Specificities of anti-rFgCatB2 and

Specificities of anti-rFgCatB2 and anti-rFgCatB3 in the vaccinated
mouse sera were tested against the recombinant proteins
using the method previously described (Sethadavit et al., 2009).
Briefly, rFgCatB2 and rFgCatB3 were separated on a 12.5% SDS–
PAGE, then transferred onto nitrocellulose membranes (NM). The
blotted NMs were blocked with 5% skim milk in TBS (40 mM
Tris–HCl, 0.5 M NaCl, pH 7.4) containing 0.1% Tween-20 (TBST)
for 2 h at 25 C, and probed with pooled preimmune (0 week),
prime (2 week), 1st boost (4 week) and 2nd boost (6 week) sera
from each group of mice diluted at 1:2000 in 5% skim milk-TBST,
for 1 h at 25 C, with gentle agitation, then the blots were washed
with TBST. Immunoreactive bands were detected by incubation
with horseradish peroxidase-conjugated goat anti-mouse IgG
(SouthernBiotech, USA). The reaction was developed by further
incubation in the specific substrate 30, 300, 50, 500-tetramethyl benzidine
(TMB) until the bands appeared, and the reaction was
stopped by adding distilled water.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จำเพาะของ rFgCatB2 ป้องกันและต่อต้าน-rFgCatB3 ในการฉีดวัคซีนเมาส์จะได้ทดสอบกับ recombinant โปรตีนก่อนหน้านี้ใช้วิธีการอธิบาย (Sethadavit et al. 2009)สั้น ๆ rFgCatB2 และ rFgCatB3 ถูกแยกอยู่ 12.5% SDS –หน้า การโอนย้ายบนไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน (NM) การblotted NMs ได้ถูกบล็อก ด้วยนมพร่องมันเนย 5% ใน TBS (40 มม.Tris–HCl, 0.5 M NaCl ค่า pH 7.4) ประกอบด้วย 0.1% แต่ -20 (TBST)สำหรับชั่วโมงที่ 25 C และพิสูจน์กับ pooled preimmune (สัปดาห์ที่ 0),นายก (2 สัปดาห์), เพิ่ม 1 (4 สัปดาห์) และจะเพิ่ม (6 สัปดาห์) 2จากแต่ละกลุ่มของหนูที่เจือจางที่ 1: 2000 ในนมพร่องมันเนย 5%-TBSTสำหรับ 1h ที่ 25 C ปั่นป่วนอ่อนโยน แล้วจัดถูกล้างกับ TBST วง immunoreactive พบ โดยกกไข่ฮอร์สแพะฮอสรวมกันต่อต้านเมาส์หา igg จำเพาะ(SouthernBiotech สหรัฐอเมริกา) ปฏิกิริยาที่ได้รับการพัฒนาโดยเพิ่มเติมบ่มในเฉพาะพื้นผิว 30, 300, 50, 500 tetramethyl benzidine(ทหารไทย) จนปรากฏวงดนตรี และปฏิกิริยาหยุดการทำงาน โดยการเพิ่มน้ำกลั่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไม่เฉพาะเจาะจงของการต่อต้าน rFgCatB2 และต่อต้าน rFgCatB3 ในการฉีดวัคซีน
Sera เมาส์ถูกนำมาทดสอบกับโปรตีน
โดยใช้วิธีการอธิบายไว้ก่อนหน้า (Sethadavit et al., 2009).
สั้น ๆ , rFgCatB2 และ rFgCatB3 ถูกแยกบน SDS- 12.5%
​​หน้าแล้ว โอนไปยังเยื่อ nitrocellulose (NM)
NMS เปื้อนถูกบล็อกด้วยนมพร่องมันเนย 5% ใน TBS (40 มิลลิเมตร
Tris-HCl, 0.5 M NaCl ค่า pH 7.4) ที่มี Tween 0.1%? -20 (TBST)
เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสและมีการตรวจสอบ preimmune pooled ( 0 สัปดาห์)
นายก (2 สัปดาห์) เพิ่ม 1 (4 สัปดาห์) และเพิ่ม 2 (6 สัปดาห์) ซีรั่ม
จากแต่ละกลุ่มของหนูเจือจาง 1: ปี 2000 ใน 5% พร่องมันเนยนม TBST,
? 1 ชั่วโมงที่ 25 C, กับการกวนอ่อนโยนแล้ว blots ถูกล้าง
ด้วย TBST วงดนตรีที่ Immunoreactive ตรวจพบโดยการบ่ม
กับแพะมะรุม peroxidase-ผันป้องกันเมาส์ IgG
(SouthernBiotech, สหรัฐอเมริกา) ปฏิกิริยาที่ได้รับการพัฒนาโดยต่อไป
บ่มในพื้นผิวที่ 30 300, 50 เฉพาะ 500 tetramethyl benzidine
(TMB) จนกว่าวงดนตรีที่ปรากฏและปฏิกิริยาที่ถูก
หยุดโดยการเติมน้ำกลั่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

- anti-rfgcatb2 anti-rfgcatb3 ในวัคซีนและเซราเมาส์ทดสอบกับโปรตีนรีคอมบิแนนท์โดยใช้วิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( sethadavit et al . , 2009 )สั้น ๆ , และ rfgcatb2 rfgcatb3 แยกกันบน 12.5 % SDS จำกัดหน้าแล้วโอนไปยังไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ( nm ) ที่คุณถูกบล็อกลบ 5% หางนมผงใน TBS ( 40 มม.โดย–กรดไฮโดรคลอริก 0.5 โมลาร์ pH 7.4 ) ที่ประกอบด้วย 0.1% tween-20 ( tbst )2 H ที่ 25 C และการตรวจสอบด้าน preimmune ( 1 สัปดาห์ )นายกรัฐมนตรี ( 2 สัปดาห์ ) 1 เพิ่ม ( 4 สัปดาห์ ) และ 2 ( 6 สัปดาห์ ) ( เพิ่มจากแต่ละกลุ่มของหนูอยู่ที่ 1:2000 5 % หาง tbst นมเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่ 25 องศาเซลเซียส ด้วยความอ่อนโยนมาก แล้วไม้ได้ล้างกับ tbst . วง immunoreactive ถูกตรวจพบโดยการบ่มกับเอนไซม์ conjugated IgG anti เมาส์แพะ .( southernbiotech , USA ) ปฏิกิริยาที่ถูกพัฒนา โดยเพิ่มเติมบ่มเพาะในพื้นผิวพิเศษ 30 , 300 , 50 , 500 ผลเบนซิดีน( TMB ) จนแถบที่ปรากฏและปฏิกิริยา คือแวะเติมน้ำกลั่น