For the identification of Gram-negative strains the representatives of the different bacteria were subjected to 16S rRNA sequence. Genomic DNAs from the bacterial strains were prepared as described previously (Leblond-Bourget et al., 1996). Total DNA was isolated using the Wizard Genomic DNA Purification Kit (Promega, USA) in accordance with the instructions of the manufacturer. PCR amplification of 16S rRNA was performed by using reagents of Fermentas, primers designed in Center for Identification and Estimation of Biotechnological Potential of Microorganisms, Institute of Genetics and Selection of Industrial Microorganisms (IGSIM, Moscow, Russia) and amplifier “Master cycler gradient” (Eppendorf, FRG).
เพื่อระบุตัวตนของแกรมลบสายพันธุ์ตัวแทนของแบคทีเรียที่แตกต่างกันถูกยัดเยียดให้ 16S rRNA ลำดับ ดีเอ็นเอจีโนมจากสายพันธุ์แบคทีเรียที่ถูกจัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Leblond-เช et al., 1996) ดีเอ็นเอทั้งหมดที่แยกได้โดยใช้ตัวช่วยสร้างจีโนมดีเอ็นเอบริสุทธิ์ Kit (Promega, USA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ขยาย PCR ของ 16S rRNA ได้รับการดำเนินการโดยใช้น้ำยาของ Fermentas, ไพรเมอร์ได้รับการออกแบบในศูนย์การระบุและการประเมินศักยภาพทางเทคโนโลยีชีวภาพของจุลินทรีย์สถาบันพันธุศาสตร์และการคัดเลือกจุลินทรีย์อุตสาหกรรม (IGSIM, มอสโก, รัสเซีย) และเครื่องขยายเสียง "นาย Cycler ลาด" ( Eppendorf, FRG)
การแปล กรุณารอสักครู่..
เพื่อจำแนกสายพันธุ์แบคทีเรียแกรมลบตัวแทนของแบคทีเรียที่แตกต่างกันถูกลำดับ 16S rRNA . จีโนมจำเพาะจากสายพันธุ์แบคทีเรียที่เตรียมไว้ก่อนหน้านี้ ( เลบลอนด์ Bourget et al . , 1996 ) ดีเอ็นเอทั้งหมดได้ใช้ตัวช่วยสร้างดีเอ็นเอบริสุทธิ์ Kit ( promega , USA ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตPCR แบบเบส 16S rRNA ในจังหวัดราชบุรี โดยการใช้สารเคมีของ fermentas , ไพรเมอร์ที่ออกแบบในศูนย์สำหรับประชาชนและการประเมินศักยภาพของเทคโนโลยีชีวภาพจุลินทรีย์ สถาบันพันธุศาสตร์และการคัดเลือกจุลินทรีย์อุตสาหกรรม ( igsim , มอสโก , รัสเซีย ) และเครื่องขยายเสียง " อาจารย์รอบลาด " ( เพนดอร์ฟ , เยอรมนี )
การแปล กรุณารอสักครู่..