dead fish material, i.e. the infect

dead fish material, i.e. the infection threat posed by a salmon that died
due to ISA.
Our findings show that ISA virions may be retrieved from heart tissue
after 5 days of decomposition in freshwater at 7 °C, but not in fish
decomposed at a higher temperature (18 °C). Initially, gill tissue was
sampled prior to decomposition for examination by real-time RT-PCR.
At the end of the experiment, however, itwas not possible to obtain further
gill samples due to the high degree of decomposition in this tissue.
It was only the heart tissue that retained its structural integrity, hence
this tissue was sampled instead. Although the levels of RNA at the
start and the end of the experiment are not directly comparable, as
these were from different tissues, they show that high levels of viral
RNA similar to the levels detected in gills could be detected at the end
of the experiment. The presence of ISAV particles in heart tissue was
determined by inoculation on to ASK cells, tested with IFAT and by
injection into fish, and further verified by sequencing.
No ISA virus was found in the dead fish allowed to decompose at
18 °C. The loss of infectivity in the 18 °C group is consistent with the
results found by Falk et al. (1997) in a laboratory study and with field
observations described in Poppe et al. (1999). It is also well known
that both enzymatic and microbiological activities are greatly
influenced by temperature, and faster degradation is therefore to be
expected.
Water samples examined by real-time RT-PCR showed that most
water samples were ISA virus RNA positive throughout the experiment
and that the RNA levels in these correlatedwith the disease status of the
fish (i.e., higher viral RNA levels in fish that died of ISA vs. moribund
fish). Real-time RT-PCR analysis of water samples also showed that
the viral RNA levels in water remained relatively constant during the
decomposition process, and in fact a tendency towards an increase in
viral RNA levels could be seen from 48 h onwards. This is most likely
due to breakdown of tissues that will free viral RNA. However, all
water samples examined from these fish during the decomposition
process were negative for infectious virus when inoculated on to cell
culture. It cannot be excluded that this could be due to the loss of viable
virus during filtration. To examine this further the same concentrated filtered
water samples were injected into naïve salmon smolts (n = 150).
Such a fish challenge test can be considered as the most sensitive infectivity
test applicable as it has been reported that 10 virus particles are
sufficient to establish infection via intraperitoneal infection (Gregory
et al., 2009). The fish challenge confirmed the findings in cell culture
since none of the fish became infected following injection of water

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปลาวัสดุ เช่นติดคุกคาม โดยปลาแซลมอนที่ตายตาย
เนื่องจาก ISA.
ผลการวิจัยของเราแสดงว่า ISA virions อาจสามารถดึงจากเนื้อเยื่อหัวใจ
หลังจาก 5 วันของการแยกส่วนประกอบในน้ำจืด ที่ 7 ° C แต่ไม่ใช่ ในปลา
แยกที่อุณหภูมิสูง (18 ° C) ตอนแรก เนื้อเยื่อเหงือกถูก
ตัวอย่างก่อนที่จะแยกส่วนประกอบในการตรวจสอบ โดย RT แบบเรียลไทม์-PCR
จบทดลอง อย่างไรก็ตาม ไม่สามารถรับเพิ่มเติม
เหงือกตัวอย่างเนื่องจากระดับสูงของการแยกส่วนประกอบในเนื้อเยื่อนี้
ก็เฉพาะหัวใจเนื้อเยื่อที่สะสมตัวโครงสร้างสมบูรณ์ ดังนั้น
เนื้อเยื่อนี้เป็นตัวอย่างแทน แม้ว่าระดับของอาร์เอ็นเอในการ
เริ่มต้นและสิ้นสุดการทดลองไม่เทียบตรง เป็น
เหล่านี้ได้จากเนื้อเยื่ออื่น พวกเขาแสดงที่สูงระดับไวรัส
อาร์เอ็นเอที่คล้ายกับระดับตรวจพบใน gills พบจบ
การทดลองได้ สถิตอยู่ของอนุภาค ISAV ในเนื้อเยื่อหัวใจ
ตาม inoculation ไปถามเซลล์ ทดสอบ IFAT และโดย
ฉีดเข้าไปในปลา และตรวจสอบเพิ่มเติม ตามลำดับ
พบไวรัสไม่มี ISA ในอนุญาตให้เปื่อยที่ปลาตาย
18 องศาเซลเซียส การสูญเสียของ infectivity ในกลุ่ม 18 ° C มีความสอดคล้องกับ
พบโดยเซฟ et al. (1997) ในการศึกษาปฏิบัติ และมีผลลัพธ์
สังเกตอธิบายใน Poppe et al. (1999) ก็ยังรู้จัก
กิจกรรมเอนไซม์ในระบบ และทางจุลชีววิทยามาก
โดยอุณหภูมิที่มีผลต่อ และย่อยสลายเร็วจึงต้อง
คาดว่า
ตัวอย่างน้ำตรวจสอบ โดยแบบเรียลไทม์ RT-PCR พบว่าส่วนใหญ่
น้ำตัวอย่างมีอาร์เอ็นเอไวรัส ISA บวกทดลอง
และที่อาร์เอ็นเอที่ระดับใน correlatedwith เหล่านี้สถานะโรค
ปลา (เช่น ไวรัสอาร์เอ็นเอระดับสูงในปลาที่ตายของ ISA เทียบกับ moribund
ปลา) แบบเรียลไทม์ RT-PCR วิเคราะห์ตัวอย่างน้ำยังพบว่า
ระดับอาร์เอ็นเอไวรัสในน้ำยังคงค่อนข้างคงในระหว่าง
แยกส่วนประกอบกระบวน การ และ ในความเป็นจริงมีแนวโน้มไปทางการเพิ่ม
ระดับอาร์เอ็นเอไวรัสที่สามารถเห็นได้จาก h 48 เป็นต้นไป ไม่ถูก
เนื่องจากการแบ่งเนื้อเยื่อที่จะฟรีอาร์เอ็นเอไวรัส อย่างไรก็ตาม ทั้งหมด
น้ำตัวอย่างที่ตรวจสอบจากปลาเหล่านี้ระหว่างการเน่า
กระบวนการถูกลบการติดเชื้อไวรัสเมื่อ inoculated ระบบเซลล์
วัฒนธรรม ไม่สามารถแยกออกว่าอาจเนื่องจากการสูญเสียการทำงาน
ระหว่างกรองไวรัสได้ การตรวจสอบนี้ อีกเหมือนกันเข้มข้นกรอง
ตัวอย่างน้ำถูกฉีดเข้าไปใน smolts ขำน่าแซลม่อน (n = 150) .
เช่นปลาท้าทายทดสอบจะถือว่าเป็น infectivity สำคัญสุด
ทดสอบใช้เท่าที่มีรายงานว่า มีอนุภาคไวรัส 10
พอสร้างเชื้อผ่านเชื้อ intraperitoneal (เกรกอรี
et al., 2009) ท้าทายปลาได้รับการยืนยันการค้นพบวัฒนธรรมเซลล์
เนื่องจากปลาไม่มีกลายเป็นติดเชื้อต่อการฉีดน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุปลา ตาย เช่น การติดเชื้อ การคุกคามโดยปลาแซลมอน ที่เสียชีวิตเนื่องจาก ISA
.
ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่าเป็นไวรัสอาจจะดึงมาจาก
เนื้อเยื่อหัวใจ หลังจาก 5 วันของการย่อยสลายในน้ำจืดที่ 7 ° C แต่ไม่ได้ปลา
ย่อยสลายที่อุณหภูมิสูง ( 18 ° C ) ในเนื้อเยื่อเหงือกคือ
ตัวอย่างก่อนการสอบจริงโดย RT-PCR .
เมื่อสิ้นสุดการทดลองแต่มันเป็นไปไม่ได้ที่จะได้รับตัวอย่างเหงือกต่อไป
เนื่องจากระดับสูงของการย่อยสลายเนื้อเยื่อนี้ .
มันเป็นเพียงเนื้อเยื่อหัวใจที่สะสมของโครงสร้างความสมบูรณ์จึง
เนื้อเยื่อนี้เป็นตัวอย่างแทน แม้ว่าระดับของอาร์เอ็นเอที่
เริ่มต้นและสิ้นสุดการทดลองจะไม่ได้เปรียบโดยตรงเช่น
เหล่านี้จากเนื้อเยื่อที่แตกต่างกัน พวกเขาแสดงให้เห็นว่าระดับของไวรัส
ซึ่งใกล้เคียงกับระดับที่ตรวจพบในเหงือกสามารถตรวจพบได้ในตอนท้าย
ของการทดลอง การปรากฏตัวของ isav อนุภาคในเนื้อเยื่อหัวใจ ถูกกำหนดโดยการฉีดวัคซีนใน
ถามเซลล์ ทดสอบกับ ifat โดย
ฉีดเข้าไป ปลา และเพิ่มเติมได้โดยลำดับ .
ไม่ซ่า พบไวรัสในปลาเน่าที่ตายไปแล้วให้
18 ° Cการสูญเสียของการติดเชื้อใน 18 ° C กลุ่มสอดคล้องกับ
พบโดยฟอล์ค et al . ( 1997 ) ในการศึกษาในห้องปฏิบัติการและภาคสนาม
สังเกตอธิบายในป็อป et al . ( 1999 ) มันเป็นที่รู้จักกันว่า กิจกรรมของเอนไซม์ และจุลินทรีย์ทั้งสอง

อย่างมากโดยได้รับอิทธิพลจากอุณหภูมิและการสลายตัวเร็วขึ้นจึงได้

ที่คาดไว้ตัวอย่างน้ำตรวจสอบโดยวิธี RT-PCR ) แบบเรียลไทม์ พบว่า ตัวอย่างน้ำมากที่สุด คือ ISA ไวรัส RNA บวกตลอด

และการทดลองยีนในระดับเหล่านี้มีภาวะของโรค เช่น ไวรัส
ปลาสูงกว่าระดับ RNA ในปลาที่ตายของ ISA และร่อแร่
ปลา ) 4 . เวลาจริงการวิเคราะห์ตัวอย่างน้ำพบว่า
ไวรัส RNA ในระดับน้ำยังคงค่อนข้างคงที่ในช่วง
กระบวนการย่อยสลายได้และในความเป็นจริงแนวโน้มไปสู่การเพิ่มขึ้นในระดับอาร์เอ็นเอไวรัส
อาจจะเห็นจาก 48 ชั่วโมงเป็นต้นไป นี้เป็นส่วนใหญ่เนื่องจากการสลาย
ของเนื้อเยื่อที่ปล่อยไวรัส RNA อย่างไรก็ตาม ตัวอย่างน้ำจากปลาเหล่านี้ในระหว่างการตรวจสอบทั้งหมด

การย่อยสลายกระบวนการที่เป็นลบ เมื่อเชื้อไวรัสในเซลล์เพาะเลี้ยง

มันไม่สามารถแยกออกว่า นี้อาจจะเนื่องจากการสูญเสียของรัฐ
ไวรัสในการกรอง ตรวจสอบนี้อีกเหมือนกันที่เข้มข้นที่กรอง
ตัวอย่างน้ำถูกส่งเข้าไปในนา ไตได้ปลาแซลมอน smolts ( n = 150 ) .
เป็นปลาที่ท้าทายแบบทดสอบสามารถถือเป็น
การติดเชื้อไวที่สุดทดสอบใช้ได้ตามที่ได้รับรายงานว่า 10 อนุภาคไวรัส
เพียงพอที่จะสร้างการติดเชื้อการติดเชื้อในลำไส้ผ่าน ( Gregory
et al . , 2009 ) ปลาท้าทายยืนยันผลการวิจัยใน
เซลล์ตั้งแต่ไม่มีปลากลายเป็นติดเชื้อตามฉีดน้ำ