Transformation efficiency and regen

Transformation efficiency and regeneration of Parthenium argentatum Gray (guayule)from leaf discs is problematical due to genotype specific regeneration efficiency,browning and tissue culture growth response after Agrobacterium infection of leaf explants . To address this issue,we have developed a callus transformation system using lustrous green nodular callus,termed highly regenerating callus(HRC), which is immensely prolificacy shoot regeneration. Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 harboring the binary vector pCAMBIA 2300 was used to transform the HRC.Primary transformation events and
transgenic plants recovered were identified by PCR. Transgene integration and translation of nptII into transgenic plants was confirmed with Southern and western blot analysis.The plant transformation frequency from callus tissues was about 48%.This alternative method is fast and free of undesirable
browning and it should facilitate a rapid improvement of guayule germplasm via genetic engineering,which has been slow compared to some other industrial crops.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประสิทธิภาพการเปลี่ยนแปลงและฟื้นฟู Parthenium argentatum สีเทา (guayule) จากใบดิสก์คือ problematical เนื่องจากลักษณะทางพันธุกรรมฟื้นฟูเฉพาะประสิทธิภาพ browning และเนื้อเยื่อเจริญเติบโตการตอบสนองหลังจากติดเชื้ออโกรแบคทีเรียมของใบไม้ explants ปัญหานี้ เราได้พัฒนาระบบการแปลงให้ใช้ษะเขียว nodular ให้ เรียกว่าสร้างใหม่สูง callus(HRC) ซึ่งเป็นการฟื้นฟูการยิง prolificacy อย่างกว้างขวาง อโกรแบคทีเรียม tumefaciens ต้องใช้ EHA105 harboring pCAMBIA เวกเตอร์ฐาน 2300 ถูกใช้ในการแปลงเอชอาร์ซี เหตุการณ์การเปลี่ยนแปลงหลัก และถั่วเหลืองพืชกู้ได้ระบุ โดย PCR รวม Transgene และแปลของ nptII เป็นพืชถั่วเหลืองถูกยืนยัน ด้วยการวิเคราะห์คืนในตะวันตก และใต้ตา ความถี่การแปลงพืชจากเนื้อเยื่อแคลลัสมีประมาณ 48% วิธีนี้ทดแทนได้อย่างรวดเร็ว และไม่พึงประสงค์browning และควรช่วยในการปรับปรุงอย่างรวดเร็วของ guayule germplasm ทางพันธุวิศวกรรม ซึ่งได้รับช้าเมื่อเทียบกับพืชอื่น ๆ ที่อุตสาหกรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประสิทธิภาพการเปลี่ยนแปลงและการฟื้นฟูของ Parthenium argentatum สีเทา (guayule) จากแผ่นใบเป็นปริศนาเนื่องจากประสิทธิภาพการฟื้นฟูเฉพาะพันธุ์, สีน้ำตาลและการตอบสนองการเจริญเติบโตของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อหลังจากการติดเชื้อ Agrobacterium ของชิ้นใบ เพื่อแก้ไขปัญหานี้เราได้มีการพัฒนาระบบการเปลี่ยนแปลงการใช้แคลลัสแคลลัสเป็นก้อนกลมแวววาวสีเขียวเรียกว่าปฏิรูปสูงแคลลัส (HRC) ซึ่งเป็นอย่างมาก prolificacy ฟื้นฟูยิง Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 เก็บงำเวกเตอร์ไบนารี pCAMBIA 2300 ถูกใช้ในการเปลี่ยนเหตุการณ์การเปลี่ยนแปลง HRC.Primary
และพืชดัดแปรพันธุกรรมกู้คืนที่ถูกระบุโดยวิธีPCR บูรณาการของยีนและการแปลของ nptII เข้าไปในพืชดัดแปรพันธุกรรมได้รับการยืนยันกับ blot ภาคใต้และตะวันตกวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงความถี่พืชจากเนื้อเยื่อแคลลัสเป็นประมาณ 48%
โดยง่ายวิธีอื่นเป็นไปอย่างรวดเร็วและเป็นอิสระจากที่ไม่พึงประสงค์เกิดสีน้ำตาลและมันควรจะอำนวยความสะดวกในการพัฒนาอย่างรวดเร็วของเชื้อพันธุกรรมguayule ผ่านทางพันธุวิศวกรรมซึ่งได้รับการเทียบช้าบางพืชอุตสาหกรรมอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประสิทธิภาพการแปลงและสร้าง parthenium argentatum สีเทา ( guayule ) จากแผ่นใบเป็นปัญหาเนื่องจากพันธุกรรม ประสิทธิภาพโดยเฉพาะสีน้ำตาล และการตอบสนองการเจริญเติบโตเนื้อเยื่อหลังจาก Agrobacterium การติดเชื้อเนื้อเยื่อใบ เพื่อแก้ไขปัญหานี้ , เราได้มีการพัฒนาระบบการเพาะเลี้ยงแคลลัสสีเขียวใช้เป็นเงากลม ,เรียกว่าขอ regenerating ลัส ( HRC ) ซึ่งเป็นอย่างมหาศาลผสมยิงตัวเอง Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ถ่ายยีนพบในสายพันธุ์ EHA105 harboring เวกเตอร์เลขฐานสอง pcambia 2300 ใช้แปลง HRC . การเปลี่ยนแปลงเหตุการณ์และ
พืชข้ามพันธุ์หายถูกระบุโดย PCRการรวมยีนและการแปลของ nptii เป็นพืชข้ามพันธุ์ก็ยืนยันกับการวิเคราะห์ทางใต้และ Western blot พืชการแปลงความถี่จากเนื้อเยื่อแคลลัสได้ประมาณ 48 เปอร์เซ็นต์ วิธีนี้จะรวดเร็วและฟรีของไม่พึงประสงค์
สีน้ำตาล และควรอำนวยความสะดวกในการปรับปรุงอย่างรวดเร็วของ guayule พันธุกรรมทางพันธุวิศวกรรมซึ่งได้ช้าเมื่อเทียบกับพืชบางชนิดในอุตสาหกรรมอื่น ๆ