The PCR amplification protocol was

The PCR amplification protocol was as follows: 94 C initial
denaturing for 3 min; 94 C denaturing for 30 s, 55 C annealing
for 40 s, 72 C extending for 1 min, 30 cycles; 72 C extending for
5 min. The 25 ul of PCR contained: 2*Master Mix (TianGen, contained
0.1 U Taq polymerase, 500 mM dNTPs, 20 mM Tris–HCl
(pH 8.3), 100 mM KCl, 3 mM MgCl) 12.5 ul and 10 uM in each forward
and reverse primers. The regions corresponding to positions
357 and 518 in the 16S rDNA of Escherichia coli were PCR-amplified
by EUB357f (50
-CCTACGGGAGGCAG CAG-30
) with a GC clamp
(50
-CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGGCCCGCCGCCC CCGCCCC-30
) at
the 50 end to stabilize the melting behavior of the DNA fragments
and the reverse primer UNIV518r (50
-ATTACCGCGGCTGCTGG-30
)
(Ki

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โพรโทคอลที่ขยาย PCR มีดังนี้: C 94 เริ่มต้นdenaturing 3 นาที 94 C denaturing 30 s, C 55 หลอมสำหรับ 40 s, C 72 ขยายสำหรับ 1 นาที รอบ 30 72 C ขยายสำหรับ5 นาที Ul 25 ของ PCR ที่อยู่: 2 * ส่วนผสมหลัก (TianGen อยู่0.1 พอลิเมอเรส U Taq, dNTPs 500 มม. 20 มม.ทริ – HCl(pH 8.3), 100 mM KCl, 3 มม. MgCl) 12.5 ul และ 10 uM ที่ในแต่ละและย้อนกลับไพรเมอร์ ภูมิภาคที่สอดคล้องกับตำแหน่ง357 และ 518 ในการ 16S rDNA ของ Escherichia coli ที่ขยาย PCRโดย EUB357f (50CAG - CCTACGGGAGGCAG-30) กับหนีบ GC(50CCGCCCC - CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGGCCCGCCGCCC-30) ที่สิ้นสุด 50 เพื่อรักษาเสถียรภาพการทำงานหลอมชิ้นส่วนดีเอ็นเอและรองพื้นกลับ UNIV518r (50-ATTACCGCGGCTGCTGG-30)(Ki

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรโตคอลขยาย PCR เป็นดังนี้: 94 C เริ่มต้น
ขั้นเปลี่ยนเป็นเวลา 3 นาที; 94 C ขั้นเปลี่ยนเป็นเวลา 30 วินาที, 55 C การอบ
เป็นเวลา 40 วินาที, 72 C การขยายเวลา 1 นาที 30 รอบ; 72 C การขยายสำหรับ
5 นาที 25 UL ของ PCR ที่มีอยู่: 2 * โท Mix (TianGen ที่มีอยู่
0.1 U Taq โพลิเมอร์ 500 มิลลิ dNTPs, 20 มิลลิเมตร Tris-HCl
(pH 8.3) 100 มิลลิเมตร KCl, 3 mm MgCl) 12.5 UL และ 10 UM ในแต่ละข้างหน้า
และย้อนกลับไพรเมอร์ ภูมิภาคที่สอดคล้องกับตำแหน่ง
357 และ 518 ใน 16S rDNA ของ Escherichia coli มี PCR-amplified
โดย EUB357f (50
-CCTACGGGAGGCAG CAG 30
) ที่มีการยึด GC
(50
-CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGGCCCGCCGCCC CCGCCCC 30
) ที่
ปลาย 50 เพื่อรักษาเสถียรภาพละลายพฤติกรรม ของดีเอ็นเอ
และไพรเมอร์กลับ UNIV518r (50
-ATTACCGCGGCTGCTGG-30
)
(Ki