำซ้ำในเงื่อนไขเหล่านี้
กลยุทธ์ที่อธิบายไว้ในการทำงานนี้อาจเปรียบได้รับการว่าจ้าง
ในการ จำกัด การแพร่กระจายเชื้อ Xanthomonas และปรับปรุงประสิทธิภาพของ
การจัดการโรค
กิตติกรรมประกาศ
NF CZ และได้รับการสนับสนุนโดยการวิจัยทุนจาก
สภาวิจัยแห่งชาติ (CONICET) ANM, MLG, JC และ KK
เป็นนักวิทยาศาสตร์วิจัย CONICET เราขอขอบคุณเอฟไชโย-Almonacid,
อี Segretin และอี Lentz บีสำหรับความช่วยเหลือด้านเทคนิคของพวกเขาที่มีคุณค่า
และ BI Canteros, G. Gudesblast และ AM โรเมโรเป็นประโยชน์สำหรับการอภิปราย
ผลงานชิ้นนี้ได้รับการสนับสนุนบางส่วนจากแกรนท์ PICT 32,359
และ PICT 1094 จากสถาบันแห่งชาติเพื่อการส่งเสริมวิทยาศาสตร์และ
เทคโนโลยี (ส ANPCyT), อาร์เจนตินา
การแปล กรุณารอสักครู่..
4 . การอภิปราย
กลยุทธ์ที่แตกต่างตามการตอบสนองการป้องกัน
เฉพาะก่อนหน้านี้อธิบายแนะนำโรคปากนกกระจอก
ต้านทานในพืชส้ม ดังนั้น การแสดงออกพฤติกรรมของ
ptha ตัดโปรตีนจาก X axonopodis PV . citri ในพืชส้ม
ส่งผลให้เกิดการรบกวนของปกติโรคการติดเชื้อ
( หยาง et al . , 2010 ) เมื่อเร็วๆ นี้โรคปากนกกระจอกการลดทอนใน
พืชส้มหวานได้รับรายงานการเปลี่ยนแปลงด้วย spermidine synthase ลำดับชวน
เพิ่มการสะสมเซลล์ของแบตเตอรี่ ( Fu et al . , 2011 ) แม้ว่ากลยุทธ์เหล่านี้
ให้ความต้านทานเพื่อเปื่อยโรค พวกเขายังอาจเป็นตัวแทนของ
ข้อจำกัดที่อาจเกิดขึ้นได้ ในกรณีแรก ความต้านทานขึ้นอยู่กับ
ส่วนใหญ่ในการดัดแปลงเฉพาะโฮสต์และการปฏิสัมพันธ์ที่สามารถเอาชนะเชื้อโรค
โดยลักษณะของแบคทีเรียทน .
เมื่อสอง เกี่ยวข้องกับกลไกที่ก่อให้เกิดการตอบสนอง
พืชต่างๆที่มีความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นของผลกระทบเชิงลบต่อ
สรีรวิทยาและการปฏิบัติทางพืชไร่ ในทางตรงกันข้าม , วิธีการรวมกิจกรรมเหล่านี้มีแนวโน้มมากขึ้น
และกลไกที่มีประสิทธิภาพการใช้เชื้อพันธุกรรมที่มีการเปลี่ยนแปลง
เปปไทด์ ลำดับ วิธีการดังกล่าว
ได้รับเรียบร้อยแล้วใช้ในพืชชนิดต่างๆ
( osusky et al . , 2005 ; รีเวโร et al . , 2012 ) ก่อนหน้านี้ทำงานในทิศทางนี้
ได้รับแล้วรายงานในสายพันธุ์พืชตระกูลส้มโดยการแสดงออกพฤติกรรม
ของ attacin เป็นเปปไทด์จาก ผม ( boscariol et al . , 2006 )
C . ไซแนนซิส พืช ในงานนี้ อาการ ลดสูงสุด 40 %
ตั้งใจในการพบการติดเชื้อกับ X axonopodis
PV . citri เป็น deduced จากพื้นที่บริเวณวัดใบที่ติดเชื้อ
.
ตามพื้นหลังนี้และผลของเราเองด้วย
dermaseptin แสดงมันฝรั่งพืช ( รีเวโร et al . , 2012 ) เรา
ตัดสินใจที่จะศึกษาผลของการ dermaseptin ต่อต้านโรค
spp .เมื่อเทียบกับเอนไซม์เปป อื่น ๆ , dermaseptin จัดแสดงกิจกรรมของแบคทีเรียและเชื้อราสูง
อยู่ที่ระดับไมโครโมลาร์และไม่พบพิษต่อมนุษย์ ( เล่ ิเคะ และ galanth 2011 ;
kastin , 2006 ; หมอ et al . , 1994 ) ตั้งแต่กิจกรรมโรค
มีไม่เคยเห็นเราทำชุด
ของยับยั้งการเจริญเติบโต ) กับ X axonopodis PV . และ citri
xcampestris pv . และพบว่าสารชนิดนี้มีความไว
ที่ความเข้มข้นค่อนข้างต่ำของเปปไทด์ไลติค .
บนพื้นฐานนี้ pbin19sgfp เด้อ การก่อสร้าง เพื่อให้แสดงพฤติกรรม
ของ dermaseptin ถูกสร้างขึ้น เพื่อประเมินการทำงานของ pbin19sgfp
ตั้งชุด Co แทรกซึม )
กับ X axonopodis และ A . tumefaciens ดำเนินการก่อสร้างทางพันธุกรรม
โดยภาพรวม และ benthamiana ใบ ผลลัพธ์ที่ได้จากวิธีการเหล่านี้มีการลดจํานวนมาก
chlorotic อาการและบอกว่า dermaseptin ถูกผลิตที่ระดับประสิทธิภาพ
.
หลังจากการแปลงส้มหวาน , การรวมยีนถูกประเมินผลโดยการวิเคราะห์ตรวจสอบ
ภาคใต้และการแสดงออกของ mRNA ของ
ยืนยันตามนี้ ไม่มีการวัดโปรตีนอาจ
ที่เชื่อถือได้โดยการทดสอบทางภูมิคุ้มกันเพราะแม้จะซ้ำ
พยายามที่จะได้รับภูมิคุ้มกันตะบอย , ลด dermaseptin
ระดับที่ตรวจพบโดยแอนติของเราประมาณ 1 ng .
พันธุ์หวานส้มพืชท้าทายกับ X axonopodis
PV . citri ควบคุมการติดเชื้อหรือพบอาการลด
ถึง 50% ซึ่งวัดโดยความถี่ของเทสลาการพัฒนา
บาดแผลทั้งหมดที่ใส่แผล นอกจากนี้ ขนาดของ cankers
ที่มีอยู่ในพืชข้ามพันธุ์ และความล่าช้าในการพัฒนาให้สังเกตอาการความรุนแรงของโรคลดลงมาก
เนื่องจากการขาดภูมิคุ้มกันที่มีประสิทธิภาพ ไม่มีความสัมพันธ์ทางสถิติ
อาจจะได้รับระหว่างการสะสม dermaseptin และ
ระดับความต้านทานในพืชดัดแปรพันธุกรรม . เพราะ
การยับยั้งการเจริญเติบโตพบการติดเชื้อและใบเป็นหลัก ไม่ได้เปรียบ
ขั้นต่ำ dermaseptin สะสมต้องปรึกษาใน planta
ต้านทานไม่สามารถ inferred .
พิจารณากว้างแสดงฤทธิ์ต้านจุลชีพโดย
dermaseptin ( รีเวโร et al . , 2012 ) , เปปไทด์นี้สามารถใช้
แนะนำความต้านทานต่อเชื้อแบคทีเรียและเชื้อราเชื้อโรค
มีผลต่ออื่น ๆ ส้ม ในการนี้มันจะน่าสนใจเพื่อทดสอบความไวของ dermaseptin
แสดงพืช candidatus
liberibacter , สาเหตุโรค huanglongbing ( hlb ) โรค
( BOV é , 2006 ) และ xylella fastidiosa , สาเหตุโรคใบด่างส้ม
คลอโรซิ ( CVC ) โรค ( ฮาร์เติ้ง et al . , 1994 ) .
เมื่อพยายาม การติดเชื้อโดยตรงควบคุมไม่สามารถคาด
เงื่อนไขการเกษตรที่แท้จริงผลลัพธ์ที่ได้ในงานนี้
จะต้องได้รับการยืนยันในเรือนกระจกและสนามทดสอบทดลอง ถ้าลด
ความถี่เปื่อยสามารถทําซ้ําในเงื่อนไขเหล่านี้ ,
กลยุทธ์อธิบายในงานนี้สามารถใช้เพื่อสร้าง advantageously
จำกัด การแพร่กระจาย และการเพิ่มประสิทธิภาพของการจัดการโรค .
และขอบคุณ n.f. ซีซีได้รับการสนับสนุนโดยทุนการวิจัยจากสภาวิจัยแห่งชาติ
( โคนิเซท ) a.n.m. m.l.g. J.C . , , และมีการวิจัยของนักวิทยาศาสตร์ที่สำคัญ
โคนิเซท . เราขอขอบคุณสำหรับ almonacid
E segretin Bravo , และ E . เลนซ์ บี สำหรับความช่วยเหลือด้านเทคนิคของพวกเขาที่มีคุณค่าและ b.i.
canteros gudesblast กรัม , และ น. Romero สำหรับการสนทนาที่เป็นประโยชน์ .
งานนี้ถูกสนับสนุนโดยแกรนท์ PICT 32359
บางส่วนแล้วของหน่วยงาน และ PICT แห่งชาติเพื่อส่งเสริมวิทยาศาสตร์และ เทคโนโลยี ( anpcyt
) , อาร์เจนตินา
การแปล กรุณารอสักครู่..