For shake flask and bioreactor stud

For shake flask and bioreactor studies, growth medium having composition of glucose 3%, peptone 2%, and yeast extract 1% (pH 5.5, optimized value) and biotransformation medium having composition of glucose 3%, peptone 0.6% (pH 4.5, optimized value) were used. In the case of shake flask studies growth of yeast isolate VS1 (identified as Saccharomyces cerevisiae) having capacity to transform benzaldehyde to l-PAC was carried out. For growth, 1 ml of inoculum containing 1×106 cells were inoculated into 9 ml of growth medium and incubated on a rotary shaker at 30±2°C at 240 rpm for 24 h. The culture so obtained was used as an inoculum for 100 ml of the growth medium, allowed to grow for 24 h under similar conditions. It was centrifuged with Beckman J2-MC centrifuge operated at relative centrifugation field of 17000g and at 10,000 rpm for 15 min after chilling it to 15°C. The biomass so obtained was used as an inoculum for the 100 ml of the biotransformation medium. The cells were allowed to adapt to biotransformation medium for 1 h on the rotary shaker at 240 rpm then added 0.6% (w/v) of benzaldehyde and to 0.6% (v/v) of acetaldehyde (30–35%) in the medium. The biotransformation was then allowed to take place on a rotary shaker under same conditions and the samples were drawn at regular time intervals (20 min each). The transformed medium was centrifuged at 10,000 rpm for 15 min. The supernatant so obtained was extracted thrice with equal volume of diethyl ether. The extract was dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under vacuum at 30°C temperature. The concentrated extract thus obtained was subjected to gas-chromatographic analysis. The conditions used for GC were as follows: GC model Chemito-8510 with Oracle-1 computing integrator, column used was 5%OV-17 4 m long, injector temperature of 250°C and detector temperature of (FID) 250°C, column programming was as follows: 75°C for 3 min then 10°C min−1 up to 250°C and holding for 5 min. Retention times of benzaldehyde, benzyl alcohol, l-PAC, PAC-diol were 11, 13, 17 and 18.5 min, respectively. The concentrations of these compounds were determined using peak area method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หนาวสั่นและ bioreactor ศึกษา เชื้อที่มีส่วนประกอบของกลูโคส 3%, peptone 2% และยีสต์สกัด 1% (ค่า pH 5.5 ปรับให้เหมาะสม) และมีขนาด biotransformation ที่ใช้ส่วนประกอบของกลูโคส 3%, peptone 0.6% (ค่า pH 4.5 ปรับให้เหมาะสม) กรณีศึกษาการหนาวสั่นที่เจริญเติบโตของยีสต์แยก VS1 (ระบุเป็น Saccharomyces cerevisiae) มีกำลังแปลง benzaldehyde กับ l-PAC ได้ดำเนินงาน การเจริญเติบโต 1 ml ของ inoculum เซลล์× 106 1 ถูก inoculated เป็น 9 ml ของเชื้อ และ incubated ในเชคเกอร์โรตารี่ที่ 30±2 ° C ที่ 240 rpm ใน 24 ชม วัฒนธรรมนั้น ได้ถูกใช้เป็น inoculum ที่ใน 100 ml ของเชื้อ สามารถเติบโตใน 24 ชมภายใต้เงื่อนไขที่คล้ายกัน มันถูก centrifuged ด้วยเครื่องหมุนเหวี่ยง Beckman J2-MC ดำเนิน ณ centrifugation ญาติของ 17000 และ ที่ 10000 rpm สำหรับ 15 นาทีหลังจากหนาวไป 15 องศาเซลเซียส ชีวมวลที่ได้รับดังนั้น ถูกใช้เป็นการ inoculum สำหรับ 100 มลกลาง biotransformation เซลล์ได้รับอนุญาตให้ปรับปานกลาง biotransformation h 1 ในเชคเกอร์โรตารี่ที่ 240 rpm แล้วเพิ่ม 0.6% (w/v) benzaldehyde และ 0.6% (v/v) ของ acetaldehyde (30 – 35%) ในการ Biotransformation ได้รับอนุญาตให้ทำการเชคเกอร์โรตารี่ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันแล้ว และอย่างได้ออกในช่วงเวลาปกติ (20 นาทีแต่ละ) สื่อแปรรูปถูก centrifuged ที่ 10000 rpm สำหรับ 15 นาที Supernatant เพื่อ รับถูกแยก ด้วยปริมาณเท่าของอีเทอร์ diethyl เลย สารสกัดที่แห้งเหนือ Na2SO4 ได และเข้มข้นภายใต้สุญญากาศที่อุณหภูมิ 30° C สารสกัดเข้มข้นที่ได้รับจึง ถูกยัดเยียดให้วิเคราะห์ก๊าซ chromatographic เงื่อนไขที่ใช้สำหรับ GC มีดังนี้: GC รุ่น Chemito-8510 กับ Oracle 1 ตัวคอมพิวเตอร์รวม คอลัมน์ใช้ 5% 4 OV-17 เมตรยาว หัวฉีดอุณหภูมิ 250° C และเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ (FID) 250° C เขียนคอลัมน์ได้ดังนี้: 75° C สำหรับ min−1 3 นาทีแล้ว 10° C ถึง 250 ° C และถือในเวลา 5 นาทีคง benzaldehyde, benzyl แอลกอฮอล์ l-PAC, PAC diol ได้นาทีที่ 11, 13, 17 และ 18.5 ตามลำดับ ความเข้มข้นของสารเหล่านี้ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการตั้งค

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับขวดเขย่าและการศึกษาเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ, สื่อการเจริญเติบโตที่มีองค์ประกอบของน้ำตาลกลูโคส 3% เปปโตน 2% และสารสกัดจากยีสต์ 1% (ค่า pH 5.5 ค่าที่ดีที่สุด) และขนาดกลางเปลี่ยนรูปทางชีวภาพมีองค์ประกอบของน้ำตาลกลูโคส 3% เปปโตน 0.6% (ค่า pH 4.5 ที่ดีที่สุด ค่า) ถูกนำมาใช้ ในกรณีที่มีการสั่นไหวของขวดการเจริญเติบโตการศึกษาของยีสต์แยก VS1 (ระบุว่าเป็น Saccharomyces cerevisiae) มีกำลังการผลิตที่จะเปลี่ยน benzaldehyde เพื่อ L-PAC ได้รับการดำเนินการ สำหรับการเจริญเติบโต 1 มิลลิลิตรของเชื้อที่มี 1 × 106 เซลล์ถูกเชื้อเป็น 9 มิลลิลิตรของสื่อการเจริญเติบโตและบ่มในเครื่องปั่นหมุนวันที่ 30 ± 2 ° C ที่ 240 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง วัฒนธรรมที่ได้รับเพื่อใช้เป็นหัวเชื้อ 100 มิลลิลิตรของสื่อการเจริญเติบโตได้รับอนุญาตที่จะเติบโตเป็นเวลา 24 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขที่คล้ายกัน มันถูกปั่นด้วยเครื่องปั่นแยก Beckman J2-MC ดำเนินการที่ข้อมูลการหมุนเหวี่ยงญาติของ 17000g และที่ 10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาทีหลังจากที่มันหนาวถึง 15 ° C ชีวมวลที่ได้รับเพื่อใช้เป็นหัวเชื้อสำหรับ 100 มล. ของกลางเปลี่ยนรูปทางชีวภาพ เซลล์ได้รับอนุญาตให้ปรับตัวเข้ากับสื่อที่เปลี่ยนรูปทางชีวภาพเป็นเวลา 1 ชั่วโมงในการปั่นหมุนที่ 240 รอบต่อนาทีแล้วเพิ่ม 0.6% (w / v) benzaldehyde และ 0.6% (v / v) ของ acetaldehyde (30-35%) ในระยะกลาง . เปลี่ยนรูปทางชีวภาพได้รับการได้รับอนุญาตให้ใช้สถานที่ในเครื่องปั่นหมุนภายใต้เงื่อนไขเดียวกันและตัวอย่างถูกดึงในช่วงเวลาปกติ (20 นาทีในแต่ละครั้ง) เปลี่ยนขนาดกลางได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาที สารละลายที่ได้รับเพื่อสกัดสามครั้งมีปริมาณที่เท่ากันของอีเทอร์ สารสกัดแห้งมากกว่า Na2SO4 ปราศจากและเข้มข้นภายใต้สูญญากาศที่ 30 ° C อุณหภูมิ สารสกัดเข้มข้นที่ได้รับจึงต้องอยู่ภายใต้การวิเคราะห์ก๊าซโครมา เงื่อนไขที่ใช้ในการ GC มีดังนี้รุ่น GC-8510 chemito กับ Oracle-1 บูรณาการคอมพิวเตอร์คอลัมน์ใช้ 5% OV-17 4 เมตรยาวหัวฉีดอุณหภูมิ 250 องศาเซลเซียสและอุณหภูมิของเครื่องตรวจจับ (FID) 250 องศาเซลเซียส การเขียนโปรแกรมคอลัมน์เป็นดังนี้: 75 ° C เป็นเวลา 3 นาทีจากนั้น 10 นาที° C-1 ได้ถึง 250 องศาเซลเซียสและถือเป็นเวลา 5 นาที เวลาการเก็บรักษา benzaldehyde แอลกอฮอล์ benzyl, L-PAC, PAC-ไดออลเป็น 11, 13, 17 และ 18.5 นาทีตามลำดับ ความเข้มข้นของสารเหล่านี้ได้รับการพิจารณาโดยใช้วิธีการพื้นที่สูงสุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับขวดเขย่าและแบบศึกษาการเจริญเติบโตปานกลาง มีองค์ประกอบของน้ำตาล 3% , 2% ตามลำดับ และสารสกัดจากยีสต์ 1 % ( pH 5.5 , ปรับค่า ) และการมีองค์ประกอบกลางของกลูโคส 3% เปปโตน 0.6% ( pH 4.5 , ปรับค่า ) มาใช้ในกรณีของการเขย่าขวดการศึกษาการเจริญเติบโตของยีสต์ ( Saccharomyces cerevisiae ที่แยก vs1 ระบุว่ามีความสามารถในการแปลง l-pac ดีไฮด์จะได้ดําเนินการ สำหรับการเจริญเติบโต ปริมาณ 1 ml ประกอบด้วย 1 × 106 เซลล์มีเชื้อ 9 มิลลิลิตรอาหารเลี้ยงเชื้อบ่มในเครื่องปั่นหมุน 30 ± 2 องศา C ที่ 240 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมงวัฒนธรรมจึงได้ถูกใช้เป็นกล้าเชื้อสำหรับ 100 ml ของอาหารเลี้ยงเชื้อ ได้รับอนุญาตให้เติบโต ตลอด 24 ชั่วโมง ภายใต้เงื่อนไขที่คล้ายกัน มันเป็นระดับกับเบคแมน j2-mc เพื่อดำเนินการเขต 3 และญาติของ 17000g ที่ 10 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาทีหลังจากถือ 15 ° C ดังนั้นชีวมวลได้ถูกใช้เป็นกล้าเชื้อสำหรับ 100 ml ของการสื่อเซลล์ที่ได้รับอนุญาตเพื่อปรับให้เข้ากับการสื่อเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในการปั่นหมุนอยู่ที่ 240 รอบต่อนาทีแล้วเพิ่ม 0.6 % ( w / v ) benzaldehyde และ 0.6 % ( v / v ) ของอะเซทัลดีไฮด์ ( 30 - 35 % ) อยู่ในระดับปานกลาง การเลิกกิจการแล้ว อนุญาตให้ใช้สถานที่บนเครื่องหมุนปั่นภายใต้เงื่อนไขเดียวกันและอย่างมีนัยสำคัญในช่วงเวลาปกติ ( 20 นาทีแต่ละครั้ง )เปลี่ยนที่ 10 , 000 รอบต่อนาที ) ไฟฟ้า 15 นาทีจึงได้นำสกัด 3 ครั้ง มีปริมาณเท่ากันของอีเทอร์ . สารสกัดแห้งกว่ารัส na2so4 และเข้มข้นในสุญญากาศที่อุณหภูมิ 30 องศา C อุณหภูมิ สกัดเข้มข้นจึงได้รับภายใต้การวิเคราะห์ทางโครมาโตกราฟีก๊าซ เงื่อนไขใช้ GC มีดังนี้GC แบบ chemito-8510 กับคอมพิวเตอร์ oracle-1 ) คอลัมน์ที่ใช้เป็น 5 % ov-17 4 เมตรยาวหัวอุณหภูมิ 250 องศา C และตรวจจับอุณหภูมิ ( FID ) 250 ° C , เขียนคอลัมน์เป็นดังนี้ : 75 องศา C เป็นเวลา 3 นาที แล้ว 10 ° C มิน− 1 ถึง 250 องศา C และกดค้างไว้ 5 นาที เวลากักของ benzaldehyde เบนซิลแอลกอฮอล์ l-pac , PAC , ไดออลเป็น 11 , 13 , 17 และ 18 นาที ตามลำดับความเข้มข้นของสารประกอบเหล่านี้ถูกกำหนดโดยวิธีพื้นที่สูงสุด