Frozen rice plants (approximately 2

Frozen rice plants (approximately 200 mg) were homogenized
in 10 ml of 50 mM potassium phosphate
buffer (pH 7.0) containing 1 mM ethylenediaminetetraacetic
acid and 1 % polyvinylpyrrolidone for SOD
and CAT assay or the combination with the addition of
1 mM ASC in the case of APX assay. The homogenate
was centrifuged at 12,000×g for 20 min at 4 °C and the
supernatant was immediately desalted by Sephadex G-
25 gel filtration to remove interfering materials and
used as the crude enzyme extract.
Total SOD activity was measured on the basis of its
ability to reduce nitroblue tetrazolium (NBT) by superoxide
anion generated by the riboflavin system
under illumination. One unit of SOD was defined as
the amount of crude enzyme extract required to inhibit
the reduction rate of NBT by 50 % (Beauchamp and
Fridovich 1971). APX activity was measured by monitoring
the decrease in absorbance at 290 nm as ASC
was oxidized (ε=2.8 mM−1
cm−1
) for at least 1 min in
3 ml reaction mixture, as described by Nakano and
Asada (1981). CAT activity was spectrophotometrically
measured by monitoring the consumption of hydrogen
peroxide (H2O2; ε=39.4 mM−1
cm−1
) at 240 nm
for at least 3 min (Huang et al. 2006).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ข้าวแช่พืช (ประมาณ 200 มิลลิกรัม) ถูก homogenized เป็นกลุ่มใน 10 ml ของฟอสเฟตโพแทสเซียม 50 มม.บัฟเฟอร์ (pH 7.0) มี 1 มม. ethylenediaminetetraaceticpolyvinylpyrrolidone กรดและ 1% สำหรับสดและแมวทดสอบหรือร่วมกับการเพิ่มมม. 1 ASC กรณีทดสอบให้ APX Homogenateมี centrifuged ที่ 12, 000 ซื้อ g สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C และทันทีถูก desalted supernatant โดย Sephadex G-25 เจกรองเอาวัสดุรบกวน และใช้เป็นสารสกัดเอนไซม์ดิบเป็นวัดกิจกรรมสดรวมบนพื้นฐานของความความสามารถในการลด nitroblue tetrazolium (เอ็นบีที) โดยซูเปอร์ออกไซด์anion ที่สร้างขึ้น โดยระบบไรโบเฟลวินภายใต้แสงสว่าง หน่วยหนึ่งของสดถูกกำหนดเป็นจำนวนสารสกัดเอนไซม์ดิบต้องยับยั้งอัตราการลดลงของเอ็นบีที 50% (Beauchamp และFridovich 1971) กิจกรรมให้ APX ถูกวัด โดยการตรวจสอบลดลง absorbance ที่ 290 nm เป็น ASCถูกออกซิไดซ์ (ε = 2.8 mM−1cm−1) สำหรับในอย่างน้อย 1 นาที3 ml ผสมปฏิกิริยา ตามที่อธิบายไว้ โดยนากาโนะ และAsada (1981) กิจกรรมแมวถูก spectrophotometricallyวัด โดยการตรวจสอบปริมาณของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2 ε = 39.4 mM−1cm−1) ที่ 240 nmสำหรับที่ 3 นาที (หวง et al. 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ต้นข้าวแช่แข็ง (ประมาณ 200 มก.)
ได้รับการปั่นใน10 มล. 50
มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 7.0) ที่มี 1 มิลลิ Ethylenediaminetetraacetic
กรดและ polyvinylpyrrolidone 1% สำหรับ SOD
ทดสอบและกสทหรือการรวมกันกับการเพิ่มขึ้นของ
ASC มิลลิ 1 ในกรณีที่ การทดสอบ APX homogenate
ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 ×กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 ° C
และใสได้ทันทีโดยdesalted Sephadex G-
25
กรองเจลเพื่อเอาวัสดุที่รบกวนและใช้เป็นสารสกัดจากเอนไซม์.
กิจกรรม SOD รวมวัดบนพื้นฐานของตน
ความสามารถในการลด nitroblue tetrazolium (NBT) โดย superoxide
ไอออนสร้างโดยระบบ riboflavin
ภายใต้การส่องสว่าง หนึ่งหน่วยของ SOD
ถูกกำหนดเป็นปริมาณของสารสกัดจากเอนไซม์ที่จำเป็นในการยับยั้งอัตราการลดลงของ
NBT โดย 50% (Beauchamp และ
Fridovich 1971) กิจกรรม APX
วัดโดยการตรวจสอบการลดลงของการดูดกลืนแสงที่290 นาโนเมตรเป็น ASC
ถูกออกซิไดซ์ (ε = 2.8 มิลลิ-1
ซม-1) เป็นเวลาอย่างน้อย 1 นาทีใน 3 มล. ผสมปฏิกิริยาตามที่อธิบาย Nakano และAsada (1981) กิจกรรมที่กสท. ได้รับการ spectrophotometrically วัดโดยการตรวจสอบการบริโภคของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2; ε = 39.4 มิลลิ-1 ซม-1) ที่ 240 นาโนเมตรเป็นเวลาอย่างน้อย3 นาที (. Huang et al, 2006)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ต้นข้าวแช่แข็ง ( 200 มิลลิกรัม ) เป็นโฮโม
10 มิลลิลิตร 50 มิลลิโมลาร์โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 )

1 มิลบอนที่มีกรดพอลิวินิลไพร์โรลิโดน 1% สำหรับ SOD
และแมว ( หรือการเพิ่มของ
1 มม. ASC ในกรณีของ APX ตามลำดับ โดยแยกเป็นระดับที่ 12 ×
G สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C และ
นำ desalted ทันทีโดย Sephadex G -
25 gel filtration เอาเข้ามาใช้เป็นวัสดุและ

กิจกรรมเอนไซม์ สารสกัดสดทั้งหมดถูกวัดบนพื้นฐานของความสามารถในการลด nitroblue
tetrazolium ( NBT ) โดย Superoxide anion ที่สร้างขึ้นโดยระบบ Riboflavin

ภายใต้รัศมี หน่วยหนึ่งของ SOD ได้กำหนดปริมาณของเอนไซม์สกัด

ต้องยับยั้งลดอัตรา NBT โดย 50% ( Beauchamp และ
fridovich 1971 ) กิจกรรม APX วัดโดยการตรวจสอบ
ลดการดูดกลืนแสงที่ 290 nm เป็น ASC
ถูก oxidized ( ε = 2.8 มม. − 1
cm − 1
) อย่างน้อย 1 นาที
3 มิลลิลิตรปฏิกิริยาผสมตามที่อธิบายไว้โดยนากาโนะและ
อาซาดะ ( 1981 ) กิจกรรมแมวนี้
วัดโดยการตรวจสอบปริมาณการใช้ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ( H2O2
; ε = 39.4 − 1 cm − 1 มม

) อยู่ที่ 240 nm
อย่างน้อย 3 นาที ( Huang et al . 2006 )