After cultivation for about 70 hours, cultures from each medium were analyzed for itaconic acid production using HPLC. As indicated in Figure 2A, in comparison to reference medium 1, all strains showed increased itaconic acid production in Medium 12. In this medium, both pyrG + strains have even higher amount of itaconic acid production than the hbd1 and gpdA strains (Figure 2A). In contrast, medium 11 and 13 yield the lowest itaconic acid production. Moreover, transformants grown in medium 8 and 20 also show improved itaconic acid production compared to the reference, except for transformant GPD 4.3. GPD 4.3 has generally low production level compared to other strains through all 20 media. The itaconic acid inducing components in the best media are phosphate (M8), copper (M12) and
potassium (M20). The production pattern of citric acid is quite similar to itaconic acid in medium 8, 11, 12 and 13 (Figure 2B). In contrast, medium 4 provided high citric acid but low itaconic acid production. Medium 7 and 19 showed improved itaconic acid production only to the pyrG + strains. Based on the obtained results, we have retested a subset of the above mentioned media (8, 11, 12, 13, 20) and a newly designed medium (M20+) which combined the potentially itaconic acid inducing attributes (phosphorus 3 g/L, copper 0.0025 g/L and potassium 0.52 g/L) from medium 8, 12 and 20. Results are shown in Table 3. This time, strain FHB 2.5 was tested together with the reference strain pyr + 4.1 in triplicate. Similar results were obtained as in the initial screen. Medium 12 still yields the best itaconic acid production, whereas M20+ did not further improve production. In total, the standard deviations of the micro-titer plate screening results were less than 6 %. No oxalic acid was produced in the micro-titer plate cultivations.
After cultivation for about 70 hours, cultures from each medium were analyzed for itaconic acid production using HPLC. As indicated in Figure 2A, in comparison to reference medium 1, all strains showed increased itaconic acid production in Medium 12. In this medium, both pyrG + strains have even higher amount of itaconic acid production than the hbd1 and gpdA strains (Figure 2A). In contrast, medium 11 and 13 yield the lowest itaconic acid production. Moreover, transformants grown in medium 8 and 20 also show improved itaconic acid production compared to the reference, except for transformant GPD 4.3. GPD 4.3 has generally low production level compared to other strains through all 20 media. The itaconic acid inducing components in the best media are phosphate (M8), copper (M12) andpotassium (M20). The production pattern of citric acid is quite similar to itaconic acid in medium 8, 11, 12 and 13 (Figure 2B). In contrast, medium 4 provided high citric acid but low itaconic acid production. Medium 7 and 19 showed improved itaconic acid production only to the pyrG + strains. Based on the obtained results, we have retested a subset of the above mentioned media (8, 11, 12, 13, 20) and a newly designed medium (M20+) which combined the potentially itaconic acid inducing attributes (phosphorus 3 g/L, copper 0.0025 g/L and potassium 0.52 g/L) from medium 8, 12 and 20. Results are shown in Table 3. This time, strain FHB 2.5 was tested together with the reference strain pyr + 4.1 in triplicate. Similar results were obtained as in the initial screen. Medium 12 still yields the best itaconic acid production, whereas M20+ did not further improve production. In total, the standard deviations of the micro-titer plate screening results were less than 6 %. No oxalic acid was produced in the micro-titer plate cultivations.
การแปล กรุณารอสักครู่..
หลังจากปลูกประมาณ 70 ชั่วโมงวัฒนธรรมจากแต่ละสื่อวิเคราะห์สำหรับการผลิตกรด itaconic ใช้ HPLC ตามที่ระบุไว้ในรูปที่ 2A ในการเปรียบเทียบกับขนาดกลาง 1 อ้างอิงทุกสายพันธุ์ที่พบเพิ่มขึ้นการผลิตกรด itaconic ในกลาง 12 ในสื่อนี้ทั้งสองสายพันธุ์ pyrG + มีปริมาณที่สูงขึ้นของการผลิตกรด itaconic กว่า hbd1 และสายพันธุ์ GPDA (รูปที่ 2A) . ในทางตรงกันข้ามกลาง 11 และ 13 ให้ผลผลิตการผลิตกรด itaconic ที่ต่ำที่สุด นอกจากนี้ transformants เติบโตในระดับปานกลางที่ 8 และ 20 นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นการปรับปรุงการผลิตกรด itaconic เมื่อเทียบกับการอ้างอิงยกเว้น transformant GPD 4.3 GPD 4.3 มีระดับการผลิตต่ำโดยทั่วไปเมื่อเทียบกับสายพันธุ์อื่น ๆ ผ่านสื่อทั้งหมด 20 กรด itaconic ชักนำส่วนประกอบในสื่อที่ดีที่สุดคือฟอสเฟต (M8), ทองแดง (M12)
และโพแทสเซียม(M20) รูปแบบการผลิตกรดซิตริกค่อนข้างคล้ายกับกรด itaconic ในสื่อที่ 8, 11, 12 และ 13 (รูปที่ 2B) ในทางตรงกันข้ามกลาง 4 ให้กรดซิตริกสูง แต่การผลิตกรด itaconic ต่ำ ขนาดกลาง 7 และ 19 แสดงให้เห็นว่าการปรับปรุงการผลิตกรด itaconic เท่านั้นที่จะ pyrG + สายพันธุ์ ขึ้นอยู่กับผลที่ได้รับเราได้ครั้งแล้วครั้งเล่าส่วนหนึ่งของสื่อดังกล่าวข้างต้น (8, 11, 12, 13, 20) และขนาดกลางที่ออกแบบใหม่ (M20 +) ซึ่งรวมกรดอาจ itaconic การกระตุ้นให้เกิดคุณลักษณะ (ฟอสฟอรัส 3 กรัม / ลิตร, ทองแดง 0.0025 กรัม / ลิตรและโพแทสเซียม 0.52 กรัม / ลิตร) จากกลาง 8, 12 และ 20 ผลการค้นหาจะแสดงในตารางที่ 3 เวลานี้สายพันธุ์ FHB 2.5 ได้รับการทดสอบร่วมกับ Pyr ความเครียดอ้างอิง + 4.1 เพิ่มขึ้นสามเท่า ผลที่คล้ายกันที่ได้รับในขณะที่หน้าจอเริ่มต้น ขนาดกลาง 12 ยังคงมีอัตราผลตอบแทนการผลิตกรด itaconic ที่ดีที่สุดในขณะที่ M20 + ไม่ได้ปรับปรุงการผลิต โดยรวมแล้วค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของผลการตรวจคัดกรองแผ่นไมโคร titer น้อยกว่า 6% ไม่มีกรดออกซาลิถูกผลิตในแผ่นไมโคร titer เพาะปลูก
การแปล กรุณารอสักครู่..
หลังจากปลูกประมาณ 70 ชั่วโมง วัฒนธรรมจากแต่ละสื่อวิเคราะห์การผลิตกรด itaconic โดยใช้ HPLC . ตามที่ระบุในรูปที่ 2A , ในการเปรียบเทียบกับการอ้างอิงขนาดกลาง 1 ทุกสายพันธุ์ พบเพิ่มขึ้น itaconic กรดผลิตในกลาง 12 ในสื่อนี้ ทั้ง pyrg สายพันธุ์มีปริมาณการผลิตกรด itaconic กว่า hbd1 gpda และสายพันธุ์ ( รูปที่ 2A ) ในทางตรงกันข้ามขนาด 11 และ 13 ให้ผลผลิตกรด itaconic ถูกที่สุด และเติบโตในพลาสมิดกลาง 8 และ 20 ยังแสดงการปรับปรุงการผลิตกรด itaconic เปรียบเทียบกับการอ้างอิงยกเว้น / GPD 4.3 . 4.3 มีการผลิตโดยทั่วไประดับ GPD ต่ำเมื่อเปรียบเทียบกับสายพันธุ์อื่น ๆ ผ่านทั้งหมด 20 สื่อ การ itaconic กรดกระตุ้นส่วนประกอบในสื่อที่ดีที่สุดฟอสเฟต ( M8 ) , ทองแดง ( m12
) และโพแทสเซียม ( เร็ว ) รูปแบบการผลิตของกรดซิตริก ค่อนข้างคล้ายกับ itaconic กรดในอาหาร 8 , 11 , 12 และ 13 ( รูปที่ 2B ) ในทางตรงกันข้าม ขนาดกลาง 4 ให้สูง แต่ต่ำการผลิตกรดซิตริกกรด itaconic . ขนาดกลาง 7 และ 19 พบการปรับปรุงการผลิตกรด itaconic เท่านั้นที่จะ pyrg สายพันธุ์ จากผลการทดลองเราได้ retested ส่วนย่อยของข้างต้นที่กล่าวถึงสื่อ ( 8 , 11 , 12 , 1320 ) และออกแบบใหม่ ( ตลาดกลาง ) ซึ่งรวมอาจ itaconic กรดกระตุ้นคุณลักษณะ ( ฟอสฟอรัส 3 กรัม / ลิตร ทองแดง 0.0025 กรัม / ลิตรและโพแทสเซียม 0.52 กรัม / ลิตร ) จากกลาง 8 , 12 และ 20 ผลลัพธ์จะแสดงในตารางที่ 3 คราวนี้ เมื่อย fhb 2.5 ทดสอบพร้อมกับอ้างอิงเมื่อย pyr 4.1 ทั้งสามใบ ผลที่คล้ายกันได้รับในหน้าจอเริ่มต้นกลาง 12 ยังให้ผลผลิตกรด itaconic ที่ดีที่สุดในขณะที่ M20 ไม่ได้ปรับปรุงการผลิต ทั้งหมดส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของแผ่นระดับไมโครคัดกรองผลลัพธ์ที่ได้น้อยกว่า 6 % ไม่มีกรดออกซาลิผลิตไมโครไตเตอร์เพลทเพาะ .
การแปล กรุณารอสักครู่..