Auxotrophic mutants of the yeast Sa

Auxotrophic mutants of the yeast Saccharomyces cerevisiae are usually isolated in haploid strains because the
isolation of recessive mutations in diploids is thought to be difficult due to the presence of two sets of genes.
We show here that auxotrophic mutants of diploid industrial sake yeast strains were routinely obtained by a
standard mutant selection procedure following UV mutagenesis. We isolated His
, Met
, Lys
, Trp
, Leu
,
Arg
, and Ura
auxotrophic mutants of five sake strains, Kyokai no. 7, no. 9, no. 10, no. 701, and no. 901, by
screening only 1,700 to 3,400 colonies from each treated strain. Wild-type alleles were cloned and used as
markers for transformation. With HIS3 as a selectable marker, the yeast TDH3 overexpression promoter was inserted upstream of ATF1, encoding alcohol acetyltransferase, by one-step gene replacement in a his3 mutant of Kyokai no. 7. The resulting strain contained exclusively yeast DNA, making it acceptable for commercial use,and produced a larger amount of isoamyl acetate, a banana-like flavor. We argue that the generally recognized difficulty of isolating auxotrophic mutants of diploid industrial yeast strains is misleading and that genetic techniques used for haploid laboratory strains are applicable for this purpose.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์ auxotrophic ของยีสต์ Saccharomyces cerevisiae มักจะแยกต่างหากในสายพันธุ์ haploid เนื่องจากการแยกของ recessive การกลายพันธุ์ใน diploids เป็นความคิดเป็นเรื่องยากเนื่องจากสองชุดของยีนเราแสดงที่นี่ที่ auxotrophic สายพันธุ์ของยีสต์สาเก diploid อุตสาหกรรมได้รับเป็นประจำโดยการวัตถุมาตรฐานกลายพันธุ์ต่อ UV mutagenesis เราแยกต่างหากของเขา Met, Lys, Trp ลืออาร์กิวเมนต์ของค่า และสายพันธุ์ auxotrophic Ura ห้าสายพันธุ์สาเก Kyokai หมายเลข 7 เลข 9, 10 หมายเลข หมายเลข 701 และหมายเลข 901 โดยคัดกรองเฉพาะ 1700 ไป 3400 อาณานิคมจากแต่ละต้องใช้บำบัด Alleles ชนิดป่าโคลน และใช้เป็นเครื่องหมายสำหรับการเปลี่ยนแปลง กับ HIS3 เป็นเครื่องหมายที่เลือก โปรโมเตอร์ overexpression ยีสต์ TDH3 แทรกขั้นต้นน้ำของ ATF1 แอลกอฮอล์ acetyltransferase การเข้ารหัส โดยการเปลี่ยนยีนในขั้นตอนเดียวใน his3 mutant โดย Kyokai หมายเลข 7 พันธุ์ผลประกอบด้วยยีสต์โดยเฉพาะดีเอ็นเอ การยอมรับสำหรับการใช้งานเชิงพาณิชย์ และผลิตจำนวนมากของ isoamyl acetate รสกล้วยเช่น เราโต้แย้งว่า ปัญหาโดยทั่วไปรู้จักแยก auxotrophic สายพันธุ์ของยีสต์อุตสาหกรรม diploid เข้าใจ และเทคนิคทางพันธุกรรมที่ใช้สำหรับปฏิบัติ haploid สายพันธุ์เหมาะสมสำหรับวัตถุประสงค์นี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การกลายพันธุ์ Auxotrophic ของยีสต์ Saccharomyces cerevisiae จะแยกมักจะอยู่ในสายพันธุ์เดี่ยวเพราะ
การแยกของการกลายพันธุ์ด้อยใน diploids คิดว่าจะเป็นเรื่องยากเพราะการปรากฏตัวของสองชุดของยีน.
ที่นี่เราแสดงว่าการกลายพันธุ์ auxotrophic สาเกอุตสาหกรรมซ้ำสายพันธุ์ยีสต์เป็นประจำ ที่ได้รับจาก
ขั้นตอนการเลือกกลายพันธุ์มาตรฐานดังต่อไปนี้ฉับรังสียูวี เราแยกเขา ?, พบ ?, ลิซ ?, Trp ?, ลื้อ ?,
หาเรื่อง ?, และยู? การกลายพันธุ์ auxotrophic ห้าสายพันธุ์สาเก Kyokai ไม่มี 7 ไม่ 9 ไม่ 10 ไม่มี 701 และไม่มี 901 โดยการ
คัดกรองเพียง 1,700 3,400 โคโลนีจากแต่ละสายพันธุ์ได้รับการรักษา อัลลีลชนิดป่าถูกโคลนและใช้เป็น
เครื่องหมายสำหรับการเปลี่ยนแปลง ด้วย HIS3 เป็นเครื่องหมายที่เลือก, TDH3 ยีสต์แสดงออกถูกแทรกของต้นน้ำก่อการ ATF1 เข้ารหัส acetyltransferase เครื่องดื่มแอลกอฮอล์โดยการเปลี่ยนยีนขั้นตอนหนึ่งในการกลายพันธุ์ของ his3 Kyokai ไม่มี 7. ความเครียดที่เกิดมีดีเอ็นเอยีสต์เฉพาะทำให้ได้รับการยอมรับสำหรับการใช้งานเชิงพาณิชย์และการผลิตจำนวนมากอะซิเตท isoamyl, รสกล้วยหอมเหมือน เรายืนยันว่าปัญหาได้รับการยอมรับโดยทั่วไปของการแยกการกลายพันธุ์ auxotrophic ของยีสต์อุตสาหกรรมซ้ำเป็นความเข้าใจผิดและว่าเทคนิคทางพันธุกรรมสายพันธุ์ที่ใช้สำหรับห้องปฏิบัติการเดี่ยวมีผลบังคับใช้สำหรับวัตถุประสงค์นี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

auxotrophic สายพันธุ์ของยีสต์ Saccharomyces cerevisiae สายพันธุ์มักจะแยกเดี่ยว เพราะ
แยกลักษณะด้อยการกลายพันธุ์ใน Diploids คิดว่าเป็นเรื่องยากเนื่องจากการแสดงตนของทั้งสองชุดของยีน
เราแสดงที่นี่ที่ auxotrophic พันธ์ของชาวจีนเพื่ออุตสาหกรรมยีสต์สายพันธุ์ถูกตรวจได้โดยวิธีคัดเลือกตามมาตรฐาน
กลายพันธุ์ของยูวีเราแยกเขา
เจอ
.

TRP , , ,

Leu , ARG
และ ระพันธ์
auxotrophic ห้าประโยชน์ต่อ kyokai หมายเลข 7 หมายเลข 9 หมายเลข 10 หมายเลข 701 และหมายเลข 901 โดย
เพียง 1700 ถึง 3400 อาณานิคมจากแต่ละสายพันธุ์การคัดกรอง อัลลีลชนิดป่าถูกโคลนและใช้เป็น
เครื่องหมายสำหรับการเปลี่ยนแปลง กับ his3 เป็นเครื่องหมายเลือกยีสต์ tdh3 overexpression โปรโมเตอร์แทรก atf1 เหนือ ,acetyltransferase แอลกอฮอล์การเข้ารหัส โดยขั้นตอนหนึ่งใน his3 กลายพันธุ์ของยีนทดแทน kyokai หมายเลข 7 ผลดีเอ็นเอสายพันธุ์ที่มีอยู่ โดยเฉพาะยีสต์ ทำให้มันเป็นที่ยอมรับสำหรับใช้ในเชิงพาณิชย์และผลิตจำนวนมากในปริมาณ acetate , กล้วยชอบรสเรายืนยันว่ารู้จักโดยทั่วไปยากแยก auxotrophic พันธ์ของสายพันธุ์ยีสต์จะทำให้เข้าใจผิดและเกิดอุตสาหกรรมที่ใช้เทคนิคทางพันธุกรรมสายพันธุ์เดี่ยว ถูกใช้เพื่อวัตถุประสงค์นี้