Embryo production was performed as

Embryo production was performed as described [15].
Briefly, COCs classified in categories I, II, and III werewashed
three times in wash media, placed in groups of 20 in 90 mL
microdrops of TCM-199 supplemented with 10% (vol/vol)
bovine fetal serum, 2 mg/mL pyruvate, 75 mg/mL gentamicin,
20 mg/mL FSH (Pluset; Hertape Calier, Juatuba, MG, Brazil),
and 10 IU/mL LH (Choriomon; Vivimed, Ribeirão Preto, SP,
Brazil) overlaid with mineral oil and matured for 22 to
24 hours at 38.5
C in an atmosphere of 5% (vol/vol) CO2 in
humidifled air. Matured COCs were washed three times
in TCM-199 with HEPES and once in IVF-Tyrode’s albumin
lactate pyruvate [23] supplemented with 6 mg/mL
fatty acid-free bovine serum albumin (BSA), 2 mL/mL pyruvate,
75 mg/mL gentamicin, 11 mg/mL heparin, and 44 mL/mL
0.5 mM penicillamine, 0.25 mM hypotaurine, transferred in
groups of 20 oocytes per 90-mL drop of IVF-Tyrode’s albumin
lactate pyruvate, overlaid with mineral oil, and fertilized
with approximately 1  106 Percoll-purifled sperm from
a pool of frozen-thawed semen. The day of fertilization was
considered Day 0. After 10 to 12 hours at 38.5
C in an
atmosphere of 5% (vol/vol) CO2 in humidifled air, putative
zygotes were removed from the fertilization drops, denuded
of cumulus cells by repeated pipetting in TCM-199 with
HEPES, and placed in groups of 20 in 90-mL microdrops of
synthetic oviduct fluid [15] supplemented with 5% (vol/vol)
fetal bovine serum, 5% BSA, and 0.2% sodium pyruvate
overlaid with mineral oil. Culture plates were placed in
sealed bags with an atmosphere of 5% O2, 5% CO2, and 90%
N2 for the entire culture period.
The culture medium was partly replaced with 50 mL of
fresh medium at 48, 96, and 144 hours after fertilization.
Before each of these feedings, cleavage, morula, and blastocyst
yields were evaluated.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีดำเนินการผลิตตัวอ่อนอธิบาย [15]สั้น ๆ COCs จัดในประเภทฉัน II และ III werewashedครั้งที่สามในล้างสื่อ วางในกลุ่มของ 20 ใน 90 mLmicrodrops ของ TCM 199 เสริม ด้วย 10% (vol/vol)เซรั่มครรภ์วัว 2 mg/mL pyruvate, gentamicin 75 mg/mL20 mg/mL FSH (Pluset Hertape Calier, Juatuba, MG บราซิล),และ 10 IU/mL LH (Choriomon Vivimed, Ribeirão Preto, SPประเทศบราซิล) overlaid กับน้ำมันแร่ และ matured สำหรับ 22 เพื่อ24 ชั่วโมงที่ 38.5 C ใน 5% (vol/vol) CO2 ในบรรยากาศhumidifled อากาศ Matured COCs ถูกล้าง 3 ครั้งใน TCM 199 ด้วย HEPES ครั้ง IVF Tyrode albuminlactate pyruvate [23] เสริม ด้วย 6 mg/mLกรดไขมันอิสระวัว serum albumin (บีเอสเอ), pyruvate 2 mL/mLgentamicin 75 mg/mL เฮพาริน 11 mg/mL และ 44 mL/mLpenicillamine 0.5 mM, 0.25 mM hypotaurine โอนย้ายในกลุ่มแช่สารละลาย 20 ต่อ 90 mL หยด albumin IVF-Tyrodelactate pyruvate, overlaid กับน้ำมันแร่ และปฏิสนธิมีประมาณ 1 106 Percoll purifled สเปิร์มจากสระว่ายน้ำของน้ำเชื้อแช่แข็ง-thawed วันปฏิสนธิได้พิจารณาวัน 0 หลังจาก 10-12 ชั่วโมงที่ 38.5 C ในการบรรยากาศ 5% (vol/vol) CO2 ในอากาศ humidifled, putativezygotes ออกจากหยดปฏิสนธิ denudedของเซลล์ลัสโดยซ้ำ pipetting ใน TCM 199 ด้วยHEPES และ 20 ใน 90 mL microdrops ของกลุ่มในน้ำมันสังเคราะห์ oviduct [15] เสริม ด้วย 5% (vol/vol)เซรั่มวัวครรภ์ บีเอสเอ 5% และ 0.2% โซเดียม pyruvateoverlaid กับน้ำมัน แผ่นวัฒนธรรมไว้ในถุงปิดผนึก ด้วยบรรยากาศ น่า 5% O2, 5% CO2, 90%N2 สำหรับรอบระยะเวลาทั้งวัฒนธรรมสื่อวัฒนธรรมถูกแทนที่ ด้วย 50 mL ของบางส่วนขนาดกลางสดที่ 48, 96, 144 ชั่วโมงหลังการปฏิสนธิก่อนที่แต่ละเหล่านี้ feedings ปริ morula และอดีตมีประเมินผลผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การผลิตตัวอ่อนที่ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ [15].
สั้น ๆ , CoCs จัดให้อยู่ในประเภท I, II และ III werewashed
สามครั้งในสื่อล้างที่วางไว้ในกลุ่มที่ 20 ใน 90 มิลลิลิตร
microdrops ของ TCM-199 เสริมด้วย 10% (ปริมาตร / ปริมาตร )
ซีรั่มของทารกในครรภ์วัว 2 มิลลิกรัม / ไพรูมิลลิลิตร 75 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร gentamicin,
20 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร FSH (Pluset; Hertape Calier, Juatuba, MG, บราซิล),
และ 10 IU / mL LH (Choriomon; Vivimed, Ribeirão Preto, SP ,
บราซิล) บุด้วยน้ำมันแร่และครบกำหนด 22 ที่จะ
24 ชั่วโมงที่ 38.5 องศาเซลเซียสในบรรยากาศของ 5% (ปริมาตร / ปริมาตร) CO2
ในอากาศhumidifled CoCs ครบกำหนดถูกล้างสามครั้งใน TCM-199 กับ HEPES และครั้งเดียวในการผสมเทียม-Tyrode ของอัลบูมิไพรูนม[23] เสริมด้วย 6 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรไขมันกรดอัลบูมิซีรั่มวัว(BSA) 2 มิลลิลิตรไพรู / มิลลิลิตร75 mg / มิลลิลิตร gentamicin 11 มก. / เฮมิลลิลิตรและ 44 มิลลิลิตร / มิลลิลิตร0.5 มิลลิ penicillamine, 0.25 มิลลิ hypotaurine โอนในกลุ่ม20 ไข่ละ 90 มิลลิลิตรหยดผสมเทียม-Tyrode ของอัลบูมิไพรูนมบุด้วยน้ำมันแร่และการปฏิสนธิที่มีประมาณ1? 106 สเปิร์ม Percoll-purifled จากสระว่ายน้ำของน้ำอสุจิแช่แข็งละลาย วันของการปฏิสนธิที่ได้รับการพิจารณาวัน 0. หลังจาก 10 ถึง 12 ชั่วโมงใน 38.5 องศาเซลเซียสในบรรยากาศของ5% (ปริมาตร / ปริมาตร) CO2 ในอากาศ humidifled, สมมุติzygotes ถูกถอดออกจากการปฏิสนธิลดลง, โล่งของเซลล์คิวมูลัสโดยปิเปตซ้ำแล้วซ้ำอีกใน TCM-199 กับHEPES และวางอยู่ในกลุ่ม 20 microdrops 90 มิลลิลิตรของของเหลวสังเคราะห์ท่อนำไข่[15] เสริมด้วย 5% (ปริมาตร / ปริมาตร) ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ BSA 5% และไพรูโซเดียม 0.2% บุด้วยแร่ธาตุ น้ำมัน. แผ่นวัฒนธรรมถูกวางไว้ในถุงปิดผนึกด้วยบรรยากาศของ 5% O2, CO2 5% และ 90% N2 สำหรับระยะเวลาการเลี้ยงทั้งหมด. กลางวัฒนธรรมถูกแทนที่บางส่วน 50 มลของสื่อใหม่ที่48, 96 และ 144 ชั่วโมงหลังจากที่ การปฏิสนธิ. ก่อนที่จะให้นมแต่ละเหล่านี้ความแตกแยก, มอรูล่าและตัวอ่อนอัตราผลตอบแทนที่ได้รับการประเมิน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การผลิตตัวอ่อนได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ [ 15 ]สั้น ๆ , ลบแบ่งประเภท I , II และ III werewashedสามครั้งในล้างสื่อ อยู่ในกลุ่ม 20 90 มล.microdrops ของ tcm-199 4-D 10 % ( ปริมาตร / ปริมาตร )วัวของ เซรั่ม 2 mg / ml ไพรูเวทยา 75 mg / ml ,20 มก. / มล. ( 2 pluset ; hertape calier Juatuba , mg , บราซิล )และ 10 IU / ml LH ( choriomon ; vivimed ribeir ฮัล O , จึง , SPบราซิล ) หุ้มด้วยน้ำมันและเป็นผู้ใหญ่ที่ 2224 ชั่วโมงที่ 38.5 องศาเซลเซียส ในบรรยากาศของ 5 เปอร์เซ็นต์ ( ปริมาตร / ปริมาตร ) CO2 ในhumidifled อากาศ ลบได้ซักสามครั้งนะใน tcm-199 กับฮีเปส และ เมื่อใน IVF tyrode ของอัลบูมินlactate pyruvate [ 23 ] เสริม 6 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรกรดไขมันอิสระอัลบูมิน ( BSA ) ปริมาตร 2 ml ไพรูเวท75 mg / ml ยา heparin 11 มก. / มล. และ 44 ml / ขวดเพนิซิลลามีน 0.5 มม. น 0.25 มิลลิเมตร โอนย้ายกลุ่มของ 20 ตัว ต่อ 90 มล. หยด IVF tyrode ของอัลบูมินlactate pyruvate ที่หุ้มด้วยน้ำมัน , แร่ และไข่ที่มีประมาณ 1 purifled 106 percoll สเปิร์มจากสระว่ายน้ําแข็งละลายน้ำเชื้อ วันปฏิสนธิ คือถือเป็นวัน 0 หลังจาก 10 ถึง 12 ชั่วโมงใน 38.5 C ในบรรยากาศ 5 เปอร์เซ็นต์ ( ปริมาตร / ปริมาตร ) ซึ่ง humidifled CO2 ในอากาศzygotes ถูกถอดออกจากการพัฒนาต่อของ Cumulus เซลล์โดย pipetting ใน tcm-199 ด้วยซ้ำฮีเปส และอยู่ในกลุ่มของ 20 ใน 90 microdrops มิลลิลิตรของเหลวสังเคราะห์ท่อนำไข่ [ 15 ] เสริมด้วย 5 % ( ปริมาตร / ปริมาตร )แม่วัวเลือด 5% BSA และ 0.2% โซเดียมไพรูเวทที่หุ้มด้วยน้ำมันแร่ วัฒนธรรมที่ถูกวางไว้ในจานถุงปิดผนึกด้วยบรรยากาศของ 5 % O2 CO2 5 % และ 90 %2 ช่วงที่วัฒนธรรมทั้งหมดวัฒนธรรมอาหารบางส่วนถูกแทนที่ด้วย 50 มิลลิลิตรสด ) ที่ 48 , 96 และ 144 ชั่วโมงหลังการปฏิสนธิ .ก่อนที่แต่ละ feedings เหล่านี้ , แตกแยก , มอรูล่า และ บลาสโตซิสผลทดลองพบว่า