2.5. Liquid chromatographic analysis of steviol glycosides
The method of Joint FAO/WHO Expert Committee on Food
Additives (JECFA) (2010) with various modifications was used.
Samples were filtered through a Sep-Pak cartridge (a reversephase
C-18 cartridge; Millipore, MA, USA) which retains steviol
glycosides. The cartridges were previously activated with 10 mL
of methanol (MeOH) and 10 mL of water. Every 10 mL of sample
was eluted with 2 mL of MeOH, and all methanolic fractions were
collected, filtered through a 0.45 lm membrane filter Millex-HV13
(Millipore) and then analysed by liquid chromatography using a
Kromasil 100 C18 precolumn (guard column) and Kromasil 100
C18 column (5 lm, 250 4.6 mm) (Scharlab, Barcelona, Spain).
The mobile phase consisted of two solvents: Solvent A, acetonitrile
and Solvent B, 10 mmol/L sodium phosphate buffer (pH = 2.6)
(32:68, v/v). Steviol glycosides were eluted under 1 mL/min flow
rate and the temperature was set at 40 C. Chromatograms were
recorded at 210 nm. The identification of steviol glycosides were
obtained out by using standards and by comparing the retention
times, while quantification was performed by external calibration
with standards.
2.6. Statistical analysis
2.5 การวิเคราะห์สารของเหลวของสารสตีวิออ glycosides
วิธีการของคณะกรรมการร่วม FAO / WHO ผู้เชี่ยวชาญในอาหาร
สารเติมแต่ง (JECFA) (2010) ที่มีการปรับเปลี่ยนต่างๆถูกนำมาใช้.
ตัวอย่างถูกกรองผ่าน ก.ย. ปาก? ตลับหมึก (ก reversephase
ตลับ C-18; อร์ค, MA, USA) ซึ่งยังคงมีสารสตีวิออ
ไกลโคไซด์ ตลับหมึกถูกเปิดใช้งานก่อนหน้านี้มี 10 มล
เมทานอล (เมธานอล) และ 10 มิลลิลิตรของน้ำ ทุก 10 มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่าง
ถูกชะมี 2 มลเมธานอล, และเศษส่วนเมทานอลทั้งหมดถูก
เก็บกรองผ่าน 0.45 LM เยื่อกรอง Millex-HV13
(อร์ค) และวิเคราะห์โดยของเหลว chromatography ใช้แล้ว
Kromasil 100 C18 precolumn (คอลัมน์ Guard) และ Kromasil 100
. C18 คอลัมน์ (? 5 LM 250 4.6 มิลลิเมตร) (Scharlab, บาร์เซโลนา, สเปน)
เฟสมือถือประกอบด้วยสองตัวทำละลาย: ตัวทำละลาย acetonitrile
และตัวทำละลาย B, 10 มิลลิโมล / ลิตรบัฟเฟอร์โซเดียมฟอสเฟต (pH = 2.6)
( 32:68, v / v) glycosides Steviol ถูกชะอายุต่ำกว่า 1 มิลลิลิตร / นาทีไหล
อัตราและอุณหภูมิอยู่ที่ 40 องศาเซลเซียส chromatograms ถูก
บันทึกไว้ที่ 210 นาโนเมตร บัตรประจำตัวของไกลโคไซด์ steviol ถูก
ได้โดยใช้มาตรฐานและโดยการเปรียบเทียบการเก็บรักษา
ครั้งในขณะที่ปริมาณได้ดำเนินการโดยการสอบเทียบภายนอก
ที่มีมาตรฐาน.
2.6 การวิเคราะห์ทางสถิติ
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.5 การวิเคราะห์ทางโครมาโทกราฟีของเหลว สารไกลโคไซด์วิธีการของ Joint FAO / WHO คณะกรรมการผู้เชี่ยวชาญอาหารสารเติมแต่ง ( jecfa ) ( 2010 ) ด้วยการปรับเปลี่ยนต่างๆที่ใช้ตัวอย่างถูกกรองผ่านตลับ ( reversephase เพื่อปาก- ตลับหมึก ; มิลลิ , MA , USA ) ซึ่งจะมีสารไกลโคไซด์ ตลับหมึกที่เคยใช้งานกับ 10 มล.เมทานอล ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) และ 10 มิลลิลิตรของน้ำ ทุก 10 ml ของตัวอย่างมีตัวอย่าง 2 มิลลิลิตร และปริมาณเมทานอลเป็นเศษส่วนเก็บ , กรองผ่านเยื่อกรอง millex-hv13 0.45 โดย( มิลลิ ) แล้ววิเคราะห์โดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวโดยใช้kromasil 100 c18 precolumn ( คอลัมน์ยาม ) และ kromasil 100คอลัมน์ c18 ( 5 , LM , 250 4.6 มิลลิเมตร ) ( scharlab , บาร์เซโลนา , สเปน )เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 2 ตัวทำละลายตัวทำละลาย , ไนและตัวทำละลาย B 10 mmol / L โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH = 2.6 )( 32:68 , V / V ) สตีวิโอไซด์และตัวอย่างได้ที่ 1 มิลลิลิตร / นาทีอัตราการไหลและอุณหภูมิถูกกำหนดไว้ที่อัตรา 40 ซี. กลิ่นคือบันทึกที่ 210 นาโนเมตร ตัวของสตีวิโอไซด์คือได้ โดยใช้มาตรฐานและโดยการเปรียบเทียบความคงทนในการจำครั้ง ในขณะที่ปริมาณการใช้สอบเทียบภายนอกด้วยมาตรฐาน2.6 สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล
การแปล กรุณารอสักครู่..