Sensitivity assaysThe sensitivity o

Sensitivity assays
The sensitivity of the m-PCR assay was tested using serial
dilutions of each bacterial culture prepared from overnight
cultures in TSB. Each target pathogen was decimally
diluted (109, 108, 107, 106, 105, 104, 103, 102, 10,10 cfu/
mL) in sterile saline. DNA was isolated from 1 mL of each
dilution and subsequently tested using the multiplex PCR
method. Each sampling experiment consisted of triplicate
tests with two replicates (each experiment with two replicates
at different time intervals).
Evaluation of efficiency
For simultaneous detection of the five target pathogens,
evaluation of the efficiency of the m-PCR was carried out
using DNA template solution including a mixture having
the same volume of DNA extract from each target pathogen.
The m-PCR was developed, as described above on the
mixture of DNA extracts from the five pathogens, and
compared to the same test checked on the individual
pathogens.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความไว assays
ทดสอบความไวของการทดสอบ m PCR ใช้ประจำ
dilutions ของแต่ละวัฒนธรรมแบคทีเรียที่เตรียมจากแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์
วัฒนธรรมใน TSB แต่ละการศึกษาเป้าหมายถูก decimally
ผสม (109, 108, 107, 106, 105, 104, 103, 102, 10, 10 cfu /
mL) ในน้ำเกลือฆ่าเชื้อ ดีเอ็นเอที่ถูกแยกจาก 1 mL แต่ละ
เจือจางและผ่านการทดสอบมาใช้ PCR ต่าง ๆ ๅ
วิธีการ ทดลองสุ่มตัวอย่างแต่ละประกอบด้วย triplicate
ทดสอบเหมือนกับสอง (กับสองเหมือนกับการทดลองแต่ละ
ที่ช่วงเวลาต่าง ๆ)
ประเมินประสิทธิภาพ
พร้อมตรวจโรคเป้าหมายห้า,
ได้รับการดำเนินการประเมินประสิทธิภาพของ m PCR
ใช้โซลูชันแบบดีเอ็นเอรวมทั้งมีการผสม
ไดรฟ์ข้อมูลเดียวกันของดีเอ็นเอแยกจากแต่ละการศึกษาเป้าหมาย
M-PCR ได้รับการพัฒนา ตามที่อธิบายไว้ข้างบน
ส่วนผสมของดีเอ็นเอแยกจากโรคทั้งห้า และ
เมื่อเทียบกับการทดสอบเดียวกันที่ตรวจสอบในแต่ละ
โรค

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความไวของการตรวจ
ความไวของการทดสอบ M-PCR ได้รับการทดสอบโดยใช้อนุกรม
เจือจางของแต่ละวัฒนธรรมแบคทีเรียที่เตรียมจากค้างคืน
วัฒนธรรมใน TSB เป้าหมายเชื้อโรคแต่ละชนิดถูก decimally
เจือจาง (109, 108, 107, 106, 105, 104, 103, 102, 10, 10 โคโลนี /
มิลลิลิตร) ในน้ำเกลือปลอดเชื้อ ดีเอ็นเอที่แยกได้จาก 1 มิลลิลิตรของแต่ละ
เจือจางและต่อมาทดสอบโดยใช้วิธี PCR หลาย
วิธี การทดลองเก็บตัวอย่างแต่ละประกอบด้วยเพิ่มขึ้นสามเท่า
การทดสอบกับสองซ้ำ (ทดสอบกับสองซ้ำกัน
ในช่วงเวลาที่แตกต่างกัน)
การประเมินผลที่มีประสิทธิภาพ
สำหรับการตรวจหาพร้อมกันของห้าเชื้อโรคเป้าหมาย
การประเมินประสิทธิภาพของ M-PCR ได้ดำเนินการ
โดยใช้การแก้ปัญหาแบบดีเอ็นเอ รวมทั้งส่วนผสมที่มี
ปริมาณเดียวกันของสารสกัดดีเอ็นเอจากเป้าหมายเชื้อโรคแต่ละชนิด
M-PCR ได้รับการพัฒนาตามที่อธิบายไว้ข้างต้นใน
ส่วนผสมของสารสกัดดีเอ็นเอจากห้าเชื้อโรคและ
เมื่อเทียบกับการทดสอบเดียวกันการตรวจสอบในแต่ละ
เชื้อโรค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทดสอบความไวของการทดสอบ m-pcr

วิธีการทดสอบโดยใช้อนุกรมของแต่ละวัฒนธรรมเตรียมแบคทีเรียจากวัฒนธรรมค้างคืน
ใน TSB . แต่ละเชื้อโรคเป้าหมาย decimally
เจือจาง ( 109 , 107 , 108 , 106 , 105 , 104 , 103 , 102 , 10 , 10 CFU /
มล. ) ในน้ำเกลือปลอดเชื้อ . ดีเอ็นเอที่แยกได้จาก 1 มิลลิลิตรของแต่ละ
เจือจางและต่อมาทดสอบโดยใช้วิธี PCR
multiplexแต่ละคนแบ่งการทดสอบทำสำเนาสามฉบับ
2 ( แต่ละการทดลองซ้ำ 2 ซ้ำในช่วงเวลาที่ต่างกัน


) การประเมินประสิทธิภาพการตรวจหาเชื้อโรคห้าเป้าหมายการ
การประเมินประสิทธิภาพของ m-pcr ได้ดําเนินการใช้สารละลายดีเอ็นเอแม่แบบ

รวมถึงส่วนผสมที่มีปริมาณเดียวกันของสารสกัด ดีเอ็นเอจากเชื้อ
แต่ละเป้าหมายการ m-pcr พัฒนาตามที่อธิบายไว้ข้างต้นในส่วนผสมของดีเอ็นเอที่สกัดจาก
5
เมื่อเทียบกับเชื้อโรค และแบบ ทดสอบตรวจสอบเชื้อโรคแต่ละคน