Escherichia coli’s DNA polymerase I

Escherichia coli’s DNA polymerase IV (Pol IV/DinB), a member of the Y family of error-prone polymerases, is induced during
the SOS response to DNA damage and is responsible for translesion bypass and adaptive (stress-induced) mutation. In this
study, the localization of Pol IV after DNA damage was followed using fluorescent fusions. After exposure of E. coli to DNAdamaging
agents, fluorescently tagged Pol IV localized to the nucleoid as foci. Stepwise photobleaching indicated60% of the
foci consisted of three Pol IV molecules, while40% consisted of six Pol IV molecules. Fluorescently tagged Rep, a replication
accessory DNA helicase, was recruited to the Pol IV foci after DNA damage, suggesting that the in vitro interaction between Rep
and Pol IV reported previously also occurs in vivo. Fluorescently tagged RecA also formed foci after DNA damage, and Pol IV
localized to them. To investigate if Pol IV localizes to double-strand breaks (DSBs), an I-SceI endonuclease-mediated DSB was
introduced close to a fluorescently labeled LacO array on the chromosome. After DSB induction, Pol IV localized to the DSB site
in70% of SOS-induced cells. RecA also formed foci at the DSB sites, and Pol IV localized to the RecA foci. These results suggest
that Pol IV interacts with RecA in vivo and is recruited to sites of DSBs to aid in the restoration of DNA replication.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ Escherichia coli ของ iv (Pol IV / DinB) สมาชิกของครอบครัวของ Y polymerases
ผิดพลาดได้ง่ายจะถูกเหนี่ยวนำให้เกิดในช่วงการตอบสนองสัญญาณขอความช่วยเหลือในการเสียหายของดีเอ็นเอและเป็นผู้รับผิดชอบบายพาสtranslesion และการปรับตัว (ความเครียดที่เกิดขึ้น) การกลายพันธุ์ ในการนี้การศึกษา, การแปลของ Pol IV หลังจากที่เกิดความเสียหายดีเอ็นเอตามการใช้ Fusions เรืองแสง
หลังจากได้รับของเชื้อ E. coli เพื่อ DNAdamaging
ตัวแทน fluorescently ติดแท็ก Pol IV ที่มีการแปลไปเป็น nucleoid foci photobleaching แบบขั้นตอนที่ระบุ? 60% ของ
foci ประกอบด้วยสามโมเลกุล Pol IV ในขณะที่ 40% ประกอบด้วยหก Pol IV โมเลกุล แท็ก fluorescently
ตัวแทนการจำลองแบบอุปกรณ์helicase ดีเอ็นเอได้รับคัดเลือกไป foci Pol IV
หลังจากที่เกิดความเสียหายดีเอ็นเอบอกว่าการทำงานร่วมกันในหลอดทดลองระหว่างตัวแทนและPol IV รายงานก่อนหน้านี้ยังเกิดขึ้นในร่างกาย fluorescently ติดแท็ก foci ยังเกิดขึ้นหลังจาก RECA เสียหายของดีเอ็นเอและ Pol IV
ที่มีการแปลให้กับพวกเขา ในการตรวจสอบหาก Pol IV localizes แบ่งดับเบิลสาระ (DSBs) ซึ่งเป็น DSB I-SCEI พึ่ง-endonuclease
ถูกนำมาใกล้กับที่มีข้อความfluorescently อาร์เรย์ Laco บนโครโมโซม หลังจากการเหนี่ยวนำ DSB, Pol IV ที่มีการแปลไปยังเว็บไซต์ DSB
มีอะไรบ้าง? 70% ของเซลล์ที่เกิดสัญญาณขอความช่วยเหลือ Reca ยังได้ตั้ง foci ที่เว็บไซต์ DSB และ Pol IV ที่มีการแปลไป foci RECA ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า Pol IV โต้ตอบกับ Reca ในร่างกายและได้รับคัดเลือกไปยังเว็บไซต์ของ DSBs เพื่อช่วยในการฟื้นฟูของการจำลองดีเอ็นเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Escherichia coli DNA polymerase ของ 4 ( พล 4 / dinb ) , สมาชิกของครอบครัวของข้อผิดพลาดได้ง่าย polymerases Y ,
) ใน SOS ตอบสนองต่อความเสียหาย DNA และเป็นผู้รับผิดชอบต่อบายพาส translesion และปรับตัว ( stress-induced ) การกลายพันธุ์ ในการศึกษานี้
, ภาษาท้องถิ่นของพล 4 หลังจากที่ความเสียหายของดีเอ็นเอตามใช้ fusions เรืองแสง หลังจากการเปิดรับของ E . coli เพื่อ dnadamaging
ตัวแทนfluorescently Tagged พล 4 ท้องถิ่นที่เป็น nucleoid เป็นบันทึก . คน photobleaching พบ  60% ของ
บันทึกประกอบด้วยสามพล 4 โมเลกุล ในขณะที่  40 % จำนวน 6 พล 4 โมเลกุล fluorescently Tagged ตัวแทน , การจำลองแบบโมเลกุลดีเอ็นเอ
เสริม คือ การคัดเลือกให้พล 4 บันทึกหลังจากที่ความเสียหายของดีเอ็นเอในหลอดทดลองชี้ให้เห็นว่าปฏิสัมพันธ์ระหว่างตัวแทน
และ พล 4 รายงานก่อนหน้านี้ยังเกิดขึ้นในสิ่งมีชีวิต fluorescently แท็กรีก้าเกิดขึ้นยังบันทึกหลังจากที่ความเสียหายของดีเอ็นเอ และพล 4
ถิ่นพวกเขา ตรวจสอบถ้า พล 4 localizes เพื่อ strand แบ่งคู่ ( dsbs ) , i-scei เอนโดนิวคลีเอส ( DSB เป็น
แนะนำใกล้เคียงกับ fluorescently ติดป้ายเลโคเรย์บนโครโมโซม หลังการ DSB โพล 4 ถิ่นที่เว็บไซต์
บใน  70% ของ SOS กระตุ้นเซลล์ รีก้ายังขึ้นวางใน DSB เว็บไซต์ และ พล 4 ถิ่นที่จะวางรีก้า . ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าปฏิสัมพันธ์กับรีก้า
พล 4 ชนิดคือการคัดเลือกในเว็บไซต์ของ dsbs เพื่อช่วยเหลือในการฟื้นฟูการจำลองดีเอ็นเอ