A Taqman
MGB real-time PCR assay t

A Taqman
MGB real-time PCR assay targeting the TMS1 gene of
Agrobacterium sp. has been developed. PCR of bacterial strains and
isolates from different genus was performed to prove specificity.
Serial decimal dilutions of Agrobacterium sp. showed a consistent
detection sensitivity of 10 CFU/ml. All strains of Agrobacterium sp.
could be detected, and there were no cross-reactions with matrices
or other bacteria also testing naturally contaminated samples.
Rapid, reliable and sensitive detection of Agrobacterium sp. is crucial
to avoid the distribution by contaminated GM plant material
or vectors carrying the pathogen. The selected conserved target
gene allows relative quantitative detection of Agrobacterium sp.
from different sources and host taxa. Moreover, new QRT-PCR tests
were designed for the detection and the quantification of the
screening elements, P-mas, T-Tr7 and T-mas to be used in GMO
analysis. Finally, this work contributes to the knowledge on the
GMO methodologies by providing new QRT-PCR method to avoid
false positives when using detection procedures applied on different
matrixes including food, feed and contaminated raw material
and may be introduced after validation in the different GMO
method databases.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การ Taqman MGB แบบเรียลไทม์ PCR assay ยีน TMS1 ของการกำหนดเป้าหมายได้รับการพัฒนา sp.อโกรแบคทีเรียม PCR ของแบคทีเรียสายพันธุ์ และแยกได้จากพืชสกุลต่าง ๆ ที่ดำเนินการเพื่อพิสูจน์ specificityประจำ dilutions ทศนิยมของ sp.อโกรแบคทีเรียมแสดงให้เห็นความสอดคล้องกันตรวจสอบระดับความลับของ 10 CFU/ml สายพันธุ์ทั้งหมดของ sp อโกรแบคทีเรียมพบ และมีไม่ cross-reactions กับเมทริกซ์หรือตัวอย่างปนเปื้อนแบคทีเรียอื่น ๆ ยัง ทดสอบตามธรรมชาติตรวจสอบอย่างรวดเร็ว เชื่อถือได้ และสำคัญของ sp.อโกรแบคทีเรียมเป็นสำคัญเพื่อหลีกเลี่ยงการกระจายโดยการปนเปื้อนวัสดุโรงงานจีเอ็มหรือเวกเตอร์ที่ดำเนินการศึกษา นำเป้าหมายที่เลือกยีนช่วยให้การตรวจสอบเชิงปริมาณสัมพัทธ์ของ sp อโกรแบคทีเรียมจากแหล่งต่าง ๆ และโฮสต์ taxa นอกจากนี้ PCR QRT ใหม่ทดสอบถูกออกแบบสำหรับการตรวจสอบและนับขององค์ประกอบคัดกรอง P-มาส T Tr7 และ T มาสที่จะใช้ในพืชจีเอ็มโอวิเคราะห์ ในที่สุด งานนี้รวมความรู้ในการวิธีการจีเอ็มโอ โดยการนำเสนอวิธีการใหม่ QRT PCR เพื่อหลีกเลี่ยงทำงานผิดพลาดผิดเมื่อใช้วิธีตรวจที่ใช้แตกต่างกันmatrixes รวมทั้งอาหาร อาหาร และการปนเปื้อนวัสดุดิบและอาจนำมาใช้หลังจากการตรวจสอบจีเอ็มโอต่าง ๆฐานข้อมูลวิธีการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

TaqMan หรือไม่? MGB แบบ real-time PCR กำหนดเป้าหมายการวิเคราะห์ยีนของ TMS1
SP Agrobacterium ได้รับการพัฒนา PCR
สายพันธุ์แบคทีเรียและแยกจากประเภทที่แตกต่างกันได้รับการดำเนินการที่จะพิสูจน์ความจำเพาะ.
อนุกรมเจือจางทศนิยมของ SP Agrobacterium แสดงให้เห็นว่าสอดคล้องความไวของการตรวจสอบ 10 CFU / ml
ทุกสายพันธุ์ของเอสพี Agrobacterium.
สามารถตรวจพบและไม่มีปฏิกิริยาข้ามกับการฝึกอบรมหรือแบคทีเรียอื่น ๆ ยังมีการทดสอบตัวอย่างที่ปนเปื้อนตามธรรมชาติ. อย่างรวดเร็ว, การตรวจสอบที่น่าเชื่อถือและมีความละเอียดอ่อนของเอสพี Agrobacterium เป็นสิ่งสำคัญที่จะหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนจากการจัดจำหน่ายวัสดุจากพืชจีเอ็มหรือเวกเตอร์แบกเชื้อโรค ที่เลือกเป้าหมายการอนุรักษ์ยีนช่วยให้การตรวจสอบเชิงปริมาณญาติของเอสพี Agrobacterium. จากแหล่งที่แตกต่างกันและแท็กซ่าโฮสต์ นอกจากนี้ยังมีการทดสอบใหม่ QRT-PCR ได้รับการออกแบบสำหรับการตรวจสอบและการหาปริมาณขององค์ประกอบการตรวจคัดกรอง P-Mas T-TR7 และ T-Mas ที่จะใช้ในจีเอ็มโอวิเคราะห์ ในที่สุดงานนี้ก่อให้เกิดความรู้เกี่ยวกับการวิธีการจีเอ็มโอโดยการให้วิธี QRT-PCR ใหม่เพื่อหลีกเลี่ยงการบวกเท็จเมื่อใช้วิธีการตรวจสอบการใช้ในที่แตกต่างกันmatrixes รวมทั้งอาหาร, อาหารสัตว์และวัตถุดิบที่ปนเปื้อนและอาจจะนำมาใช้หลังจากการตรวจสอบในจีเอ็มโอที่แตกต่างกันวิธีการฐานข้อมูล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็น taqman
mgb เรียลไทม์ซึ่งเป็นชุดตรวจยีนของเป้าหมาย tms1
Agrobacterium sp . ได้รับการพัฒนา ดีเอ็นเอของสายพันธุ์ที่แยกได้จากแบคทีเรียและ
ต่างกันได้พิสูจน์เลือด .
อนุกรมทศนิยมเจือจางของ Agrobacterium sp . พบความไวตรวจจับสอดคล้อง
10 CFU / มล. ทุกสายพันธุ์ของ Agrobacterium sp .
สามารถตรวจพบ และไม่พบปฏิกิริยาข้ามกับเมทริกซ์
หรืออื่น ๆที่ปนเปื้อนแบคทีเรียตามธรรมชาติยังทดสอบตัวอย่าง .
อย่างรวดเร็วและเชื่อถือได้และมีการตรวจสอบของ Agrobacterium sp . เป็นสิ่งสำคัญเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนด้วย

วัสดุพืชจีเอ็มหรือเวกเตอร์แบกเชื้อโรค สามารถเลือกเป้าหมาย
ยีนช่วยให้ตรวจจับปริมาณสัมพัทธ์ของ
sp . และ Agrobacterium จากแหล่งข้อมูลที่แตกต่างกันและโฮสต์ นอกจากนี้ qrt-pcr
การทดสอบใหม่ถูกออกแบบมาเพื่อตรวจจับและปริมาณของ
การคัดเลือกองค์ประกอบ p-mas t-tr7 t-mas , และเพื่อใช้ในการวิเคราะห์จีเอ็มโอ

ในที่สุด งานนี้ก่อให้เกิดความรู้ในวิธีการโดยวิธีการ qrt-pcr
จีเอ็มโอให้ใหม่เพื่อหลีกเลี่ยง
ผลบวกปลอมเมื่อใช้กระบวนการที่ใช้ในการตรวจหา matrixes แตกต่างกัน

รวมทั้งอาหาร อาหารสัตว์ และวัตถุดิบที่ปนเปื้อนและอาจจะเปิดตัวหลังจากการตรวจสอบในที่แตกต่างกันจีเอ็มโอ
วิธีฐานข้อมูล