river is covered by ice from Januar

river is covered by ice from January to the middle of April.
Water samples (Fig. 1) were collected from two river water
sampling sites upstream and downstream of the city of Umea°
(U1 and U2), which has approximately 80,000 inhabitants. In
addition, seawater from Ljumviken (U3) was sampled bimonthly.
The Tisza River is a vital artery of Central Europe. It rises in
Ukraine and flows roughly along the Romanian border with
Hungary until it meets the Danube in northern Serbia. Floods
in spring and summer characterize the Tisza’s flow regime.
Bimonthly samples were collected in the river from four sites
in the vicinity of the city of Szolnok (Fig. 1). Szolnok is a city of
75,000 inhabitants. Raw sewage and secondary (biological)
treated effluent (i.e. using the activated sludge process) were
also collected at the wastewater treatment plant on each
sampling date to characterize the potential fecal input of the
viral markers into the river.
The Negro River joins the Amazon River at Manaus. The
city of Manaus has 1.4 million inhabitants within an area of
11.5 km2, and it is located 1450 km inland from the Atlantic
coast in the heart of the Amazon rain forest. The urban area is
strongly impacted by untreated sewage and garbage in these
river waters. Five different shoreline sampling locations were
selected (Fig. 1): upstream of the city (M1), in two small tributaries
crossing the city that flow directly into the main course
(M2 and M3) and two sites in southern Manaus (M4 and M5).
2.3. Collection of samples
The sampling and water analysis phase was conducted from
January 2011 to June 2012. Eighteen months of sample
collection was completed at each site. A description of the
characteristics of each river catchment studied, the mean flow
and yearly rainfall during the study period and the numbers of
samples are described in Table 1. Within the Mediterranean
areas (Glafkos and Llobregat Rivers) the impact of rainfall was
limited to spring and autumn. In the continental climate,
Tisza catchment, regular rain was observed over the sampling
months but flooding occurred in early spring. The Umea¨lven
subarctic climates had low precipitation due to the low
moisture content on air, although moderate rainfall occurred
in summer. Finally, the Negro river in Manaus had the typical
features of a tropical climate: twelve months at temperatures
not lower than 18 _C and a monthly average precipitation of
250 mm during the rainy season and 100 mm during the dry
period.
A total of 792 samples were analyzed across the 5 groups of
sampling sites. Samples with high levels of organic matter or
sand were permitted to sediment for 1 h, and the clarified
water was transferred to a new container. Seawater samples
were collected so as to avoid contamination with sand and
suspended macro algae. Turbidity, conductivity, pH and
temperature were determined for each water sample. On each
sampling day, an extra sample was collected and spiked with
adenovirus type 35 (105 viral particles/mL) as a process control,
including concentration, NA extraction and DNA
quantification.
2.4. Viral concentration and nucleic acid extraction
Detection of viruses in the environment requires the concentration
of viruses into small volumes. Common standardized
operational procedures (SOPs) were utilized for all
protocols employed in this study, including sampling, virus
concentration, nucleic acid extraction, quantitative PCR
(qPCR) assays and process controls and standard plasmid
preparation.
All water samples were collected and concentrated using
the skimmed milk flocculation (SMF) protocol developed in
previous studies (Calgua et al., 2008, 2013b). When analyzing
river or seawater samples, 10 L were collected and analyzed to
ensure representative volumes for virus detection, whereas
50 mL of wastewater were enough to quantify viral genome
copies. When necessary, conductivity was adjusted to a
minimum of 1.5 mS/cm2 in fresh water samples by adding sea
salts (Sigma, Aldrich Chemie GMBH, Steinheim, Germany),
and then both river water and seawater samples were acidified
to pH 3.5 using 1N HCl. A pre-flocculated skimmed milk
solution was prepared by dissolving 10 g skimmed milk powder (Difco, Detroit, MI, USA) in 1 L of artificial seawater at pH 3.5 (Sigma, Aldrich Chemie GMBH, Steinheim, Germany)and adding this to each sample to a final concentration of

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แม่น้ำถูกปกคลุม โดยน้ำแข็งจากเดือนมกราคมถึงกลางเดือนเมษายน
น้ำตัวอย่าง (Fig. 1) ได้รวบรวมจากแม่น้ำสองน้ำ
สุ่มตัวอย่างเว็บไซต์ขั้นต้นน้ำ และปลายน้ำขององศาเมือง Umea
(U1 และ U2), ซึ่งมีประมาณ 80000 คน ใน
เพิ่ม ทะเลจาก Ljumviken (U3) ได้ตัวอย่าง bimonthly
Tisza แม่น้ำเจ้าพระยาเป็นหลอดเลือดสำคัญของยุโรปกลาง มันขึ้นใน
ยูเครนและขั้นตอนคร่าว ๆ ตามที่โรมาเนียเส้นขอบด้วย
ฮังการีจนกระทั่งเป็นไปตามแม่น้ำดานูบในเซอร์เบียเหนือ น้ำท่วม
ในฤดูใบไม้ผลิและฤดูร้อนลักษณะระบอบการไหลของ Tisza.
ตัวอย่าง Bimonthly ถูกเก็บรวบรวมในแม่น้ำจากอเมริกา 4
นักการเมืองของ Szolnok (Fig. 1) Szolnok เป็นเมืองของ
75, 000 คน น้ำเสียดิบและรอง (ชีวภาพ)
รับน้ำทิ้ง (เช่น โดยใช้กระบวนการเปิดใช้งาน) ได้
เก็บที่โรงบำบัดน้ำเสียในแต่ละ
วันลักษณะของอินพุต fecal มีศักยภาพของการสุ่มตัวอย่างการ
เครื่องหมายไวรัสในแม่น้ำ
Negro แม่น้ำเจ้าพระยารวมกับแม่น้ำอเมซอนที่เมโนส ใน
เมืองเมโนสได้ 1.4 ล้านคนภายในพื้นที่ของ
11.5 km2 และเป็นส่วนในอยู่ 1450 กิโลเมตรจากมหาสมุทรแอตแลนติก
ชายฝั่งของป่าฝนอเมซอน พื้นที่เมือง
ขอรับผลกระทบจากน้ำเสียไม่ถูกรักษาและขยะในนี้
แม่น้ำ 5 ชายฝั่งต่าง ๆ สุ่มตัวอย่างพื้นที่ถูก
เลือก (Fig. 1): ขั้นต้นน้ำเมือง (M1), เล็กสายสอง
ข้ามเมืองที่ไหลตรงเข้าสู่หลัก
(M2 and M3) และไซต์สองใต้เมโนส (M4 และ M5) .
2.3 คอลเลกชันของตัวอย่าง
วิธีการสุ่มตัวอย่างและน้ำในขั้นตอนวิเคราะห์จาก
2011 มกราคมมิถุนายน 2555 เดือนสิบแปดของอย่าง
ชุดเสร็จในแต่ละไซต์ คำอธิบายของการ
ศึกษาลักษณะของแต่ละลุ่มน้ำแม่น้ำ การไหลเฉลี่ย
และปริมาณน้ำฝนรายปีในช่วงระยะเวลาศึกษาและจำนวน
ตัวอย่างไว้ในตารางที่ 1 ภายในเมดิเตอร์เรเนียน
พื้นที่ (Glafkos และแม่น้ำ Llobregat) ผลกระทบของฝนถูก
จำกัดฤดูใบไม้ผลิและฤดูใบไม้ร่วง ในสภาพภูมิอากาศที่ยุโรป,
ลุ่มน้ำ Tisza ฝนปกติถูกสังเกตผ่านการสุ่มตัวอย่าง
เดือนแต่น้ำท่วมที่เกิดขึ้นในช่วงฤดูใบไม้ผลิ Umea¨lven
subarctic สภาพอากาศมีฝนต่ำสุดจากต่ำสุด
เนื้อหาบนอากาศ แม้ว่าปริมาณน้ำฝนปานกลางเกิดความชื้น
ในฤดูร้อน สุดท้าย แม่ Negro เมโนสได้ปกติ
ลักษณะของภูมิอากาศเขตร้อน: สิบสองเดือนที่อุณหภูมิ
ไม่ต่ำกว่า 18 _C และมีฝนเฉลี่ยรายเดือนของ
250 มิลลิเมตร ในช่วงฤดูฝน และ 100 มม.ขณะแห้ง
รอบระยะเวลาการ
จำนวน 792 ตัวอย่างที่วิเคราะห์ทั้ง 5 กลุ่ม
ไซต์การสุ่มตัวอย่าง ตัวอย่างระดับสูงของอินทรีย์ หรือ
ทรายได้รับอนุญาตให้ตะกอนสำหรับ 1 h และที่ใส
น้ำถูกถ่ายโอนไปบรรจุใหม่ ตัวอย่างน้ำทะเล
ถูกรวบรวมไว้เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อน ด้วยทราย และ
ถูกระงับสาหร่ายแม ความขุ่นของน้ำ นำ ค่า pH และ
อุณหภูมิถูกกำหนดสำหรับแต่ละตัวอย่างน้ำ ใน
วันการสุ่มตัวอย่าง ตัวอย่างเพิ่มเติมการรวบรวม และ spiked ด้วย
ชนิด adenovirus 35 (105 ไวรัสอนุภาค/มล.) เป็นตัวควบคุมกระบวนการ,
ความเข้มข้น นาสกัด และดีเอ็นเอ
นับ
2.4 สกัดเข้มข้นและกรดนิวคลีอิกไวรัส
ตรวจหาไวรัสในสิ่งแวดล้อมต้องมีความเข้มข้น
ของไวรัสเป็นวอลุ่มขนาดเล็ก มาตรฐานทั่วไป
ขั้นตอนปฏิบัติงาน (Sop) ที่ใช้ทั้งหมด
โปรโตคอลที่ทำงานในการศึกษานี้ รวมทั้งสุ่มตัวอย่าง ไวรัส
เข้มข้น กรดนิวคลีอิกสกัด assays PCR
(qPCR) เชิงปริมาณ และการควบคุมกระบวนการ และมาตรฐาน plasmid
เตรียม.
ตัวอย่างน้ำทั้งหมดถูกรวบรวม และเข้มข้นโดยใช้
พัฒนาโพรโทคอล flocculation (SMF) นมขาดมันเนยใน
ศึกษาก่อนหน้า (Calgua et al., 2008, 2013b) เมื่อวิเคราะห์
อย่างแม่น้ำหรือทะเล 10 L ถูกรวบรวม และวิเคราะห์เพื่อ
ให้แน่ใจว่าไดรฟ์ข้อมูลตัวแทนสำหรับการตรวจหาไวรัส ขณะ
50 mL ของน้ำเสียได้เพียงพอที่จะกำหนดปริมาณไวรัสจีโนม
สำเนา เมื่อจำเป็น มีการปรับปรุงนำไป
ต่ำสุดของ mS 1.5 cm2 ในตัวอย่างน้ำโดยการเพิ่มซี
เกลือ (ซิก Aldrich Chemie GMBH, Steinheim เยอรมนี),
แล้ว ทั้งสองแม่น้ำและทะเลอย่างถูก acidified
ไปค่า pH 3.5 ใช้ 1N HCl นมขาดมันเนยก่อน flocculated
โซลูชันที่เตรียมยุบ 10 กรัมผงนมขาดมันเนย (Difco ดีทรอยต์ MI สหรัฐอเมริกา) ใน L 1 ของทะเลเทียมที่ค่า pH 3.5 (Steinheim ซิก Aldrich Chemie GMBH เยอรมนี) และเพิ่มซึ่งแต่ละอย่างให้เข้มข้นสุดท้ายของ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม่น้ำที่ปกคลุมไปด้วยน้ำแข็งตั้งแต่เดือนมกราคมถึงกลางเดือนเมษายน
ตัวอย่างน้ำ (รูปที่ 1). ที่ถูกเก็บรวบรวมจากสองน้ำจากแม่น้ำ
เว็บไซต์สุ่มตัวอย่างต้นน้ำและปลายน้ำของเมืองอูเมีย°
(U1 และ U2) ซึ่งมีประมาณ 80,000 คนที่อาศัยอยู่ ใน
นอกจากนี้น้ำทะเลจาก Ljumviken (U3) เป็นตัวอย่างซึ่งใน
Tisza แม่น้ำเป็นหลอดเลือดแดงที่สำคัญของยุโรปกลาง มันเพิ่มขึ้นใน
ยูเครนและไหลประมาณตามแนวชายแดนโรมาเนียกับ
ฮังการีจนกว่าจะได้พบกับแม่น้ำดานูบในภาคเหนือของประเทศเซอร์เบีย น้ำท่วม
ในฤดูใบไม้ผลิและฤดูร้อนลักษณะ Tisza ระบอบการปกครองของการไหลของ
ตัวอย่างสองเดือนครั้งที่ถูกเก็บไว้ในแม่น้ำมาจากสี่เว็บไซต์
ในบริเวณใกล้เคียงของเมือง Szolnok (รูปที่ 1). Szolnok เป็นเมือง
75,000 คนที่อาศัยอยู่ เน่าและมัธยมศึกษา (ชีวภาพ)
น้ำทิ้งได้รับการรักษา (เช่นการใช้กระบวนการตะกอนเร่ง) ได้รับการ
เก็บยังที่โรงงานบำบัดน้ำเสียในแต่ละ
วันการเก็บตัวอย่างลักษณะใส่อุจจาระที่มีศักยภาพของ
เครื่องหมายไวรัสลงไปในแม่น้ำ
นิโกรแม่น้ำร่วมแม่น้ำแอมะซอน ที่มาเนาส์
เมืองมาเนาส์มี 1.4 ล้านคนที่อาศัยอยู่ในพื้นที่ของ
11.5 กิโลเมตร 2 และมันตั้งอยู่ 1450 km ทะเลจากมหาสมุทรแอตแลนติก
ชายฝั่งในหัวใจของป่าฝนอเมซอน เขตเมืองจะ
ส่งผลกระทบอย่างรุนแรงจากน้ำเสียได้รับการรักษาและขยะเหล่านี้ใน
น้ำแม่น้ำ ห้าสถานที่ชายฝั่งสุ่มตัวอย่างที่แตกต่างกันได้รับ
เลือก (รูปที่ 1.) ต้นน้ำของเมือง (M1) ในสองแควขนาดเล็ก
ข้ามเมืองที่ไหลลงไปในหลักสูตรหลัก
(M2 และ M3) และสองสถานที่ในภาคใต้มาเนาส์ (M4 และ M5 )
2.3 เก็บตัวอย่าง
ขั้นตอนการเก็บตัวอย่างและการวิเคราะห์น้ำได้ดำเนินการตั้งแต่
มกราคม 2011 ถึงเดือนมิถุนายนปี 2012 สิบแปดเดือนของตัวอย่าง
การเก็บรวบรวมเสร็จสมบูรณ์ที่แต่ละเว็บไซต์ รายละเอียดของ
ลักษณะของแต่ละการเก็บกักน้ำแม่น้ำศึกษาการไหลเฉลี่ย
และปริมาณน้ำฝนเป็นประจำทุกปีในช่วงระยะเวลาการศึกษาและหมายเลขโทรศัพท์ของ
กลุ่มตัวอย่างที่อธิบายไว้ในตารางที่ 1 ภายในเมดิเตอร์เรเนียน
พื้นที่ (Glafkos และ Llobregat แม่น้ำ) ผลกระทบจากปริมาณน้ำฝนที่ถูก
จำกัด ไว้ที่ฤดูใบไม้ผลิ และฤดูใบไม้ร่วง ในทวีปภูมิอากาศ,
Tisza กักเก็บน้ำฝนปกติก็สังเกตเห็นในช่วงการเก็บตัวอย่าง
เดือน แต่น้ำท่วมที่เกิดขึ้นในต้นฤดูใบไม้ผลิ Umea¨lven
ภูมิอากาศ subarctic มีฝนต่ำเนื่องจากต่ำ
ความชื้นในอากาศถึงแม้ว่าปริมาณน้ำฝนที่เกิดขึ้นในระดับปานกลาง
ในช่วงฤดูร้อน สุดท้ายแม่น้ำนิโกรในมาเนาส์มีทั่วไป
คุณสมบัติของสภาพภูมิอากาศเขตร้อน: สิบสองเดือนที่อุณหภูมิ
ไม่ต่ำกว่า 18 _C และฝนเฉลี่ยรายเดือนของ
250 มิลลิเมตรในช่วงฤดูฝนและ 100 มิลลิเมตรในช่วงแล้ง
ระยะเวลา
รวม 792 ตัวอย่าง ถูกนำมาวิเคราะห์ใน 5 กลุ่มของ
เว็บไซต์ที่เก็บตัวอย่าง กลุ่มตัวอย่างที่มีระดับสูงของสารอินทรีย์หรือ
ทรายได้รับอนุญาตให้ตะกอนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงและชี้แจง
น้ำถูกย้ายไปอยู่ในภาชนะใหม่ ตัวอย่างน้ำทะเล
ที่เก็บได้เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนด้วยทรายและ
ระงับสาหร่ายแมโคร ความขุ่นการนำกรดด่างและ
อุณหภูมิที่ถูกกำหนดสำหรับแต่ละตัวอย่างน้ำ ในแต่ละ
วันสุ่มตัวอย่างตัวอย่างพิเศษได้รับการเก็บรวบรวมและถูกแทงด้วย
ประเภท adenovirus 35 (105 อนุภาคไวรัส / มิลลิลิตร) การควบคุมกระบวนการ
รวมทั้งความเข้มข้นสกัด NA และ DNA
ปริมาณ
2.4 ความเข้มข้นของเชื้อไวรัสนิวคลีอิกและกรดสกัด
การตรวจหาไวรัสในสภาพแวดล้อมที่ต้องมีความเข้มข้น
ของไวรัสเข้าไปในไดรฟ์ขนาดเล็ก มาตรฐานทั่วไป
ขั้นตอนการดำเนินงาน (SOPs) ถูกนำมาใช้สำหรับทุก
โปรโตคอลที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้รวมถึงการเก็บตัวอย่างไวรัส
เข้มข้นสกัดกรดนิวคลีอิกปริมาณ PCR
(qPCR) การตรวจและการควบคุมกระบวนการและพลาสมิดมาตรฐาน
การเตรียม
การเก็บตัวอย่างน้ำทั้งหมดและเข้มข้นโดยใช้
ตะกอนนมไขมันต่ำ (SMF) โปรโตคอลที่พัฒนาขึ้นใน
การศึกษาก่อนหน้า (Calgua et al., 2008, 2013b) เมื่อวิเคราะห์
ตัวอย่างแม่น้ำหรือทะเล 10 ลิตรซึ่งถูกเก็บรวบรวมและวิเคราะห์เพื่อ
ให้แน่ใจว่าไดรฟ์ที่เป็นตัวแทนในการตรวจหาเชื้อไวรัสในขณะที่
50 มลน้ำเสียก็เพียงพอที่จะประเมินจีโนมของไวรัส
สำเนา เมื่อมีความจำเป็นการนำถูกปรับให้
ต่ำกว่า 1.5 mS / cm 2 ในตัวอย่างน้ำจืดโดยการเพิ่มน้ำทะเล
เกลือ (ซิกม่าดิช Chemie GMBH, Steinheim, เยอรมนี),
และจากนั้นทั้งน้ำจากแม่น้ำและน้ำทะเลตัวอย่างกรด
ที่ pH 3.5 โดยใช้ 1N HCl . นมก่อน flocculated ไขมันต่ำ
ทางออกที่ถูกจัดทำขึ้นโดยการละลาย 10 กรัมไขมันต่ำนมผง (Difco, ดีทรอยต์, MI, USA) ใน 1 ลิตรของน้ำทะเลเทียมที่ pH 3.5 (ซิกม่าดิช Chemie GMBH, Steinheim, เยอรมนี) และเพิ่มนี้ไปยังแต่ละ ตัวอย่างที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม่น้ำที่ปกคลุมด้วยน้ำแข็ง จากเดือนมกราคมถึงกลางเดือนเมษายน .
น้ำ ( รูปที่ 1 ) เก็บจากน้ำ
เว็บไซต์ต้นและท้ายเมือง Umea บริเวณ ( U1 U2
( และ ) ซึ่งมีประมาณ 80 , 000 คน ใน
นอกจากนี้น้ำทะเลจาก ljumviken ( U3 ) ตัวอย่างทุกสองสัปดาห์ .
ทิสซาแม่น้ำเป็นเส้นเลือดสำคัญของยุโรปกลาง มันเพิ่มขึ้นใน
ยูเครนและไหลประมาณชายแดนโรมาเนียกับฮังการีจนกว่าจะตรงตาม
ดานูบในภาคเหนือของเซอร์เบีย น้ำท่วม
ในฤดูใบไม้ผลิและฤดูร้อนลักษณะการปกครองการไหลของทิสซา .
ตัวอย่างการเก็บรวบรวมความสามัคคีในแม่น้ำจากสี่เว็บไซต์
ในปริมณฑลของเมือง Szolnok ( รูปที่ 1 ) โซลนอค เป็นเมืองของ
75 , 000 คน น้ำเสียดิบและมัธยมศึกษา ( ชีวภาพ )
รักษาบำบัด ( เช่นการใช้กากตะกอนน้ำเสียกระบวนการ )
ยังเก็บที่โรงบำบัดน้ำเสียในแต่ละคนอาจจะวิเคราะห์ข้อมูล

) ศักยภาพของเครื่องหมายไวรัสลงแม่น้ำ .
นิโกรแม่น้ำร่วม Amazon River ใน Manaus .
เมือง Manaus มี 1.4 ล้านคนภายในพื้นที่ของ
11.5 ตารางกิโลเมตร และตั้งอยู่ 1450 กม. ภายในประเทศจากมหาสมุทรแอตแลนติก
ชายฝั่งในหัวใจของ Amazon ป่าฝน พื้นที่เมือง
ขอผลกระทบจากขยะและสิ่งปฏิกูลและในน่านน้ำ
River เหล่านี้ ห้าที่แตกต่างกันสถานที่ชายฝั่งจำนวน
เลือก ( รูปที่ 1 ) : ต้นน้ำของเมือง ( M1 ) สองแควเล็ก
ข้ามเมืองที่ไหลเข้าสู่
หลักสูตรหลักโดยตรง ( M2 และ M3 ) และสองแห่งในมาเนาส์ภาคใต้ ( M4 และ M5 ) .
2.3การเก็บตัวอย่างและการวิเคราะห์ตัวอย่างน้ำ

อายุ 3 เดือนมกราคม 2554 ถึงเดือนมิถุนายน 2555 สิบแปดเดือนของการเก็บตัวอย่าง
เสร็จในแต่ละเว็บไซต์ อธิบายลักษณะของแต่ละลุ่มน้ำแม่น้ำ

ศึกษา หมายถึงการไหลและปริมาณน้ำฝนรายปีในช่วงระยะเวลาการศึกษาและตัวเลข
ตัวอย่างอธิบายไว้ในตารางที่ 1 ในทะเลเมดิเตอร์เรเนียน
พื้นที่ ( glafkos Llobregat และแม่น้ำ ) ผลกระทบของปริมาณ
( ฤดูใบไม้ผลิและฤดูใบไม้ร่วง ในบรรยากาศแบบคอนติเนนตอล ,
ทิสซาพื้นที่รับน้ำฝนปกติพบว่า กว่า 2 เดือน แต่น้ำท่วม
เกิดขึ้นในฤดูใบไม้ผลิ ส่วน Umea ตั้ง lven
subarctic สภาพอากาศที่มีฝนน้อยเนื่องจากปริมาณความชื้นในอากาศต่ำ

ฝนตกปานกลาง แต่เกิดขึ้นในฤดูร้อน ในที่สุดนิโกรแม่น้ำใน Manaus มี คุณสมบัติโดยทั่วไปของสภาพภูมิอากาศเขตร้อน :

12 เดือนที่อุณหภูมิไม่ต่ำกว่า 18 _c และการตกตะกอน
250 มม. เฉลี่ยต่อเดือนในช่วงฤดูฝน และ 100 มิลลิเมตรในช่วงเวลาแห้ง
.
รวม 792 วิเคราะห์ทั้ง 5 กลุ่ม
เว็บไซต์คน กลุ่มตัวอย่างที่มีระดับสูงของอินทรีย์หรือได้รับอนุญาตให้ตะกอนทราย
1 H ,และชี้แจง
น้ำโอนไปบรรจุใหม่ น้ำทะเลตัวอย่าง
ครั้งนี้เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนด้วยทรายและ
ระงับแมโครสาหร่าย ค่าความขุ่น , pH และอุณหภูมิถูกกำหนดสำหรับแต่ละ
น้ำตัวอย่าง ในแต่ละวัน
สุ่มตัวอย่างพิเศษที่ถูกเก็บรวบรวมและ C
อะดีโนไวรัสชนิด 35 ( 105 ไวรัสอนุภาค / ml ) เป็น กระบวนการควบคุม
รวมถึงสมาธิ นา การสกัดและปริมาณดีเอ็นเอ
.
2.4 . ไวรัส ความเข้มข้นและการสกัดกรดนิวคลีอิก
การตรวจหาไวรัสในสภาพแวดล้อมที่ต้องใช้ความเข้มข้นของไวรัสในเล่ม
ขนาดเล็ก โดยทั่วไปกระบวนการดำเนินงานมาตรฐาน ( SOPs )

ใช้สำหรับโปรโตคอลที่ใช้ในการศึกษานี้ รวมถึงตัวอย่างของไวรัส
, การสกัดกรดนิวคลีอิก
เทคนิคเชิงปริมาณ ( qpcr ) วิธีและกระบวนการควบคุมและมาตรฐานสายพันธุ์

ตัวอย่างการเตรียม น้ำทั้งหมดถูกรวบรวมและเข้มข้นใช้
นมรวมตะกอน ( SMEs ) โปรโตคอลที่พัฒนาขึ้นในการศึกษานี้ (
calgua et al . , 2008 , 2013b ) เมื่อวิเคราะห์ตัวอย่างน้ำ หรือน้ำทะเล
10 ผมได้รวบรวมและวิเคราะห์เพื่อให้ไดรฟ์สำหรับการตรวจหาไวรัสแทน

)50 มล. ของน้ำมีมากพอที่จะหาสำเนาพันธุกรรม
ไวรัส เมื่อจำเป็น ซึ่งมีการปรับให้
อย่างน้อย 1.5 ms / cm2 ในตัวอย่างน้ำโดยการเพิ่มเกลือทะเล
( ซิกม่า Aldrich , steinheim CHEMIE GmbH , Germany ) ,
แล้วทั้งแม่น้ำและน้ำทะเลจำนวนที่ปรับ pH 3.5 ใช้กับ HCl
. ก่อน flocculated นม
สารละลายที่เตรียมโดยละลาย 10 กรัม นมผง ( difco ดีทรอยต์ , MI , สหรัฐอเมริกา ) ใน 1 ลิตรของน้ำทะเลเทียม ที่ pH 3.5 ( Sigma , อัลดริชเคมี GmbH , steinheim , เยอรมนี ) และเพิ่มนี้แต่ละตัวอย่างมีความเข้มข้นสุดท้าย