Background
Recently, Artemisia annua L. (annual or sweet wormwood) has received increasing attention due to the fact that the plant produces the sesquiterpenoid endoperoxide artemisinin, which today is widely used for treatment of malaria. The plant produces relatively small amounts of artemisinin and a worldwide shortage of the drug has led to intense research in order to increase the yield of artemisinin. In order to improve our understanding of terpene metabolism in the plant and to evaluate the competition for precursors, which may influence the yield of artemisinin, we have used qPCR to estimate the expression of 14 genes of terpene metabolism in different tissues.
Results
The four genes of the artemisinin biosynthetic pathway (amorpha-4,11-diene synthase, amorphadiene-12-hydroxylase, artemisinic aldehyde ∆11(13) reductase and aldehyde dehydrogenase 1) showed remarkably higher expression (between ~40- to ~500-fold) in flower buds and young leaves compared to other tissues (old leaves, stems, roots, hairy root cultures). Further, dihydroartemisinic aldehyde reductase showed a very high expression only in hairy root cultures. Germacrene A and caryophyllene synthase were mostly expressed in young leaves and flower buds while epi-cedrol synthase was highly expressed in old leaves. 3-Hydroxy-3-methyl-glutaryl coenzyme A reductase exhibited lower expression in old leaves compared to other tissues. Farnesyldiphosphate synthase, squalene synthase, and 1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase showed only modest variation in expression in the different tissues, while expression of 1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase was 7-8-fold higher in flower buds and young leaves compared to old leaves.
Conclusions
Four genes of artemisinin biosynthesis were highly expressed in flower buds and young leaves (tissues showing a high density of glandular trichomes). The expression of dihydroartemisinic aldehyde reductase has been suggested to have a negative effect on artemisinin production through reduction of dihydroartemisinic aldehyde to dihydroartemisinic alcohol. However, our results show that this enzyme is expressed only at low levels in tissues producing artemisinin and consequently its effect on artemisinin production may be limited. Finally, squalene synthase but not other sesquiterpene synthases appears to be a significant competitor for farnesyl diphosphate in artemisinin-producing tissues.
พื้นหลัง
เมื่อเร็วๆ นี้ อาร์ annua ลิตร ( รายปีหรือบอระเพ็ดหวาน ) ได้รับความสนใจเพิ่มขึ้น เนื่องจากโรงงานผลิตยา endoperoxide sesquiterpenoid ซึ่งวันนี้มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษาโรคมาลาเรียโรงงานผลิตในปริมาณที่ค่อนข้างเล็กของอาร์ทีมิซินิน และการขาดแคลนทั่วโลกของยาทำให้การวิจัยที่รุนแรงเพื่อเพิ่มผลผลิตของวิน เพื่อที่จะปรับปรุงความเข้าใจของเทอร์ปีน เมแทบอลิซึมในพืช และเพื่อประเมินการแข่งขันสำหรับการ ซึ่งอาจมีผลต่อผลผลิตของอาร์ทีมิซินิน ,เราได้ใช้ qpcr ประเมินการแสดงออกของยีนของเทอร์ปีน การเผาผลาญ 14 ในเนื้อเยื่อที่แตกต่างกัน ผล
4 ยีนของอาร์ทีมิซินินการทางเดิน ( amorpha-4,11-diene เทส amorphadiene-12-hydroxylase , ,artemisinic aldehydes ∆ 11 ( 13 ) และ อัลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส และพบบนที่สูง ( 1 ) การแสดงออกระหว่าง 40 - ~ ~ 500 เท่า ) ในดอกตูมและใบอ่อนเมื่อเทียบกับเนื้อเยื่ออื่น ๆ ( เก่าใบ , ลำต้น , ราก , วัฒนธรรมรากขน ) เพิ่มเติม dihydroartemisinic อัลดีไฮด์ และมีการแสดงออกสูงมาก เฉพาะในวัฒนธรรมรากขนgermacrene และ Caryophyllene synthase ส่วนใหญ่แสดงในใบอ่อนและดอกตูมขณะที่ EPI cedrol synthase มีแสดงในใบเก่า 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl Coenzyme A และมีการแสดงออกลดลงในใบเก่าเทียบกับเนื้อเยื่ออื่น ๆ เทสเทส farnesyldiphosphate Squalene ,1-deoxy-d-xylulose-5-phosphate reductoisomerase และพบเพียงรูปแบบเจียมเนื้อเจียมตัวในการแสดงออกในเนื้อเยื่อต่างๆ ในขณะที่การแสดงออกของ 1-deoxy-d-xylulose-5-phosphate synthase เป็น 7-8-fold สูงกว่า ดอกตูมและใบอ่อนเมื่อเทียบกับใบเก่า
สรุปสี่ยีนของอาร์ทีมิซินินในระดับสูงที่แสดงในดอกตูมและใบอ่อน ( เนื้อเยื่อแสดงความหนาแน่นสูงของต่อมไตรโคม ) การแสดงออกของ dihydroartemisinic อัลดีไฮด์ และมีการเสนอให้มีผลกระทบต่อการผลิต artemisinin โดยลด dihydroartemisinic อัลดีไฮด์ แอลกอฮอล์ dihydroartemisinic . อย่างไรก็ตามผลของเราแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์นี้จะแสดงเฉพาะในระดับต่ำและการผลิต artemisinin ในเนื้อเยื่อจึงมีผลต่อการผลิต artemisinin อาจจำกัด ในที่สุด สควอลีน และ แต่ไม่อื่น ๆแต่ไม่ เซสควิเทอร์ปีน ปรากฏเป็นคู่แข่งที่สำคัญสำหรับ farnesyl ไดฟอสเฟตในการผลิตเนื้อเยื่อ
ิน .
การแปล กรุณารอสักครู่..
