Maintenance of microorganism and lipase production
Bacillus coagulans MTCC-6375 was grown in a broth
containing (gL¡1); NaNO3 3; K2HPO4 0.1; MgSO4·7H2O
0.5; KCl 0.5, FeSO4·7H2O, yeast extract 5.0, and cottonseed
oil (1%, v/v), pH 7.0§0.1. The medium was autoclaved at
1.1 bar pressure for 18 min at 121 °C. When the organism
was cultivated in MB broth at 34 °C with shaking (150 rpm)
for 48 h, the harvested broth (10,000g for 20 min at 4 °C)
showed maximum lipase activity. The cell pellet was discarded
and supernatant was Wltered through a 0.22 m
membrane. Approximately, 800ml of filtrate was concentrated
to 25ml by lyophilization (FTS Freeze Dryer, USA)
and the protein content was measured [11]. This concentrated
Wltrate was referred as crude lipase (CL). The CL
sourced from B. coagulans was puriWed by successive
ammonium sulfate salt precipitation, DEAE–cellulose
anion exchange [12], and hydrophobic interaction (Octyl-
Sepharose) chromatography to obtain a highly homogeneous
protein.
การบำรุงรักษาของจุลินทรีย์และการผลิตเอนไซม์ไลเปส
Bacillus coagulans MTCC-6375 ได้รับการปลูกในน้ำซุป
ที่มี (gL¡1); NaNO3 3; K2HPO4 0.1; MgSO4 · 7H2O
0.5; KCl 0.5, FeSO4 · 7H2O, สารสกัดจากยีสต์ 5.0 และฝ้าย
น้ำมัน (1% v / v), พีเอช7.0§0.1 ขนาดกลางที่ได้รับการอบไอน้ำ
แรงดัน 1.1 บาร์ 18 นาทีที่ 121 องศาเซลเซียส เมื่อมีชีวิตที่
ได้รับการปลูกฝังในน้ำซุป MB ที่ 34 ° C มีการเขย่า (150 รอบต่อนาที)
เป็นเวลา 48 ชั่วโมง, น้ำซุปเก็บเกี่ยว (10,000g 20 นาทีที่ 4 ° C)
แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสสูงสุด ตะกอนเซลล์ถูกทิ้ง
และถูกใส Wltered ผ่าน 0.22? เมตร
เมมเบรน ประมาณ 800ml ของกรองเข้มข้น
เพื่อ 25ml โดย lyophilization (FTS ตรึงเครื่องเป่าสหรัฐอเมริกา)
และปริมาณโปรตีนวัด [11] นี้มีความเข้มข้น
Wltrate ถูกเรียกว่าเป็นเอนไซม์ไลเปสดิบ (CL) CL
มาจาก B. coagulans ถูก puriWed โดยต่อเนื่อง
แอมโมเนียมซัลเฟตตกตะกอนเกลือ, DEAE-เซลลูโลส
แลกเปลี่ยนไอออน [12] และการมีปฏิสัมพันธ์ชอบน้ำ (Octyl-
Sepharose) โคที่จะได้รับเป็นเนื้อเดียวกันอย่างสูง
โปรตีน
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)