2.2. In vitro inhibition assays for

2.2. In vitro inhibition assays for P. larvae
Inhibitory activities of the LAB against P. larvae (RIAS No. P1
GIFU-1 strain) were investigated by in vitro inhibition assay as described
previously (Yoshiyama and Kimura, 2009). Briefly, vegetative
forms of P. larvae were cultured at 35 C for 48 h in Brain–
Heart Infusion (BHI) medium (Difco, USA) and adjusted to a concentration
of OD600 = 0.5. These bacterial suspensions of P. larvae
(500 ll) were spread over the surface of each BHI agar plate and
three replicate plates were prepared as previously described by
Evans and Armstrong (2005). Total of 208 LAB were cultured on
MRS agar plates at 35 C for 3 days before being suspended in sterile
distilled water adjusted to a concentration of OD600 = 0.5. Each
LAB suspension (20 ll) was then placed onto sterile paper filter
disks (7 mm diameter, Whatman™ USA), and the disks were
placed on the BHI plates spread with P. larvae. After incubation
at 35 C for 48 h, plates were examined for inhibition halos. For
those plates with inhibition zones, the diameters were measured
(mean ± standard deviation) from three independent experiments.
Sterile distilled water was used as a negative control and tetracycline
(10 lg/ml) was used as a positive control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 การเพาะเลี้ยงยับยั้ง assays สำหรับตัวอ่อน P.ลิปกลอสไขกิจกรรมห้องปฏิบัติการกับตัวอ่อน P. (RIAS หมายเลข P1สายพันธุ์ GIFU-1) ยับยั้งการในวิเคราะห์ถูกสอบสวนตามก่อนหน้านี้ (Yoshiyama และคิมุระโย 2009) สั้น ๆ ผักเรื้อรังรูปแบบของตัวอ่อน P. มีอ่างที่ 35 C สำหรับ h 48 ในสมอง-หัวใจกลางคอนกรีต (BHI) (Difco สหรัฐอเมริกา) และปรับปรุงให้เข้มข้นของ OD600 = 0.5 บริการเหล่านี้จากแบคทีเรียของ P. ตัวอ่อน(500 จะ) ถูกแพร่กระจายผ่านพื้นผิวของจานแต่ละ agar BHI และแผ่น 3 replicate ได้เตรียมไว้ก่อนหน้านี้เป็น อธิบายโดยอีวานส์และอาร์มสตรอง (2005) จำนวน 208 ห้องปฏิบัติมีอ่างในMRS agar แผ่นที่ 35 C 3 วันก่อนที่จะถูกหยุดชั่วคราวในกอซกลั่นน้ำปรับความเข้มข้นของ OD600 = 0.5 แต่ละห้องปฏิบัติการระงับ (20 ll) ถูกวางลงบนกระบอกกระดาษกรองดิสก์ (7 มม.เส้นผ่าศูนย์กลาง สหรัฐอเมริกา™ Whatman), และดิสก์วางบนแผ่น BHI แพร่กระจาย ด้วยตัวอ่อน P. หลังจากบ่มที่ 35 C สำหรับ 48 h แผ่นถูกตรวจสอบสำหรับ halos ยับยั้ง สำหรับแผ่นเหล่านั้นยับยั้งโซน สมมาตรถูกวัด(หมายถึง ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน±) จากการทดลองอิสระ 3ใช้น้ำกลั่นฆ่าเชื้อเป็นลบควบคุมและเตตราไซคลีน(10 lg/มล) ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 ในการตรวจการยับยั้งการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อตัวอ่อนพีสำหรับกิจกรรมยับยั้งของ LAB กับตัวอ่อนพี (ฉบับที่ RIAS P1 Gifu-1 สายพันธุ์) ได้รับการตรวจสอบโดยในหลอดทดลองทดสอบการยับยั้งตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(Yoshiyama คิมูระและ 2009) สั้น ๆ , พืชรูปแบบของตัวอ่อนพีเลี้ยงที่35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงใน Brain- หัวใจ Infusion (BHI) กลาง (Difco สหรัฐอเมริกา) และปรับเปลี่ยนเพื่อความเข้มข้นของOD600 = 0.5 เหล่านี้แขวนลอยแบคทีเรียตัวอ่อนพี(500 LL) กำลังแผ่กระจายไปทั่วพื้นผิวของแผ่นแต่ละ BHI วุ้นและสามแผ่นซ้ำได้จัดทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยอีแวนส์และอาร์มสตรอง(2005) รวม 208 LAB ถูกเพาะเลี้ยงบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS ที่ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 วันก่อนที่จะถูกระงับในการฆ่าเชื้อน้ำกลั่นปรับให้มีความเข้มข้นของOD600 = 0.5 แต่ละระงับ LAB (20 LL) ถูกวางไว้แล้วลงบนกระดาษกรองหมันดิสก์(7 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางเบอร์™ USA) และดิสก์ที่ถูกวางไว้บนแผ่นBHI แพร่กระจายตัวอ่อนพี หลังจากการบ่มที่ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง, จานมีการตรวจสอบสำหรับรัศมีการยับยั้ง สำหรับแผ่นที่มีโซนยับยั้งเส้นผ่าศูนย์กลางถูกวัด(ค่าเฉลี่ย±ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน) จากสามทดลองที่เป็นอิสระ. น้ำกลั่นปราศจากเชื้อถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบและ tetracycline (10 LG / ml) ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . ในหลอดทดลอง ยับยั้ง หรือสำหรับหน้าหนอน
กิจกรรมยับยั้งจากแล็บ กับหน้าหนอน ( Ria . P1
gifu-1 เมื่อย ) ได้ถูกศึกษาโดยวิธีในหลอดทดลองและอธิบาย
ก่อนหน้านี้ ( โยชิยาม่า และคิมูระ , 2009 ) สั้น ๆ , รูปแบบและ
P . ~ i ) เลี้ยงที่ 35  C 48 ชั่วโมง สมองและหัวใจ
แช่ ( BHI ) ขนาดกลาง ( difco , USA ) และปรับระดับความเข้มข้นของ od600
= 0.5ช่วงล่างของตัวอ่อนเหล่านี้แบคทีเรีย P
( 500 จะถูกกระจายไปทั่วพื้นผิวของแต่ละ BHI agar plate และ
3 ทำซ้ำแผ่นเตรียมไว้ก่อนหน้านี้เป็นอธิบายโดย
อีแวนส์และอาร์มสตรอง ( 2005 ) ทั้งหมด 208 แล็บเพาะเลี้ยงบน
. mr จาน 35  C เป็นเวลา 3 วัน ก่อนจะถูกระงับในหมัน
น้ำกลั่นปรับความเข้มข้นของ od600 = 0.5 แต่ละ
ห้องปฏิบัติการชั่วคราว ( 20 จะ ) ถูกวางลงบนกระดาษปลอดเชื้อกรอง
ดิสก์ ( เส้นผ่าศูนย์กลาง 7 มม. whatman ™ USA ) และดิสก์ถูก
วางไว้บน BHI แผ่นกระจายกับพี ตัวอ่อน หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 
H , แผ่นมีวัตถุประสงค์เพื่อยับยั้งรัศมี . สำหรับผู้ที่มีการยับยั้ง
แผ่นโซน เส้นผ่าศูนย์กลางวัด
( ค่าเฉลี่ยส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน± )
3 การทดลองที่เป็นอิสระฆ่าเชื้อน้ำถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบและ tetracycline
( 10 ) / ml ) ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก