Trypsin activity of crude extract w

Trypsin activity of crude extract was measured using BAPNA as a substrate according to the method of Khantaphant and Benjakul (2008). A 200 µl of sample was mixed with 200 µl of distilled water and 1000 µl of reaction buffer (50 mM Tris–HCl buffer, pH 8.0, containing 10 mM CaCl2). The reaction was initiated by adding 200 µl of 2 mg/ml BAPNA to the reaction mixture. After incubation for 20 min at 60 °C, 200 µl of 30% acetic acid (v/v) were added to terminate the reaction. Production of p-nitroaniline was measured by monitoring the absorbance of reaction mixture at 410 nm (A410) using a UV-1601 spectrophotometer (Shimadzu, Kyoto, Japan). A blank was conducted in the same manner except that the sample was added after addition of 30% acetic acid. One unit was defined as the amount of trypsin causing an increase of 1.0 in A410/min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทริปซินกิจกรรมของสารสกัดหยาบถูกวัดโดยใช้ BAPNA เป็นพื้นผิวตามวิธีของ Khantaphant และ Benjakul (2008) µL 200 ของอย่างถูกผสมกับ 200 µl น้ำกลั่น 1000 µl บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา (ตรี – HCl 50 มม.บัฟเฟอร์ pH 8.0 ประกอบด้วย 10 มม. CaCl2) เริ่มปฏิกิริยา โดยเพิ่ม 200 µl ของ 2 mg/ml BAPNA ผสมปฏิกิริยา หลังจากฟักตัวใน 20 นาทีที่ 60 ° C มีเพิ่ม 200 µl ของกรดน้ำส้ม 30% (v/v) การสิ้นสุดปฏิกิริยา ผลิต p nitroaniline ถูกวัด โดยการตรวจสอบ absorbance ของผสมปฏิกิริยาที่ 410 nm (A410) โดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่างเป็น UV-1601 (Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น) ช่องว่างถูกดำเนินในลักษณะเดียวกันยกเว้นว่ามีเพิ่มตัวอย่างหลังจากนี้ 30% กรดอะซิติก หน่วยหนึ่งถูกกำหนดเป็นยอดของทริปซินทำให้เกิดการเพิ่มขึ้น 1.0 ใน A410/min

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรม trypsin ของสารสกัดหยาบวัด BAPNA ใช้เป็นสารตั้งต้นตามวิธีการของ Khantaphant และเบญจกุล (2008) 200 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างได้รับการผสมกับ 200 ไมโครลิตรของน้ำกลั่นและ 1000 ไมโครลิตรของ buffer ปฏิกิริยา (50 มิลลิบัฟเฟอร์ Tris-HCl, pH 8.0 ที่มี 10 มิลลิ CaCl2) ปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเพิ่ม 200 ไมโครลิตร 2 mg / ml BAPNA การผสมปฏิกิริยา หลังจากการบ่มเป็นเวลา 20 นาทีที่ 60 ° C, 200 ไมโครลิตร 30% กรดอะซิติก (v / v) มีการเพิ่มที่จะยุติการเกิดปฏิกิริยา การผลิตพี nitroaniline วัดโดยการตรวจสอบการดูดกลืนแสงของผสมปฏิกิริยาที่ 410 นาโนเมตร (A410) โดยใช้ spectrophotometer UV-1601 (Shimadzu เกียวโตญี่ปุ่น) เปล่าได้ดำเนินการในลักษณะเดียวกันยกเว้นว่ากลุ่มตัวอย่างถูกเพิ่มเข้ามาหลังจากที่นอกเหนือจาก 30% กรดอะซิติก หนึ่งหน่วยถูกกำหนดเป็นจำนวน trypsin ก่อให้เกิดการเพิ่มขึ้น 1.0 ใน A410 / นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมของเอนไซม์สกัดหยาบถูกวัดโดยใช้ bapna เป็นสารตั้งต้นตามวิธีการและ khantaphant กูล ( 2008 ) µ 200 ลิตร จำนวน 200 ลิตร ผสมกับµน้ำกลั่น 1 ลิตร กันชนµปฏิกิริยา ( 50 มม. โดย– HCl บัฟเฟอร์ pH 8.0 , ประกอบด้วย 10 มม. ผลิต ) ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดยเพิ่ม 200 µ L 2 mg / ml bapna กับปฏิกิริยาผสมหลังจากบ่มเป็นเวลา 20 นาทีที่ 60 ° C 200 µลิตร 30% กรดน้ำส้ม ( v / v ) และการเกิดปฏิกิริยา การผลิต p-nitroaniline ถูกวัดโดยการตรวจสอบค่าปฏิกิริยาของส่วนผสมที่ 410 nm ( a410 ) โดยใช้ uv-1601 Spectrophotometer ( Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) ว่างได้ดำเนินการในลักษณะเดียวกันยกเว้นว่าตัวอย่างที่ถูกเพิ่มเข้ามาหลังจากเพิ่ม 30 % กรดอะซิติกหน่วยหนึ่งถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ก่อให้เกิดการเพิ่มขึ้นของ 1.0 ใน a410 / min