In several species, the development

In several species, the developmental competence of the oocyte is acquired progressively during late follicular growth, after the acquisition of the competence to resume and complete meiosis. In the pig, full meiotic competence of the oocyte is reached in ovarian follicles with a diameter of 3 mm or more. However, there is no information about developmental competence acquisition. We analyzed the ability of oocytes from three foll icular size classes to resume and complete meiosis, to be fertilized, and to develop in vitro to the blastocyst stage. A total of 941 follicles were dissected from slaughterhouse gilt ovaries and classified as small (5 mm, n = 238). The cumulus-oocyte complexes recovered from these follicles were submitted to in vitro maturation for 44 h in TCM199 supplemented with 10 ng/ml EGF, 400 ng/ml pFSH and 570 microM cysteamine; in vitro fertilized for 18 h in mTBM with 10(5) frozen-thawed percoll-selected sperms/ml; and developed for 7 days in mSOF. Samples of oocytes or presumptive zygotes were fixed and stained at the end of maturation and fertilization. Groups of oocytes were cultured for 3 h in the presence of 35S-methionine before or after maturation for SDS-PAGE analysis of protein neosynthesis. More oocytes originating from medium and large follicles were competent for maturation than oocytes from small follicles (77 and 86% of metaphase II, respectively, versus 44%, P < 0.05). More oocytes from medium and large follicles were penetrated by spermatozoa during in vitro fertilization, resulting in significantly more oocytes presenting two or more pronuclei at the end of fertilization (73 and 77% for medium and large follicles, respectively, versus 53% for small follicles, P < 0.05). More oocytes from medium and large follicles developed to the blastocyst stage (14 and 23%, respectively) than those from small follicles (3%, P < 0.05), even if the development rates were corrected by the maturation or fertilization rates. It is concluded that a high proportion of oocytes harvested from follicles of less than 3 mm in the pig are not fully competent for meiosis and are cytoplasmically deficient for development.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในหลายสายพันธุ์ พัฒนาความสามารถของการใช้ไข่ซื้อมาทุกทีระหว่างปลาย follicular การเจริญเติบโต หลังจากการซื้อความสามารถเพื่อดำเนินต่อ และเสร็จสมบูรณ์โครโมโซม ในหมู meiotic เต็มความสามารถของการใช้ไข่ถึงในรูขุมขนรังไข่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 3 มม.หรือมากกว่า อย่างไรก็ตาม ไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับพัฒนาการความสามารถซื้อ เราวิเคราะห์ความสามารถของเซลล์ไข่จากสาม foll icular ขนาดชั้นเรียนดำเนินต่อ และเสร็จสมบูรณ์โครโมโซม การปฏิสนธิ และ การพัฒนาในหลอดทดลองในระยะ blastocyst ไป Dissected จากรังไข่ทองโรงฆ่าสัตว์ และจัดเป็นขนาดเล็กทั้งหมด 941 รูขุมขน (< มม. 3, n = 330), ปานกลาง (3-5 มม. n = 373), หรือขนาดใหญ่ (> 5 มม. n = 238) คอมเพล็กซ์ลัสใช้ไข่ที่กู้คืนจากรูขุมขนเหล่านี้ส่งมาที่การเจริญเติบโตในหลอดทดลองสำหรับเสริม ด้วย 10 ng/ml EGF, 400 pFSH ng/ml และ 570 microM สเทีย TCM199 h 44 ปฏิสนธิในหลอดทดลองสำหรับ mTBM กับ 10(5) แช่แข็งเตรียมเลือก percoll น้ำ อสุจิ/ml; h 18 และพัฒนาสำหรับ 7 วันใน mSOF ตัวอย่างของเซลล์ไข่หรือ presumptive zygotes ถาวร และย้อมสีที่สิ้นสุดของการเจริญเติบโตและการปฏิสนธิ กลุ่มของเซลล์ไข่ได้ล้างสำหรับ 3 h ใน 35S methionine ก่อน หรือ หลังการเจริญเติบโตการวิเคราะห์หน้า SDS ของโปรตีน neosynthesis เพิ่มเติมเส้นเกิดจากรูขุมขนขนาดกลาง และขนาดใหญ่มีอำนาจสำหรับการเจริญเติบโตกว่าเซลล์ไข่จากรูขุมขนเล็ก (77 และ 86% ของ metaphase II ตามลำดับ และ 44%, P < 0.05) เพิ่มเติมเส้นจากรูขุมขนขนาดกลาง และขนาดใหญ่ถูกเจาะ ด้วยตัวอสุจิในระหว่างการปฏิสนธิในหลอดทดลอง เกิดในเซลล์ไข่อย่างมากนำเสนอ สอง pronuclei ที่ปฏิสนธิ (73 และ 77% สำหรับรูขุมขนขนาดกลาง และขนาดใหญ่ ตามลำดับ และ 53% สำหรับรูขุมขนเล็ก P < 0.05) เพิ่มเติมเส้นจากรูขุมขนขนาดกลาง และขนาดใหญ่พัฒนาถึงระยะบลาสโตซิสท์ (14 และ 23% ตามลำดับ) กว่ารูขุมขนเล็ก (3%, P < 0.05), แม้ว่าอัตราการพัฒนาถูกแก้ไข โดยอัตราการเจริญเติบโตหรือปฏิสนธิ ก็สรุปได้ว่า สัดส่วนของเซลล์ไข่ที่เก็บเกี่ยวจากรูขุมขนของหมูน้อยกว่า 3 mm ไม่มีอำนาจอย่างเต็มที่สำหรับโครโมโซม และ cytoplasmically ขาดการพัฒนา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในหลายชนิด, ความสามารถการพัฒนาของไข่ที่ได้มาจะมีความก้าวหน้าระหว่างการเจริญเติบโต follicular ปลายหลังจากที่ได้มาของความสามารถที่จะกลับมาและไมโอซิสที่สมบูรณ์ ในหมูที่เต็มไปด้วยความสามารถของเซลล์ meiotic ถึงในรังไข่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 3 มิลลิเมตรหรือมากกว่า แต่มีข้อมูลเกี่ยวกับการเข้าซื้อกิจการความสามารถการพัฒนาไม่มี เราวิเคราะห์ความสามารถในการพัฒนาของไข่จากสามชั้นขนาด icular foll ที่จะกลับมาและไมโอซิสที่สมบูรณ์จะได้รับการปฏิสนธิและการพัฒนาในหลอดทดลองไปยังขั้นตอนตัวอ่อน รวมเป็น 941 รูขุมถูกชำแหละจากโรงฆ่าสัตว์รังไข่ทองและจัดเป็นขนาดเล็ก (<3 มม n = 330) กลาง (3-5 มม n = 373) หรือขนาดใหญ่ (> 5 มม n = 238) คอมเพล็กซ์ Cumulus-ไข่หายจากรูขุมเหล่านี้ถูกส่งไปในหลอดทดลองการเจริญเติบโต 44 ชั่วโมงใน TCM199 เสริมด้วย 10 ng / ml EGF 400 ng / ml pFSH และ 570 ไมโครโม Cysteamine; การปฏิสนธิในหลอดทดลองเป็นเวลา 18 ชั่วโมงใน mTBM 10 (5) แช่แข็งละลาย percoll เลือกน้ำเชื้อ / ml; และพัฒนามาเป็นเวลา 7 วันใน mSOF ตัวอย่างของการพัฒนาของไข่หรือ zygotes สันนิษฐานได้รับการแก้ไขและการย้อมสีในตอนท้ายของการเจริญเติบโตและการปฏิสนธิ กลุ่มของเซลล์ไข่มาเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 3 ชั่วโมงในการปรากฏตัวของ 35S-methionine ก่อนหรือหลังการเจริญเติบโตสำหรับการวิเคราะห์ระบบ SDS-PAGE ของ neosynthesis โปรตีน เซลล์ไข่มากขึ้นมาจากกลางและขนาดใหญ่รูขุมมีความสามารถสำหรับการเจริญเติบโตกว่าเซลล์ไข่จากรูขุมขนขนาดเล็ก (77 และ 86% ของผู้ metaphase II ตามลำดับเมื่อเทียบกับ 44%, p <0.05) เซลล์ไข่เพิ่มเติมจากรูขุมขนาดกลางและขนาดใหญ่ทะลุผ่านตัวอสุจิในระหว่างการปฏิสนธิในหลอดทดลองที่มีผลในการพัฒนาของไข่อย่างมีนัยสำคัญในการนำเสนอสองคนหรือมากกว่า pronuclei ในตอนท้ายของการปฏิสนธิ (73 และ 77% สำหรับการขนาดกลางและขนาดใหญ่รูขุมตามลำดับเมื่อเทียบกับ 53% สำหรับรูขุมขนเล็ก ๆ , p <0.05) เซลล์ไข่เพิ่มเติมจากขนาดกลางและขนาดใหญ่รูขุมพัฒนาไปยังขั้นตอนตัวอ่อน (14 และ 23% ตามลำดับ) มากกว่าผู้ที่มาจากรูขุมขนขนาดเล็ก (3%, p <0.05) แม้ว่าอัตราการพัฒนาได้รับการแก้ไขโดยการเจริญเติบโตหรือการปฏิสนธิอัตรา ก็สรุปได้ว่าเป็นสัดส่วนที่สูงของการพัฒนาของไข่เก็บเกี่ยวจากรูขุมน้อยกว่า 3 มมหมูไม่ได้มีอำนาจอย่างเต็มที่สำหรับการแบ่งเซลล์ชนิดหนึ่งและมีความ cytoplasmically ขาดการพัฒนา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในหลายชนิด ความสามารถการพัฒนาของไข่ที่ได้รับความก้าวหน้าในช่วงฮอร์โมนการเจริญเติบโต หลังการเข้าซื้อกิจการของความสามารถที่จะกลับมาและให้เหม่ง . ในสุกร ความสามารถเต็มรูปแบบของเซลล์ไข่ในรังไข่ถึงรูขุมขนขนาด เส้นผ่าศูนย์กลาง 3 มิลลิเมตร หรือมากกว่า อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับการซื้อความสามารถพัฒนาการ เราวิเคราะห์ความสามารถของไข่จากสามโฟล icular ขนาดชั้นเรียนที่จะกลับมาสมบูรณ์และไมโอซิส จะเพาะและพัฒนาในหลอดทดลองกับตัวอ่อนระยะ ทั้งหมด 941 รูขุมขนถูกชำแหละจากโรงฆ่าสัตว์ปิดทองรังไข่และจัดเป็นขนาดเล็ก ( < 3 มม. , N = 330 ) กลาง ( 3-5 มิลลิเมตร , N = 373 ) หรือขนาดใหญ่ ( > 5 มม. , N = 238 ) ไข่ที่สมบูรณ์เชิงซ้อนหายจากรูขุมขนเหล่านี้ถูกส่งไปยังหลอดอายุ 44 ชั่วโมง tcm199 4-D 10 ng / ml ( 1 ) 400 ng / ml pfsh 570 microm ไซสเตียมีน ; การเพาะผสมเทียม 18 H ใน mtbm 10 ( 5 ) percoll อสุจิแช่แข็งที่ละลายแล้ว เลือก / มิลลิลิตร และพัฒนาเป็นเวลา 7 วัน msof . ตัวอย่างไข่หรือให้ผล zygotes ถูกกำหนดและเปื้อนที่สิ้นสุดของการเจริญเติบโตและการใช้ปุ๋ย . กลุ่มเซลล์เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 3 ชม. ในการปรากฏตัวของ 35s เมทไธโอนีน ก่อนหรือหลังการ neosynthesis การวิเคราะห์เอนไซม์ของโปรตีน อีกตัวที่มาจากขนาดกลางและขนาดใหญ่ เหมาะสมกับวุฒิภาวะกว่าไข่ไข่จากรูขุมขนเล็ก ( 77 และร้อยละ 86 ของเมทาเฟส II ตามลำดับ เมื่อเทียบกับร้อยละ 44 , p < 0.05 ) ระยะจากกลางและรูขุมขนขนาดใหญ่มี penetrated โดยท่อในระหว่างพยานเอกสารซึ่งสูงกว่าเซลล์เสนอสองหรือมากกว่า pronuclei ที่ส่วนท้ายของการปฏิสนธิ ( 73 และ 77 % ขนาดกลางและใหญ่ตามลำดับ เมื่อเทียบกับรากผม 53% สำหรับรูขุมขนเล็ก , p < 0.05 ) อีกตัวจากกลางและรูขุมขนขนาดใหญ่การพัฒนาตัวอ่อนระยะ ( 14 และ 23 ตามลำดับ ) สูงกว่าจากรูขุมขนเล็ก ( 3 % , P < 0.05 ) ถึงแม้ว่าการพัฒนาอัตราถูกแก้ไขโดยวุฒิภาวะหรืออัตราการปฏิสนธิ . สรุปได้ว่า สัดส่วนของระยะเก็บเกี่ยวจากรูขุมขนน้อยกว่า 3 มม. ในสุกรไม่เชี่ยวชาญอย่างเต็มที่สำหรับไมโอซิส และ cytoplasmically ขาดการพัฒนา