6.3. Detergent-free methods – the e

6.3. Detergent-free methods – the emergence of SMALPs

Although all crystal structures of membrane proteins to date, including those synthesized in yeast, have used detergents for extraction of the protein from the lipid bilayer, the use of detergents is not without problems. As mentioned in Section 6.1, screening for conditions and detergents that effectively extract the protein yet retain structure and stability can be difficult, time consuming and expensive. The environment produced by a detergent micelle does not fully mimic the lipid bilayer environment, as not only does the bilayer provide lateral pressure to stabilize the protein structure but interactions between the protein and its annular lipids can affect protein function. Notably, the most effective detergents for extraction are often not the best detergents for crystal formation. Recently a new detergent-free method for extraction of membrane proteins has emerged using SMA co-polymers (Fig. 5). The SMA inserts into biological membranes and forms small discs of lipid bilayer (10–12 nm) surrounded by the polymer, termed SMALPs (SMA lipid particles) [9] and [10], also known as lipodisqs [98] or native nanodiscs [11]. Membrane proteins within the SMALPs retain their annular lipid bilayer environment [9], [11] and [99], yet the particles are small, stable and water soluble, allowing standard affinity chromatography methods to be used to purify a protein of interest

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

6.3. น้ำยาฟรีวิธี – การเกิดขึ้นของ SMALPsแม้ว่าโครงสร้างผลึกทั้งหมดของเมมเบรนโปรตีนวันที่ รวมทั้งสังเคราะห์ในยีสต์ ได้ใช้ผงซักฟอกสำหรับสกัดโปรตีนจาก bilayer ไขมัน การใช้ผงซักฟอกไม่ได้ไม่ มีปัญหา ดังกล่าวในส่วน 6.1 คัดกรองเงื่อนไขและผงซักฟอกที่มีประสิทธิภาพแยกโปรตีน ยังรักษาโครงสร้างและความมั่นคง ได้ยาก ใช้เวลานาน และราคาแพง สิ่งแวดล้อมผลิต โดย micelle ผงซักฟอกเต็มที่เลียนแบบไขมัน bilayer สิ่งแวดล้อม ไม่เพียงไม่ให้ bilayer ดันด้านข้างเพื่อรักษาเสถียรภาพของโครงสร้างโปรตีน แต่ปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนและไขมันของแหวนมีผลต่อฟังก์ชันของโปรตีน ยวด ผงซักฟอกที่มีประสิทธิภาพสูงสุดสำหรับสกัดมักจะไม่ได้ผงซักฟอกที่ดีที่สุดสำหรับการก่อตัวของคริสตัล เพิ่ง ฟรีผงซักฟอกวิธีการใหม่ในการสกัดโปรตีนเมมเบรนได้โผล่ออกมาโดยใช้ SMA ร่วมโพลิเมอร์ (5 รูป) SMA แผ่นเล็ก ๆ ของไขมัน bilayer (10-12 nm) ล้อมรอบ ด้วยโพลีเมอร์ เรียกว่า SMALPs (อนุภาคไขมัน SMA) แทรกไปเยื่อทางชีวภาพ และการ [9] [10], และเรียกว่า lipodisqs [98] หรือ nanodiscs พื้นเมือง [11] เมมเบรนโปรตีนภายใน SMALPs การรักษาสภาพไขมันแหวน bilayer แวดล้อม [9], [11] และ [99], แต่อนุภาคมีขนาดเล็ก มั่นคงและช่วยให้ความสัมพันธ์ของมาตรฐานวิธี chromatography เพื่อใช้ให้บริสุทธิ์โปรตีนที่น่าสนใจ ละลายน้ำได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

6.3 วิธีผงซักฟอกฟรี - การเกิดขึ้นของ SMALPs

แม้ว่าโครงสร้างผลึกทั้งหมดของโปรตีนวันที่รวมทั้งผู้ที่สังเคราะห์ในยีสต์ได้ใช้ผงซักฟอกในการสกัดโปรตีนจากไขมัน bilayer การใช้ผงซักฟอกไม่ได้โดยไม่มีปัญหา ตามที่ระบุไว้ในมาตรา 6.1 การตรวจคัดกรองสำหรับเงื่อนไขและผงซักฟอกที่มีประสิทธิภาพสารสกัดโปรตีนยังรักษาโครงสร้างและความมั่นคงอาจเป็นเรื่องยากใช้เวลานานและมีราคาแพง สภาพแวดล้อมที่ผลิตโดยไมเซลล์ผงซักฟอกไม่เต็มเลียนแบบสภาพแวดล้อมไขมัน bilayer เช่นไม่เพียง แต่ bilayer ให้ความดันด้านข้างเพื่อรักษาเสถียรภาพของโครงสร้างโปรตีน แต่การมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนและไขมันเป็นรูปวงแหวนที่สามารถส่งผลกระทบต่อการทำงานของโปรตีน ยวดผงซักฟอกที่มีประสิทธิภาพสูงสุดในการสกัดมักจะไม่ได้เป็นผงซักฟอกที่ดีที่สุดสำหรับการก่อผลึก เมื่อเร็ว ๆ นี้เป็นวิธีผงซักฟอกใหม่ฟรีสำหรับการสกัดโปรตีนได้โผล่ออกมาโดยใช้ SMA ร่วมโพลิเมอร์ (รูปที่. 5) SMA แทรกเข้าไปในเนื้อเยื่อชีวภาพและรูปแบบแผ่นเล็ก ๆ ของไขมัน bilayer (10-12 นาโนเมตร) ล้อมรอบด้วยลิเมอร์ที่เรียกว่า SMALPs (SMA อนุภาคไขมัน) [9] และ [10] ยังเป็นที่รู้จัก lipodisqs [98] หรือ nanodiscs พื้นเมือง [ 11] โปรตีนภายใน SMALPs รักษาสภาพแวดล้อมของพวกเขาไขมัน bilayer วงแหวน [9] [11] และ [99] แต่อนุภาคที่มีขนาดเล็กที่มีความเสถียรและละลายน้ำได้ช่วยให้ความสัมพันธ์วิธีโครมาโตมาตรฐานที่จะใช้ในการชำระล้างโปรตีนที่น่าสนใจ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

6.3 . ผงซักฟอกและการเกิดขึ้นของ smalps วิธีฟรีแต่โครงสร้างของผลึกของโปรตีนเมมเบรนอาจรวมถึงผู้ที่สังเคราะห์ได้ในยีสต์ ใช้ผงซักฟอกสำหรับการสกัดโปรตีนจาก bilayer ไขมัน , การใช้ผงซักฟอกก็ไม่ได้ปราศจากปัญหา ตามที่กล่าวไว้ในมาตรา 6.1 , การตรวจสภาพและผงซักฟอกที่มีประสิทธิภาพสกัดโปรตีนยังรักษาโครงสร้างและเสถียรภาพได้ยาก ใช้เวลานานและมีราคาแพง สภาพแวดล้อมที่ผลิตโดยผงซักฟอกมิเซลไม่เต็มที่เลียนแบบ bilayer ไขมันสภาพแวดล้อมที่ไม่เพียงสองชั้นให้ความดันด้านข้างเพื่อรักษาเสถียรภาพของโครงสร้างโปรตีน แต่ปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนและเป็นไขมันสามารถส่งผลกระทบต่อการทำงานของโปรตีน ยวด , ผงซักฟอกที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับการสกัดมักจะไม่ดีที่สุดสำหรับการสร้างผงคริสตัล เมื่อเร็ว ๆนี้ใหม่ผงซักฟอกฟรีวิธีการสำหรับการสกัดโปรตีนเมมเบรนมีชุมนุมใช้ SMA โคโพลิเมอร์ ( ภาพที่ 5 ) SMA แทรกในเมมเบรนทางชีวภาพและรูปแบบแผ่นดิสก์ขนาดเล็กของไขมัน bilayer ( 10 – 12 nm ) ล้อมรอบด้วยพอลิเมอร์ เรียกว่า smalps ( SMA ของอนุภาค ) [ 9 ] และ [ 10 ] , ยังเป็นที่รู้จัก lipodisqs [ 98 ] หรือ nanodiscs พื้นเมือง [ 11 ] เมมเบรนโปรตีนภายใน smalps เก็บรักษาเป็น bilayer ไขมันสิ่งแวดล้อม [ 9 ] , [ 11 ] และ [ 99 ] แต่อนุภาคเล็ก มีเสถียรภาพ และละลายน้ำได้ ช่วยให้วิธีโครมาโตกราฟีโดยใช้มาตรฐานที่จะใช้ในการทำให้โปรตีนที่น่าสนใจ