Direct and macroscopic examinations

Direct and macroscopic examinations of the
semen confirmed hematospermia. We extracted RNA using the NucliSENS easyMAG system (bioMérieux, Marcy l’Etoile, France) from 200 μL of blood and from 500 μL of semen and urine; both were eluted by 50 μL of elution buffer. We used 5 μL of RNA extracted for amplification. We tested blood and semen RNA extracts using real-time reverse transcription PCR (rRT-PCR) as described using 2 primers/probe amplification sets specific for ZIKV (3). The rRT-PCR results were positive for ZIKV in semen and negative in blood, and confirmed by sequencing of the genomic position 858–1138 encompassing the prM/E protein coding regions of ZIKV. The generated sequence (GenBank accession no. KM014700) was identical to those previously reported at the beginning of the ZIKV outbreak (3). Three days later, we collected a urine sample, then a second set of blood and semen samples.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สอบตรง และด้วยตาเปล่าของน้ำเชื้อยืนยัน hematospermia เราสกัด RNA โดยใช้ NucliSENS easyMAG ระบบ (bioMérieux มาร์ซี่ l'Etoile ฝรั่งเศส) จาก 200 μL เลือด และ จาก μL 500 ของน้ำเชื้อและปัสสาวะ ทั้งสองถูก eluted โดย μL 50 ของบัฟเฟอร์ชะ เราใช้ μL 5 ของ RNA ที่สกัดสำหรับขยาย เราทดสอบเลือด และสารสกัดจากน้ำเชื้อ RNA ที่ใช้ถอดรหัสย้อนหลังเรียลไทม์ PCR (rRT-PCR) ดังที่ใช้ 2 ขยายไพรเมอร์/สอบสวนชุดเฉพาะสำหรับ ZIKV (3) ผล rRT PCR บวกสำหรับ ZIKV ในน้ำอสุจิ และในเลือดเป็นลบ และยืนยัน โดยลำดับของการ 858-1138 ตำแหน่งออกครอบคลุมโปรตีน prM/E ที่เข้ารหัสภูมิภาคของ ZIKV ลำดับ (GenBank ภาคยานุวัติไม่สร้างขึ้น KM014700) คือเหมือนกับรายงานที่เริ่มต้นของการระบาดของโรค ZIKV (3) สามวันต่อมา เรารวบรวมตัวอย่างปัสสาวะ แล้วชุดสองตัวอย่างเลือดและน้ำอสุจิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสอบตรงและมหภาคของ
hematospermia น้ำอสุจิได้รับการยืนยัน เราสกัด RNA ใช้ระบบ NucliSENS easyMAG (bioM? rieux ร์ซี่ l'Etoile, ฝรั่งเศส) 200 ไมโครลิตรของเลือดและจาก 500 ไมโครลิตรของน้ำอสุจิและปัสสาวะ; ทั้งสองถูกชะลง 50 ไมโครลิตรของ buffer ชะ เราใช้ 5 ไมโครลิตรของ RNA สกัดสำหรับการขยาย เราได้ทดสอบเลือดและน้ำอสุจิสารสกัดอาร์เอ็นเอโดยใช้แบบ real-time PCR ถอดรหัสแบบย้อนกลับ (RRT-PCR) ตามที่อธิบายโดยใช้ไพรเมอร์ 2 / สอบสวนขยายชุดที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ ZIKV (3) ผล RRT-PCR เป็นบวกสำหรับ ZIKV ในน้ำอสุจิและลบในเลือดและได้รับการยืนยันโดยลำดับของจีโนมตำแหน่ง 858-1138 ครอบคลุมโปรตีน PRM / E เข้ารหัสภูมิภาคของ ZIKV ลำดับที่สร้าง (GenBank ภาคยานุวัติไม่มี. KM014700) เป็นเหมือนกันกับที่รายงานก่อนหน้านี้ที่จุดเริ่มต้นของการระบาด ZIKV ที่ (3) สามวันต่อมาเราเก็บตัวอย่างปัสสาวะแล้วชุดที่สองของเลือดและน้ำอสุจิตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยตรง และมีการสอบของน้ำเชื้อยืนยัน hematospermia . เราได้สกัดอาร์เอ็นเอโดยใช้ nuclisens easymag ระบบ ( biom é rieux มาร์ซี่ l"etoile , ฝรั่งเศส ) จาก 200 μลิตรของเลือดและจาก 500 μ L ของน้ำอสุจิและปัสสาวะ ; ทั้งสองตัวอย่างμ 50 ลิตรใช้บัฟเฟอร์ เราใช้ 5 μ L ของอาร์เอ็นเอที่ขยาย . เราทดสอบเลือดและสารสกัด RNA PCR แบบเรียลไทม์การใช้ reverse transcription ( RRT PCR ) โดยใช้ไพรเมอร์ / สอบสวนไว้ 2 ชุด ( เฉพาะ zikv ( 3 ) ผลตรวจเป็นบวก สำหรับ zikv RRT ในน้ำอสุจิ และลบในเลือด และยืนยันโดยลำดับของจีโนม 858 ตำแหน่ง–ให้ครอบคลุม PRM / E โปรตีนรหัสภูมิภาคของ zikv . สร้างลำดับ ( ขนาดหนังสือไม่ km014700 ) คือเหมือนที่รายงานว่า ก่อนหน้านี้ที่จุดเริ่มต้นของ zikv ระบาด ( 3 ) 3 วันต่อมา เราได้เก็บตัวอย่างปัสสาวะ แล้วตั้ง สองตัวอย่างของเลือดและน้ำอสุจิ