To assay the chitinase activity, on

To assay the chitinase activity, one gram of crown tissue was ground using a pre-chilled pestle and mortar with 0.1 M sodium citrate buffer (pH 5.0) at 4 C. The homogenate was centrifuged at 10,000 rpm for 20 min. The supernatant was used as a crude enzyme extract for assaying chitinase activity. Similarly, for the extracts of b-1, 3-glucanase and phenylalanine ammonia-lyase (PAL) enzymes, 0. 05 M sodium acetate buffer (pH 5.0) and 0.1 M sodium borate buffer (pH 7.0) at 4 C respectively were used. The changes in the chitinase activity were determined by colorimetric assay described by Boller and Mauch (1988). The PAL activity was determined as the rate of conversion of L-phenylalanine to transcinnamic acid at 290 nm as described by Dickerson et al. (1984) and b-1, 3-glucanase activity was assayed by the laminarindinitrosalicylic acid method (Pan et al., 1991). The results from these assays were graphed using Microsoft Excel.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อกิจกรรม chitinase assay หนึ่งกรัมของเนื้อเยื่อคราวน์มีพื้นใช้ pestle ก่อนเย็นและปูน ด้วย 0.1 M โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 5.0) ที่ค. 4 Homogenate ถูก centrifuged ที่ 10000 rpm สำหรับ 20 นาที Supernatant ถูกใช้เป็นเอนไซม์ดิบแยกสำหรับ assaying chitinase กิจกรรม ในทำนองเดียวกัน สำหรับสารสกัดจากเอนไซม์ b-1, 3-คัด และ phenylalanine แอมโมเนีย-lyase (PAL) 0 05 M โซเดียม acetate บัฟเฟอร์ (pH 5.0) และ 0.1 M borate โซเดียมบัฟเฟอร์ (pH 7.0) ที่ 4 C ตามลำดับก็ใช้ การเปลี่ยนแปลงในกิจกรรม chitinase ถูกกำหนด โดยวิเคราะห์เทียบเคียงโดย Boller และ Mauch (1988) กำหนดกิจกรรม PAL อัตราการแปลงของ L phenylalanine กรด transcinnamic ที่ 290 nm ดังที่ Dickerson et al. (1984) และบี-1 คัด 3 กิจกรรมถูก assayed โดยวิธีกรดของ laminarindinitrosalicylic (Pan et al., 1991) ผลลัพธ์จาก assays เหล่านี้ถูกใช้สร้างกราฟโดยใช้ Microsoft Excel

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สำหรับวิเคราะห์การกิจกรรมไคติเนสซึ่งเป็นหนึ่งกรัมของเนื้อเยื่อมงกุฎเป็นพื้นดินโดยใช้สากก่อนแช่เย็นและปูน 0.1 M โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 5.0) ที่ 4 C. homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที สารละลายที่ใช้เป็นสารสกัดเอนไซม์ดิบ assaying กิจกรรมไคติเนส ในทำนองเดียวกันกับสารสกัดจาก b-1, 3 glucanase และ phenylalanine แอมโมเนียอ​​ร์เมต (PAL) เอนไซม์ 0. 05 M โซเดียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ (pH 5.0) และ 0.1 บัฟเฟอร์ borate M โซเดียม (pH 7.0) ที่ 4 C ตามลำดับถูกนำมาใช้ . การเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมไคติเนสได้รับการพิจารณาโดยวิธีสีอธิบายโดย Boller และ Mauch (1988) PAL กิจกรรมที่ได้รับการกำหนดเป็นอัตราการแปลงของ L-phenylalanine จะ transcinnamic กรดที่ 290 นาโนเมตรตามที่อธิบายไว้โดยนายอำเภอและอัล (1984) และ b-1 กิจกรรม 3 glucanase ได้รับการวิเคราะห์โดยวิธีกรด laminarindinitrosalicylic (แพน, et al., 1991) ผลที่ได้จากการตรวจเหล่านี้ถูกกราฟใช้โปรแกรม Microsoft Excel

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทดสอบเอนไซม์ไคติเนสกิจกรรมหนึ่งกรัมเนื้อเยื่อมงกุฎคือพื้นดินโดยใช้ก่อนแช่เย็นครกกับ 0.1 โมลาร์โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 5.0 ) ที่อุณหภูมิ 4 C แยกเป็นระดับที่ 10 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที และนำใช้เป็นเอนไซม์ที่สกัดสำหรับ assaying กิจกรรมของเอนไซม์ . ในทำนองเดียวกัน สำหรับสารสกัดจาก B-1 ต่างและ phenylalanine แอมโมเนีย lyase ( PAL ) เอนไซม์ , 005 M โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 5.0 ) และ 0.1 โมลาร์โซเดียมบอเรตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) ที่อุณหภูมิ 4 C ตามลำดับ สถิติที่ใช้ การเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของเอนไซม์โดยวิธี Colorimetric วิเคราะห์และอธิบายโดยเมาช์บอลเลอร์ ( 1988 ) พัลกิจกรรมถูกกำหนดเป็นอัตราการแปลงของกรดแอล - ฟีนิลอะลานีนให้ transcinnamic 290 nm ตามที่อธิบายไว้โดยดิเคอร์สัน et al . ( 1984 ) และ B1กิจกรรมของเอนไซม์โดยวิธีต่าง laminarindinitrosalicylic ( กรดแพน et al . , 1991 ) ผลลัพธ์ที่ได้จากวิธีเหล่านี้เป็นกราฟการใช้ Microsoft Excel